冰凍血小板的臨床療效及其保存液二甲亞砜對人體的影響研究*

江 靈，王 潔，楊 倩，楊 莉，黃遠(yuǎn)帥△

(1.西南醫(yī)科大學(xué)附屬醫(yī)院輸血科，四川瀘州 646000；2.西南醫(yī)科大學(xué)研究生院，四川瀘州 646000)

輸血治療在臨床疾病的診治中發(fā)揮著越來越重要的作用，其中，血小板輸注更是難以替代?，F(xiàn)階段，我國的血小板處于嚴(yán)重供不應(yīng)求的狀態(tài)，在臨床治療中若只靠臨時(shí)分離血小板，遠(yuǎn)不能滿足需要，所以探尋長期有效的血小板保存方法就顯得極為重要。因此，本文對保存液二甲亞砜(DMSO)對人體的影響及冰凍血小板的臨床輸注療效進(jìn)行研究，現(xiàn)將結(jié)果報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1一般資料 選擇2016年1月1日至2017年6月30日在西南醫(yī)科大學(xué)附屬醫(yī)院行血小板輸注治療的住院患者，納入符合條件且資料完整的患者共計(jì)319例，按輸注血小板制品的不同分為3組，即單采組(新鮮單采血小板)105例，濃縮組(手工濃縮血小板)102例，冰凍組(冰凍血小板)112例,男女比為1.00∶1.02，年齡3～79歲，平均(38.5±20.3)歲?；颊咭话阗Y料見表1。納入標(biāo)準(zhǔn)：根據(jù)我國現(xiàn)行的行業(yè)規(guī)范和準(zhǔn)則，符合血小板輸注指征并且臨床資料完整的患者?；颊吆图覍倬橥?，并都簽署了統(tǒng)一的知情同意書。排除標(biāo)準(zhǔn)：排除治療期間輸注過非單一品種血小板制品的患者，病情危重放棄治療者或資料不全者。

表1 研究對象一般資料(n)

1.2方法

1.2.1血小板的制備與種類 血小板均由瀘州市中心血站制備提供，1個(gè)治療量血小板的標(biāo)準(zhǔn):(1)單采血小板,血小板計(jì)數(shù)大于或等于2.5×1011個(gè)/袋。(2)手工濃縮血小板6～12 U,血小板計(jì)數(shù)大于或等于2.0×1011個(gè)/袋。(3)冰凍血小板是由有效期內(nèi)的單采血小板按行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)加入DMSO制備而成，DMSO的最終濃度為4%～5%。

1.2.2冰凍血小板臨床療效評價(jià)

1.2.2.1比較3組研究對象24 h血小板糾正指數(shù)(CCI)及臨床療效 記錄研究對象身高，體質(zhì)量，輸注前血小板計(jì)數(shù)，輸注后24 h計(jì)數(shù)，輸注血小板的總量，計(jì)算CCI，24 h CCI>4.5判斷為有效。CCI=(輸后血小板計(jì)數(shù)-輸前血小板計(jì)數(shù))×體表面積/輸入血小板總數(shù)，體表面積=0.006 1×身高(cm)+0.012 8×體質(zhì)量(kg)-0.015 29。

1.2.2.2比較輸血不良反應(yīng)率 記錄3組研究對象輸注血小板后發(fā)生輸血不良反應(yīng)的情況。

1.2.3評價(jià)DMSO對人體的影響 回顧性統(tǒng)計(jì)分析冰凍組的112位患者輸注冰凍血小板前后的生化指標(biāo)值，即丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(ALT)、天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(AST)、總清蛋白(TP)、堿性磷酸酶(ALP)。將單采組和冰凍組做對比分析，分別計(jì)算輸注新鮮單采血小板和冰凍血小板后生化指標(biāo)的變化值，對差值進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。評價(jià)輸注不同劑量冰凍血小板后生化指標(biāo)的差異，將相同疾病的患者按輸入的冰凍血小板劑量的不同進(jìn)行分組對比分析。隨機(jī)回訪冰凍組50例患者，根據(jù)復(fù)查生化指標(biāo)的時(shí)間間隔小于等于6個(gè)月的納入半年組，共31例；大于6個(gè)月的納入1年組，共19例。對比分析兩組患者生化指標(biāo)的變化值。

2 結(jié) 果

2.13組患者輸注血小板后24 h CCI及臨床療效的比較 冰凍組患者輸注血小板后24 h CCI低于單采組和濃縮組，3組間24 h CCI比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(Z=15.288,P<0.01)；血小板的輸注有效率3組間比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=5.574,P=0.062)，見表2。

表2 3組患者輸注后24 h CCI及臨床有效率的比較

2.23組患者輸注血小板后的輸血不良反應(yīng)率比較 本研究中，3組患者輸注血小板后發(fā)生輸血不良反應(yīng)分別為：單采組8例(7.4%)，濃縮組14例(13.7%)，冰凍組5例(4.5%)，3組間比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=6.054，P=0.048)。單采組與濃縮組間比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=2.031，P=0.154)，單采組與冰凍組間比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=0.958，P=0.328)，濃縮組和冰凍組間比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=5.660，P<0.01)，冰凍血小板不良反應(yīng)率低于手工濃縮血小板。

2.3輸注冰凍血小板前后生化指標(biāo)的比較 冰凍組的112例患者輸注冰凍血小板前后的生化指標(biāo)的比較見表3。輸注冰凍血小板前后的ALT、AST、TP、ALP比較差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。

2.4單采組和冰凍組生化指標(biāo)變化值比較 兩組研究對象輸注血小板前后的生化指標(biāo)的變化值比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05),見表4。

