非小細(xì)胞性肺癌中轉(zhuǎn)化生長因子β1的表達(dá)及臨床意義

楊春秋

在惡性腫瘤中，肺癌是目前導(dǎo)致患者死亡的首要疾?。?］。而NSCLC約占其80%，嚴(yán)重的危害了人們的身體健康。近年來，關(guān)于肺癌患者的診斷、治療和預(yù)后越來越引起了學(xué)者們的關(guān)注。隨著免疫組化技術(shù)的發(fā)展和日趨成熟，人們發(fā)現(xiàn)腫瘤患者分泌的TGF-β1具有促進腫瘤細(xì)胞分化增殖作用，喪失了其對機體的負(fù)性調(diào)控作用［2］。在大腸癌、乳腺癌、膽管癌、胰腺癌等疾病中得到了充分的驗證。為了研究NSCLC患者與TGF-β1的關(guān)系，我們進行了對照性研究，觀察TGF-β1在NSCLC患者的表達(dá)及意義。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2005～2011年經(jīng)手術(shù)切除的NSCLC標(biāo)本36例作為試驗組，其中男21例，女15例，年齡36～65歲，平均年齡(48.2±6.8)歲。均未進行過放療、化療，所有患者均經(jīng)病理明確診斷。按WHO病理分型:鱗癌23例，腺癌13例;TNM病理分期:Ⅰ期10例，Ⅱ期9例，Ⅲ期17例。伴有肺門或縱隔淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移22例，無轉(zhuǎn)移14例。另外選取與試驗組在性別、年齡等方面無統(tǒng)計學(xué)差異的14例經(jīng)病理明確診斷肺良性病變的患者作為對照組進行比較。

1.2 方法 應(yīng)用S-P免疫組化法進行檢測。兔抗人多克隆TGF-β1抗體由武漢博士德生物技術(shù)公司提供，使用濃度為1∶60;鏈霉菌抗生物素蛋白-過氧化酶免疫組化染色超敏試劑盒由福州邁新生物技術(shù)開發(fā)公司提供。標(biāo)本均經(jīng)過甲醛固定、石蠟包埋、4 μm連續(xù)切片、然后采用鏈霉菌抗生物素蛋白-過氧化酶免疫組化染色法(S-P法)染色，3，3-二氨基苯聯(lián)胺(DAB)溶液顯色、然后進行脫水透明和中性樹膠封片。用已知大腸癌陽性切片作陽性對照，用磷酸鹽緩沖液(PBS)代替一抗作陰性對照。

1.3 統(tǒng)計學(xué)方法 采用SPSS 13.0統(tǒng)計學(xué)軟件包進行統(tǒng)計處理，采用χ2進行進行檢驗，以P＜0.05為具有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 NSCLC與肺良性病變患者TGF-β1的比較 NSCLC試驗組患者36例，TGF-β1呈陽性表現(xiàn)患者22例(22/36)，陽性率為61.1%，肺良性病變對照組患者14例，TGF-β1呈陽性表現(xiàn)患者3例(3/14)，陽性率為21.4%。兩者比較，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)。

2.2 NSCLC不同組織學(xué)分型間TGF-β1的比較 NSCLC患者中，鱗癌呈陽性表現(xiàn)14例(14/23)，陽性率為60.9%;腺癌呈陽性表現(xiàn)8例(8/13)，陽性率為61.5%;兩者比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05)。

2.3 NSCLC不同TNM病理分期TGF-β1的比較NSCLC患者中，Ⅰ期+Ⅱ期共19例，TGF-β1呈陽性表現(xiàn)患者10例(10/19)，陽性率為52.6%;Ⅲ期17例，TGF-β1呈陽性表現(xiàn)患者12例(12/17)，陽性率為70.6%，兩者比較，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)。

2.4 NSCLC轉(zhuǎn)移與非轉(zhuǎn)移患者TGF-β1的比較 NSCLC患者中，有肺門或縱隔淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移22例，TGF-β1呈陽性表現(xiàn)患者16例(16/22)，陽性率為 72.7%;無轉(zhuǎn)移患者 14例，TGF-β1呈陽性表現(xiàn)患者6例(6/14)，陽性率為42.9%，兩者比較，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)。

