心肌梗死后心力衰竭患者血清microRNA-155 表達(dá)水平及其臨床意義

朱江

（紹興市中醫(yī)院 重癥醫(yī)學(xué)，浙江 紹興 312499）

心力衰竭發(fā)病機(jī)制較復(fù)雜，其臨床癥狀、體征等缺乏特異性，發(fā)病率、住院率及死亡率較高，臨床常用檢查方法不能很好的評(píng)估患者病情[1]。MicroRNA（miRNA）可介導(dǎo)多種病理生理過(guò)程，其在冠狀動(dòng)脈粥樣硬化性心臟?。ㄒ韵潞?jiǎn)稱冠心?。⑿牧λソ叩刃难芗膊〉陌l(fā)生、發(fā)展中具有重要意義[2]。miR-155在冠心病患者血清中水平升高[3-4]。但miR-155在心肌梗死后心力衰竭患者中的水平及意義尚不清楚。本文對(duì)心肌梗死后心力衰竭患者血清miR-155水平進(jìn)行研究，探討其臨床意義。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2016年1月—2017年12月紹興市中醫(yī)院收治的陳舊性心肌梗死后心力衰竭患者作為心力衰竭組，陳舊性心肌梗死無(wú)心力衰竭患者作為心肌梗死組，健康體檢者作為對(duì)照組，每組80例。心力衰竭組：男性48例，女性32例；年齡（63.31±7.29）歲。心肌梗死組：男性46例，女性34例；年齡（62.79±7.42）歲。對(duì)照組：男性45例，女性35例，年齡（63.41±7.13）歲。Framingham心力衰竭診斷標(biāo)準(zhǔn)：患者有基礎(chǔ)心血管疾病病史，休息或運(yùn)動(dòng)時(shí)出現(xiàn)乏力、呼吸困難及下肢浮腫等癥狀；有呼吸急促、心動(dòng)過(guò)速、胸腔積液、頸靜脈壓力增高、肺部啰音、外周水腫及肝腫大等體征；有心臟雜音、第三心音、心腔擴(kuò)大、超聲心動(dòng)圖異常及利鈉肽水平升高等心臟功能、結(jié)構(gòu)異常證據(jù)；收縮性或舒張性心力衰竭特征，則可做出心力衰竭診斷。納入標(biāo)準(zhǔn)：心力衰竭組和心肌梗死組均有陳舊性心肌梗死，心力衰竭組符合Framingham心力衰竭診斷標(biāo)準(zhǔn)[5]，心肌梗死組不符合心力衰竭診斷標(biāo)準(zhǔn)；對(duì)照組身體健康。排除標(biāo)準(zhǔn)：妊娠期及哺乳期女性；嚴(yán)重肝腎功能障礙；患先天性心臟病、肥厚性心肌病及主動(dòng)脈夾層等其他心臟疾?。恍脑葱孕菘?、嚴(yán)重心律失常及心源性暈厥史；惡性腫瘤、嚴(yán)重感染性疾病及拒絕參與。3組年齡、性別比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。

1.2 方法

收集患者年齡、性別、實(shí)驗(yàn)室檢查指標(biāo)及心功能等臨床資料。

1.2.1 血清miR-155水平測(cè)定抽取3組外周靜脈血4 ml，與乙二胺四乙酸抗凝管中放置15 min，3 000 r/min離心10 min，取上清液置于環(huán)氧樹脂管中，提取血清總RNA（試劑盒購(gòu)自美國(guó)Sigma公司），采用逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)（reverse transcriptionpolymerase chain reaction,RT-PCR）（試 劑 盒 購(gòu) 自 美國(guó)Sigma公司）測(cè)定血清miR-155（引物由廣州復(fù)基因有限公司設(shè)計(jì)合成）水平。miR-155引物，正向引物：5，-TGCCTCGAACTGCACTCGTAG-3；反向引物：5，-GCGAGCAGAGAATAATAGGAC-3。以U6為內(nèi)參照，反應(yīng)條件：95℃預(yù)變性5 s，60℃變性20 s，62℃退火1 s，72℃延伸1 s，共40個(gè)循環(huán)，血清miR-155以2-ΔΔCt法表示。

