血清血脂及載脂蛋白濃度與乳腺癌分子分型及Ki-67表達(dá)水平的相關(guān)性研究

陳妮娜 范怡暢 尚 昆 楊 婧 曹邦偉

(首都醫(yī)科大學(xué)附屬北京友誼醫(yī)院腫瘤中心，北京 100050)

近年來，癌癥發(fā)病人數(shù)逐年增加，據(jù)統(tǒng)計(jì)[1]，乳腺癌是女性發(fā)病率最高的惡性腫瘤，2018年，美國約有26.6萬患者被診斷為乳腺癌，4.1萬患者死于乳腺癌，且乳腺癌的發(fā)病年齡進(jìn)一步年輕化。進(jìn)一步研究[2-3]顯示，乳腺癌預(yù)后與雌激素受體(estrogen receptor，ER)、孕激素受體(progesterone receptor，PR)、人表皮生長因子受體-2(human epidermal growth factor receptor-2，Her-2)和Ki-67(細(xì)胞增生的核標(biāo)志)有關(guān)。2013年，St.Gallen會議[4]提出根據(jù)上述4種分子標(biāo)志，將乳腺癌臨床病理分型為Luminal A型、Luminal B型、Her-2過表達(dá)型、三陰性乳腺癌4個類型，各分子亞型間在分子遺傳學(xué)特征、發(fā)病年齡、臨床特征、惡性程度、治療敏感性及預(yù)后等方面均存在差異。循證醫(yī)學(xué)證據(jù)[5-6]表明，血脂濃度與乳腺癌的發(fā)病有關(guān)，且在不同分子分型的乳腺癌中血脂濃度也不盡相同。本研究通過比較分析乳腺癌患者的血脂代謝水平，觀察血清血脂及載脂蛋白濃度在乳腺癌不同分子分型的患者間的差異及與Ki-67表達(dá)水平的關(guān)系。

1 對象與方法

1.1 研究對象

本研究選用2012年1月至2017年5月乳腺癌術(shù)后且未接受化學(xué)藥物治療(以下簡稱化療)者為研究對象，入選標(biāo)準(zhǔn)：①所有病例均經(jīng)術(shù)后病理確診；②術(shù)前未使用降脂藥物；③術(shù)前未行放射治療與化學(xué)藥物治療(以下簡稱放化療)與內(nèi)分泌治療；④排除糖尿病、冠狀動脈粥樣硬化性心臟病(以下簡稱冠心病)、腎臟疾病、代謝綜合征等影響血脂代謝的疾??；⑤術(shù)后病理資料完整，包括：病理類型、ER、PR、HER-2、細(xì)胞增生標(biāo)志(cell proliferation associated nuclear antigen, Ki-67)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移等。參照2013年St.Gallen標(biāo)準(zhǔn)[4]，通過Ki-67、ER、PR、Her-2，將乳腺癌患者區(qū)分為Luminal A型和Luminal B型以及基底細(xì)胞樣型乳腺癌(Her-2過表達(dá)型)和三陰型乳腺癌四大類。

1.2 方法

1.2.1 血脂監(jiān)測

采集所有患者空腹靜脈血，測定高密度脂蛋白膽固醇(high density lipoprotein-cholesterol，HDL-C)、低密度脂蛋白膽固醇(low density lipoprotein-cholesterol，LDL-C)、膽固醇(cholesterol，TC)和載脂蛋白B(apolipoprotein B，ApoB)、載脂蛋白A(apolipoprotein A，ApoA)及三酰甘油(triglyceride，TG)等數(shù)值測定，并對全部血清標(biāo)本進(jìn)行血脂監(jiān)測。采用本院生化儀界定的血脂參考值范圍：LDL-C 0～4.14 mmol/L，HDL-C 1.04～1.55 mmol/L，TG 0～1.71 mmol/L，TC 0～5.18 mmol/L，ApoA 100～205 mg/dL，ApoB 63～119 mg/dL。