2.5輸注不同劑量的冰凍血小板后生化指標(biāo)變化值的比較 相同疾病的患者輸注不同劑量的冰凍血小板后生化指標(biāo)的變化值比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，見表5。

表3 輸注冰凍血小板前后生化指標(biāo)的比較[M(P25,P75)]

2.6輸注冰凍血小板后不同時(shí)間生化指標(biāo)的比較 回訪50例輸注冰凍血小板的患者，輸注相同劑量的冰凍血小板后不同時(shí)間段的生化指標(biāo)變化比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，見表6。

表4 單采組和冰凍組輸注血小板后生化指標(biāo)變化值的比較[M(P25,P75)]

表5 相同疾病患者輸注不同劑量冰凍血小板后生化指標(biāo)變化值的比較[M(P25,P75)]

a:1例樣本未計(jì)算均數(shù)和標(biāo)準(zhǔn)差；b:2例樣本數(shù)據(jù)的變化值相同

表6 輸注冰凍血小板后不同時(shí)間生化指標(biāo)的比較[M(P25,P75)]

3 討 論

在急性大出血、血小板功能障礙性出血等方面，血小板輸注具有顯著而難以替代的作用，是輸血治療的重要手段。血小板輸注使用的主要有常溫短時(shí)間保存的單采血小板，手工濃縮血小板，以及長期冷低溫保存的冰凍血小板，冰凍血小板的保存時(shí)間、供給形式均優(yōu)于其他兩種血小板，但關(guān)于冰凍血小板的療效及保存液的毒副作用的報(bào)道甚少，本研究對這兩方面進(jìn)行了研究。

本研究結(jié)果表明，輸注冰凍血小板后24 h CCI低于其他兩組，這是因?yàn)檠“逶诒鶅霰４婧徒鈨鰪?fù)融的過程中受到損傷、激活，引發(fā)聚集[1]，而被激活的血小板輸入體內(nèi)后，會立刻參與止血被消耗掉。而3種血小板的輸注有效率比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=5.574，P=0.062)。PéREZFERRER等[2]研究認(rèn)為，冰凍血小板比新鮮單采血小板在止血功能上更有優(yōu)勢，在搶救用血時(shí)，冰凍血小板是最佳的選擇，它能夠快速供給、即刻止血，可有效緩解危急情況。

患者輸注血小板后的輸血不良反應(yīng)主要是非溶血性發(fā)熱反應(yīng)和皮疹過敏，3組輸血不良反應(yīng)率比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.048)。冰凍血小板的輸血不良反應(yīng)率低于新鮮單采血小板和手工濃縮血小板，因?yàn)楹髢烧叨际窃?0～24 ℃的條件下振蕩保存，易于細(xì)菌的生長繁殖[3-5]，而冰凍血小板深低溫保存，抑制了細(xì)菌的生長繁殖。同時(shí)，由于手工濃縮血小板在制備時(shí)混入的紅細(xì)胞和白細(xì)胞較多，HLA抗原復(fù)雜，大大提升了同種免疫的反應(yīng)率。

本文對比分析了112例患者輸注冰凍血小板前后的AST、ALT、TP、ALP等生化指標(biāo)，輸注前后比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)?；颊咻斪⒈鶅鲅“濉⑿迈r單采血小板后生化指標(biāo)的變化值比較差異亦無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。冰凍血小板是由新鮮單采血小板添加DMSO保存液制備而成，本研究結(jié)果提示DMSO保存液不會影響患者的肝功能。

文中輸注不同劑量的冰凍血小板，患者生化指標(biāo)改變并無明顯差異。相同疾病的患者，輸注相同治療量的冰凍血小板后，間隔不同時(shí)間檢測其生化指標(biāo)比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)?；颊咻斢靡欢▌┝康牡蜐舛鹊腄MSO保存液是安全可靠的，不會對人體產(chǎn)生明顯的不良反應(yīng)，這與文獻(xiàn)[6-7]報(bào)道一致。

目前國內(nèi)外有關(guān)DMSO的研究證明，DMSO屬于低毒性物質(zhì)，其安全劑量是0.92 g/kg體質(zhì)量[8]。2007年初我國的國家食品與藥品監(jiān)督管理局就確切指出了采用10%的DMSO凍存干細(xì)胞，4%～5%的DMSO凍存血小板用于臨床可不經(jīng)洗滌直接輸注[9]，至今仍鮮有關(guān)于DMSO輸注導(dǎo)致不良反應(yīng)的文獻(xiàn)報(bào)道[10-13]。而冰凍血小板復(fù)融后洗滌去除DMSO的過程，不僅耗費(fèi)人力、財(cái)力和物力，還增加了血小板受細(xì)菌污染、機(jī)械損傷和功能損失的風(fēng)險(xiǎn)。而冰凍血小板復(fù)融后未經(jīng)洗滌直接輸注，因其保留有穩(wěn)定的溶酶體膜和血漿中全部凝血因子，與洗滌后的血小板相比較，不但增強(qiáng)了血小板止血效果，還提高了機(jī)體的免疫力和抗感染的能力。

因冰凍血小板可以大批量的長時(shí)間儲存，且使用方便快捷，在緊急情況能有效保障供給，搶救危重患者，因而在軍事方面也有著極其重要的效用[14-15]。低溫冰凍保存的血小板，還可長期儲存特殊血型及HLA配型需要的單一供者的血小板，滿足臨床特殊患者的血小板輸注需求。冰凍血小板的長期保存，可以最大限度地分離保存獻(xiàn)血者的血小板，緩解目前血小板供不應(yīng)求的現(xiàn)狀，因而冰凍血小板具有一定的臨床推廣價(jià)值。