1.2.2 心功能測(cè)定采用超聲心動(dòng)圖（德國(guó)西門子-18彩色多普勒超聲顯像儀）測(cè)定左心室射血分?jǐn)?shù)（left ventricular ejection fraction,LVEF）、左室后壁厚度（left ventricular posterior wall thickness,LVPW）及左室舒 張 末 期 內(nèi) 徑（left ventricular end diastolic diameter,LVEDD）。所有患者由2名經(jīng)驗(yàn)豐富的超聲科醫(yī)生進(jìn)行超聲心動(dòng)圖檢查，采用常規(guī)超聲心動(dòng)圖的檢查方法于胸骨旁左心長(zhǎng)軸切面，用M型超聲在左室腱索水平測(cè)量LVPW和LVEDD，用雙平面改良Simpson法于心尖四腔心切面測(cè)量LVEF。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

數(shù)據(jù)分析采用SPSS20.0統(tǒng)計(jì)軟件。計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（±s）表示，比較用t檢驗(yàn)或方差分析，進(jìn)一步兩兩比較用LSD-t檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料以構(gòu)成比或率（%）表示，比較用χ2檢驗(yàn)，繪制ROC曲線，P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 3組血清miR-155水平比較

對(duì)照組、心肌梗死組、心力衰竭組血清miR-155水 平 分 別 為（1.00±0.11）、（1.42±0.17）和（1.87±0.16），經(jīng)方差分析，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（F=682.162，P=0.000）；心力衰竭組患者血清miR-155水平高于對(duì)照組和心肌梗死組（P＜0.05），心肌梗死組患者血清miR-155水平高于對(duì)照組（P＜0.05）。

2.2 血清miR-155對(duì)心肌梗死后心力衰竭的診斷價(jià)值

血清miR-155診斷心肌梗死后心力衰竭的ROC曲線下面積為0.921（95% CI：0.842，0.963），臨界值為1.670，敏感性為88.73%（95% CI：0.375，0.964），特異性為92.14%（95% CI：0.792，0.976）。以血清miR-155≥1.67（臨界值）為高表達(dá)，＜1.67為低表達(dá)，則miR-155高表達(dá)51例，低表達(dá)29例。見圖1。

2.3 血清miR-155與心肌梗死后心力衰竭患者一般情況和生物化學(xué)指標(biāo)的關(guān)系

miR-155高表達(dá)組和miR-155低表達(dá)組患者年齡、性別、空腹血糖（fasting blood sugar,FPG）、高密度脂蛋白膽固醇（high density lipoprotein cholesterol,HDL-C）、低 密 度 脂 蛋 白 膽 固 醇（low density lipoprotein cholesterol,LDL-C）、肌酐（Creatinine，Cr） 及甘油三酯（Triglyceride,TG）比較，經(jīng)t或χ2檢驗(yàn)，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。miR-155高表達(dá)組和miR-155低表達(dá)組患者氨基N末端B型腦鈉肽前體（N terminal pro B type natriuretic peptide,NT-proBNP）水平比較，經(jīng)t檢驗(yàn)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；miR-155高表達(dá)組高于miR-155低表達(dá)組。見表1。

圖1 血清miR-155診斷心肌梗死后心力衰竭的ROC曲線

表1 兩組患者一般情況和生物化學(xué)指標(biāo)比較

2.4 兩組患者超聲心動(dòng)圖檢查結(jié)果比較

miR-155高表達(dá)組和miR-155低表達(dá)組LVEF和LVEDD水平比較，經(jīng)t檢驗(yàn)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；miR-155高表達(dá)組LVEF低于miR-155低表達(dá)組，miR-155高表達(dá)組LVEDD高于miR-155低表達(dá)組。兩組LVPW比較，經(jīng)t檢驗(yàn)，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。見表2。

2.5 兩組患者心功能分級(jí)構(gòu)成比比較

miR-155高表達(dá)組與miR-155低表達(dá)組心功能分級(jí)構(gòu)成比比較，經(jīng)χ2檢驗(yàn)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=23.854，P=0.000）；miR-155高表達(dá)組Ⅲ、Ⅳ級(jí)患者比例高于miR-155低表達(dá)組。見表3。

表2 兩組患者超聲心動(dòng)圖檢查結(jié)果比較（±s）

表2 兩組患者超聲心動(dòng)圖檢查結(jié)果比較（±s）

組別 n LVEF/% LVPW/mm LVEDD/mm miR-155高表達(dá)組 51 28.78±1.87 11.53±1.67 71.24±8.57 miR-155低表達(dá)組 29 32.12±1.94 10.94±1.82 54.35±8.46 t值 7.577 1.470 8.513 P值 0.000 0.146 0.000