3 討論

TGF-β1是哺乳動物體內(nèi)存在含量最高的TGF-β家族成員［3］。人體內(nèi)還有 TGF-β2和 TGF-β3兩種異構(gòu)體存在，它們的生物學(xué)特性極其相似，具有70%～80%序列同源性?？梢杂扇梭w的胚胎細(xì)胞、造血細(xì)胞和體細(xì)胞等正常細(xì)胞通過自行分泌或旁分泌兩種途徑生成，還可以由人體內(nèi)的腫瘤細(xì)胞過度分泌形成。以前體蛋白形式存在的TGF-β并不具有生物活性，通過與正常細(xì)胞或腫瘤細(xì)胞表面的跨膜糖蛋白受體結(jié)合后，形成一種穩(wěn)定的多肽類生長因子，具有多種生物學(xué)活性。在正常細(xì)胞內(nèi)，TGF-β1對組織細(xì)胞的增殖、轉(zhuǎn)化、胚胎的發(fā)生、組織的修復(fù)和機體免疫中發(fā)揮著關(guān)鍵作用［4］。在腫瘤發(fā)生的早期，TGF-β1對腫瘤細(xì)胞的增殖可起到一定的抑制作用，但隨著腫瘤的不斷發(fā)展，這種負(fù)性調(diào)節(jié)作用喪失，反之其促進腫瘤細(xì)胞增殖、血管生成和免疫抑制作用不斷增強，導(dǎo)致腫瘤的發(fā)展。

腫瘤的發(fā)生是一個復(fù)雜的生物學(xué)過程，有多重因素參與其中。腫瘤細(xì)胞無限制的增殖是其最基本的生物學(xué)特征。研究表明，TGF-β1是其中重要的因子之一，腫瘤細(xì)胞中TGF-β1常常呈現(xiàn)過度分泌狀態(tài)，通過促進新生血管的生成、細(xì)胞的不斷增殖、免疫抑制作用促進腫瘤的發(fā)展。本組實驗中，NSCLC組織中TGF-β1陽性率明顯高于正常對照組，提示腫瘤細(xì)胞較正常細(xì)胞分泌更多的TGF-β1，不同的組織分型患者TGF-β1無顯著的差異，提示不同組織分型中都存在TGF-β1的過度分泌;Ⅲ期患者TGF-β1陽性率明顯高于Ⅰ期+Ⅱ期患者，證明隨著腫瘤的進展，過度分泌狀態(tài)越嚴(yán)重;轉(zhuǎn)移的患者較非轉(zhuǎn)移患者顯著增高，表明TGF-β1在腫瘤的轉(zhuǎn)移過程中起到促進作用。相關(guān)研究表明，其通過加強信號傳導(dǎo)通路的傳遞、通過加快新生血管的生成和加速上皮細(xì)胞與間質(zhì)細(xì)胞的轉(zhuǎn)化及誘導(dǎo)纖維連接蛋白及其受體間的相互作用等機制達(dá)到促進腫瘤轉(zhuǎn)移的目的。

綜上所述，TGF-β1參與了NSCLC的發(fā)生和轉(zhuǎn)移過程，TGF-β1水平的檢測對NSCLC的診斷及預(yù)后的判斷具有重要的指導(dǎo)意義。

［1］Jemal A，Siegel R，Ward E，et al.Cancer statistics，2009.CA Cancer J Clin，2009，59(4):225-249.

［2］董春燕，劉鐵夫，李兆申，等.TGF-β1ERK/ERK2的相互作用及對人胰腺癌細(xì)胞生長的影響.第二軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報，2005，26(3):314-318.

［3］衛(wèi)小紅.轉(zhuǎn)化生長因子β與非小細(xì)胞性肺癌.國外醫(yī)學(xué)呼吸系統(tǒng)分冊，2002，22(1):17-20.

［4］張柳.轉(zhuǎn)化生長因子-β1與肺癌的關(guān)系.國際腫瘤學(xué)雜志，2010，37(1):46-49.