1.2.2 Ki-67表達(dá)水平檢測

采用免疫組織化學(xué)法EnVision二步法檢測143例乳腺癌患者Ki-67水平，在細(xì)胞核中將顏色為棕褐色顆粒設(shè)定作陽性染色判定標(biāo)準(zhǔn)，運(yùn)用分級方法，根據(jù)陽性細(xì)胞占比將已經(jīng)被染色的細(xì)胞核分成0、1、2、3共4級，判定標(biāo)準(zhǔn)分別為陽性細(xì)胞總量占比為0～5%、6%～25%、26%～50%、超過50%，判定陽性率水平的標(biāo)準(zhǔn)如下：低表達(dá)判定標(biāo)準(zhǔn)為Ki-67<14%，高表達(dá)判定標(biāo)準(zhǔn)為Ki-67≥14%。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

2 結(jié)果

2.1 病例臨床特征

本研究共納入143名乳腺癌患者，年齡32～75歲，平均年齡為(52.32±2.16)歲，所有患者都有生育史，沒有家族癌癥病史，4組患者年齡及絕經(jīng)后人數(shù)構(gòu)成，差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，詳見表1。

2.2 4組患者血脂濃度比較

除ApoA外，TC、HDL-C、LDL-C、ApoB及TG在各類分型的乳腺癌患者間的差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.001)。HDL-C在Her-2過表達(dá)型患者明顯低于Luminal A型和Luminal B型患者；LDL-C在Luminal A型明顯低于Her-2過表達(dá)型及三陰型患者，在Luminal B型明顯低于Her-2過表達(dá)型患者；TC在Her-2過表達(dá)型患者的濃度顯然遠(yuǎn)超Luminal A型和Luminal B型患者；ApoB在Luminal A和Luminal B型明顯低于Her-2過表達(dá)型患者。TG在Luminal B型患者中濃度最低，詳見表2。

表1 四組患者臨床特征比較Tab. 1 Clinical characteristics of four groups of patients

表2四組患者血脂濃度比較
Tab.2Bloodlipidlevelsinfourgroupsofpatients

ItemLuminal A(n=31)Luminal B(n=51)Her-2 overexpressing(n=33)Triple-negative(n=28)FPHDL-C/(mmol·L-1)1.15±0.36???1.09±0.29???0.88±0.260.89±0.158.052<0.001LDL-C/(mmol·L-1)0.39±0.41???3.81±0.35???4.72±0.544.11±0.49△△△619.032<0.001TC/(mmol·L-1)5.31±0.53???5.41±0.62???6.29±0.635.79±0.6418.523<0.001ApoB/(mg·dL-1)1.31±0.35???1.29±0.23???1.71±0.381.51±0.2914.764<0.001ApoA/(mg·dL-1)1.51±0.251.67±0.411.52±0.571.59±0.241.423>0.05TG/(mmol·L-1)2.69±0.24▲2.52±0.572.67±0.31▲2.79±0.26▲2.975<0.05

***P<0.001vsHer-2 overexpressing;△△△P<0.001vsLuminal A;▲P<0.05vsLuminal B；HDL-C：high density lipoprotein-cholesterol;LDL-C：low density lipoprotein-cholesterol;TC：cholesterol；ApoB：apolipoprotein B;ApoA：apolipoprotein A;TG：triglyceride.

2.3 乳腺癌患者血脂濃度與Ki-67水平相關(guān)性分析

在143例入選乳腺癌患者的Ki-67指數(shù)水平的監(jiān)測中，高表達(dá)者96例(Ki-67≥14%)，低表達(dá)者47例(Ki-67<14%)。此后將血清血脂及載脂蛋白與Ki-67做相關(guān)性分析。Ki-67與LDL-C(r=0.868，P<0.001)、ApoB(r=0.835，P<0.001)、TC(r=0.897，P<0.001)呈正相關(guān)；與HDL-C(r=-0.821，P<0.001)呈負(fù)相關(guān)；與ApoA(r=0.073，P>0.05)、TG (r=0.098，P>0.05)無相關(guān)性，詳見表3。

表3 乳腺癌患者血脂濃度與Ki-67水平相關(guān)性分析Tab. 3 Correlation between blood lipid levels and Ki-67 levels in patients with breast cancer

HDL-C：high density lipoprotein-cholesterol;LDL-C：low density lipoprotein-cholesterol;TC：cholesterol；ApoB：apolipoprotein B;ApoA：apolipoprotein A;TG：triglyceride.