表3 兩組患者心功能分級(jí)構(gòu)成比比較 例（%）

3 討論

冠心病是中老年人死亡的主要原因之一，其中急性心肌梗死病情危重，因此受到重視。心肌梗死指因冠狀動(dòng)脈痙攣或冠狀動(dòng)脈斑塊破裂引起的冠狀動(dòng)脈血管急性持續(xù)閉塞而造成的心肌組織缺血缺氧，從而導(dǎo)致心肌壞死的疾病。隨著血管成形術(shù)和新型藥物的廣泛應(yīng)用，多數(shù)心肌梗死患者得到有效救治，但有部分患者經(jīng)歷心室的不良重構(gòu)，增加心肌梗死后心力衰竭的發(fā)生[6]。因心肌梗死后心力衰竭住院率和病死率比較高，早期進(jìn)行診斷和治療具有重要意義。目前臨床常用的評(píng)估心力衰竭嚴(yán)重程度的方法有超聲、心電圖、心室射血分?jǐn)?shù)、步行實(shí)驗(yàn)及心臟耐力實(shí)驗(yàn)等，但由于心力衰竭的臨床癥狀和體征不典型，常規(guī)方法不能很好的評(píng)估患者病情。

miRNA為內(nèi)源性非編碼小分子單鏈RNA，其機(jī)制為通過(guò)降解目標(biāo)mRNA或抑制目標(biāo)mRNA的翻譯而發(fā)揮生物學(xué)作用[7]。miRNA可參與細(xì)胞的增殖、分化、凋亡及組織發(fā)育等多種病理生理過(guò)程的調(diào)節(jié)，在心血管疾病的發(fā)病過(guò)程中發(fā)揮重要作用[8]。miR-155是miRNA家族成員之一，其在B細(xì)胞、T細(xì)胞、單核細(xì)胞及內(nèi)皮細(xì)胞等多種細(xì)胞中表達(dá)，參與細(xì)胞的增殖、分化、凋亡及組織發(fā)育等過(guò)程的調(diào)節(jié)[9]。miR-155為抑癌基因，在多種惡性腫瘤中表達(dá)異常[10-11]。miR-155在造血和免疫調(diào)節(jié)中也具有重要作用[12-13]，其還參與肺纖維化過(guò)程，對(duì)肺纖維化具有促進(jìn)作用[14]。miR-155在冠心病的發(fā)病過(guò)程中也具有重要作用[15]，miR-155可調(diào)節(jié)巨噬細(xì)胞凋亡，通過(guò)巨噬細(xì)胞調(diào)節(jié)對(duì)冠心病的發(fā)生產(chǎn)生影響；miR-155與免疫炎癥反應(yīng)關(guān)系也比較密切，可參與天然免疫應(yīng)答反應(yīng)和獲得性免疫應(yīng)答反應(yīng)，通過(guò)促進(jìn)炎癥反應(yīng)促進(jìn)冠心病的發(fā)展[16-17]。

血清miR-155診斷心肌梗死后心力衰竭的ROC曲線下面積結(jié)果表明，血清miR-155在心肌梗死后心力衰竭的診斷中具有重要價(jià)值，可作為心肌梗死后心力衰竭的潛在診斷指標(biāo)。NT-proBNP在體外可穩(wěn)定存在24 h，半衰期為60～120 min，具有較高的敏感性，是評(píng)估心力衰竭病情嚴(yán)重程度的生物標(biāo)志物。NTproBNP水平越高表示心力衰竭的進(jìn)展越快[18]。LVEF是診斷心力衰竭的重要指標(biāo)，可敏感的反應(yīng)患者的心室功能，為心臟收縮期和舒張期的比值。當(dāng)LVEF＞50%時(shí)表示患者心功能較差[19]；LVEDD也是評(píng)估心臟功能的重要指標(biāo)，LVEDD水平升高提示心臟功能減退[20]； 心功能分級(jí)也反映患者的心臟功能狀態(tài)，心功能分級(jí)越高，表明心功能越差[21]。本研究結(jié)果表明，血清miR-155可作用心肌梗死后心力衰竭病情嚴(yán)重程度的標(biāo)志物。miR-155低表達(dá)組和miR-155高表達(dá)組LVPW比較無(wú)差異，考慮可能與本文樣本量有限有關(guān)，需后續(xù)增加樣本量進(jìn)一步研究。

綜上所述，心肌梗死后心力衰竭患者血清miR-155水平升高，在心肌梗死后心力衰竭的診斷和病情評(píng)估中具有重要作用，有望成為心肌梗死后心力衰竭診斷和病情嚴(yán)重程度評(píng)估的標(biāo)志物。