3 討論

脂質(zhì)代謝異常與惡性腫瘤的相關(guān)性是近年來的研究熱點(diǎn)，研究[7-9]表明血脂濃度與多種惡性腫瘤的發(fā)病和進(jìn)展有關(guān)，尤其是乳腺惡性腫瘤。但目前有關(guān)血脂及載脂蛋白濃度與乳腺癌各分子分型之間的關(guān)聯(lián)研究沒有相關(guān)報(bào)道，本研究的主要目的是探討和分析乳腺癌患者的血脂與其分子亞型之間的關(guān)聯(lián)。

本文采用回顧性分析的方法，首先在143個罹患乳腺癌的患者中，筆者發(fā)現(xiàn)Ki-67與LDL-C、ApoB、TC濃度呈正相關(guān)關(guān)系；與HDL-C濃度呈負(fù)相關(guān)關(guān)系；與Apo-A、TG濃度無關(guān)聯(lián)性。上述結(jié)果表明血脂濃度的異常程度與Ki-67呈正相關(guān)，提示血脂異?？赡苁侨橄侔┗颊哳A(yù)后不良的因素。

膽固醇常見于細(xì)胞膜內(nèi)，也是構(gòu)成生物膜的關(guān)鍵組分。體內(nèi)的膽固醇濃度如果處于正常范圍，能夠在生理層面發(fā)揮巨大的作用，如果膽固醇濃度過高，人體免疫系統(tǒng)功能則將遭到抑制，免疫監(jiān)視和免疫清除兩種功能都會被進(jìn)一步削弱[10]。另有研究[11]表明，他汀類降脂藥物可明顯降低乳腺癌患者的復(fù)發(fā)率，進(jìn)一步研究[12]顯示，口服親脂性藥物辛伐他汀可使患者乳腺癌復(fù)發(fā)的風(fēng)險降低，而親水性他汀類藥物對乳腺癌復(fù)發(fā)無明顯影響，該結(jié)論與筆者的研究結(jié)果相一致，三酰甘油也是體內(nèi)重要的血脂成分，參與人體能量代謝，血清中至少75%的三酰甘油都是以極低密度脂蛋白膽固醇(very low density lipoprotein cholesterol，VLDL-C)和乳糜微粒(chylomicron，CM)形式運(yùn)輸[13]，既往研究[14]顯示，乳腺癌患者血清TC及TG高于非乳腺癌患者，表明TG可能與乳腺癌的發(fā)生與進(jìn)展有關(guān)。以上結(jié)論與本研究結(jié)果表明，定期對不同分子亞型的乳腺癌患者進(jìn)行血脂檢測分析，對乳腺癌的預(yù)后及監(jiān)測復(fù)發(fā)有較為重要的指導(dǎo)意義。

細(xì)胞增生標(biāo)志物Ki-67在正常和惡性組織中形成細(xì)胞分裂的組成部分，出現(xiàn)于細(xì)胞有絲分裂期[15]。Ki-67標(biāo)記指數(shù)(Ki-67 labeling index)是原發(fā)性乳腺癌的一個預(yù)后因素[16-17]，Ki-67低表達(dá)的乳腺癌患者5年無病生存率和總生存率分別為87%和89%，而Ki-67高表達(dá)的患者無疾病生存率和總生存率分別為76%和83%[18]。本研究結(jié)果顯示，LDL-C和TG與Ki-67的表達(dá)水平呈正相關(guān)，高水平的LDL-C及TG與乳腺癌患者的不良預(yù)后密切相關(guān)。

綜上所述，本研究結(jié)果顯示，TC、HDL-C、LDL-C及APo B與乳腺癌患者分子分型密切相關(guān)，由此可以推斷，通過對乳腺癌不同分子分型患者的血脂濃度監(jiān)測，對預(yù)測乳腺癌患者的預(yù)后，具有一定的臨床指導(dǎo)意義，但能否作為預(yù)測乳腺癌預(yù)后的有效臨床指標(biāo)，以及是否可以通過對異常血脂濃度進(jìn)行干預(yù)來改善不同分子亞型的乳腺癌患者的預(yù)后，還需進(jìn)一步的大規(guī)模臨床研究。