武阿鋒,姚樹(shù)萍,孫 濤, 范軍科,王彥斌
(1.銅川市農(nóng)業(yè)科學(xué)研究所,陜西 銅川 727031;2.陜西省農(nóng)藥管理檢定所,陜西 西安 710003)
菜芙蓉,又名金花葵,是一年生錦葵科秋葵屬植物。菜芙蓉含有多種生物活性物質(zhì),其生物黃酮含量比目前在生產(chǎn)中廣泛應(yīng)用的銀杏、大豆等含量高近百倍,是目前已知植物資源中含量高的。其所含全價(jià)蛋白質(zhì)、高聚糖膠、膳食纖維、微量元素硒、鋅、多種不皂化物等,具有顯著調(diào)節(jié)人體內(nèi)分泌、免疫力,增加人體抗力,改善心腦血管及微循環(huán)功能,增強(qiáng)機(jī)體抗氧化能力,抗心腦缺血、缺氧、抗炎、鎮(zhèn)疼,抗疲勞、抗衰老、抗癌、防癌、降血脂功效[1~6]。是極具開(kāi)發(fā)價(jià)值的功能性產(chǎn)品。該研究擬對(duì)菜芙蓉植株的不同部位,包括根、莖、葉、花、花蕾、花萼、花托等開(kāi)展生物黃酮含量測(cè)定比較,以為菜芙蓉產(chǎn)業(yè)化開(kāi)發(fā)提供數(shù)據(jù)支撐。
菜芙蓉植株來(lái)自銅川市農(nóng)業(yè)科學(xué)研究所試驗(yàn)基地,花期噴施碳基營(yíng)養(yǎng)肥料,植株采集后分為根、莖、葉、花、花蕾、花萼、花托等7個(gè)部位。
1.2.1 LC-QQQ測(cè)定樣品中槲皮素、蘆丁和金絲桃苷的含量
菜芙蓉7個(gè)樣品前處理方法:
(1)將樣品用粉碎機(jī)打成粉末;
(2)稱(chēng)取樣品粉末0.2 g,加入4 mL的75%甲醇水溶液混勻;
(3)將樣品放入超聲波清洗器中常溫萃取30 min;
(4)將超聲后的樣品過(guò)0.22 μm濾膜后準(zhǔn)備進(jìn)樣測(cè)定。
配置槲皮素、蘆丁和金絲桃苷的混標(biāo)溶液,依次稀釋成濃度為500 ng·L-1,200 ng·L-1,100 ng·L-1,50 ng·L-1,20 ng·L-1,10 ng·L-1的標(biāo)準(zhǔn)品,進(jìn)樣5μL檢測(cè),繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn);將過(guò)濾后的樣品進(jìn)樣5 μL檢測(cè),并代入標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)計(jì)算樣品中槲皮素、蘆丁和金絲桃苷的含量。
1.2.2 紫外分光光度法測(cè)樣品中總黃酮的含量
提取方法:0.5 g樣品,25 mL 50%乙醇,超聲30 min,過(guò)濾,定容至25 mL,取濾液測(cè)定。
測(cè)定方法:取樣品,加入3 mL 30%乙醇,0.3 mL 5% NaNO2(w/v),反應(yīng)5 min,加入0.3 mL 10% Al(NO3),反應(yīng)6 min,加入2 mL 4% NaOH,最后加入30%乙醇定容至10 mL,510 nm測(cè)定吸光度。
標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)的制定:分別取0.1、0.2、0.3、0、5、1、2 mL的0.15 mg·L-1蘆丁溶液,按測(cè)定方法反應(yīng),測(cè)定吸光度。
1.2.3 樣品中鋅、硒的含量測(cè)定
鋅的含量(mg·kg-1)-檢測(cè)方法GB/T 5009.14-2003。檢測(cè)方法:取樣品小火碳化后移馬弗爐灰化,冷卻,定容。 硒的含量(mg·kg-1)-檢測(cè)方法GB 5009.93-2010。檢測(cè)方法:取樣品加硝酸、高氯酸消解,冷卻,加鹽酸,定容。
對(duì)各部位的總黃酮等指標(biāo)進(jìn)行檢測(cè),結(jié)果如表1所示,生物黃酮含量依次為花、根、葉,其中花的總黃酮含量達(dá)到5.995%,遠(yuǎn)高于根、葉等部位,且槲皮素、蘆丁、金絲桃苷以及蛋白質(zhì)均明顯高出根、葉等部位,維生素E的含量在花、葉、根部位較為接近,這也說(shuō)明了菜芙蓉是比較理想的藥用部位。
通過(guò)對(duì)菜芙蓉花部進(jìn)行連續(xù)檢測(cè),由表2可以看出,從9月到12月連續(xù)四個(gè)月的持續(xù)監(jiān)測(cè),菜芙蓉內(nèi)總黃酮含量呈現(xiàn)出一定的下降趨勢(shì),其中在9月盛花期采摘的鮮花含量最高,達(dá)到5.99%,隨著儲(chǔ)藏時(shí)間的延續(xù),花內(nèi)總黃酮含量遞減,在經(jīng)過(guò)2個(gè)月后,黃酮含量趨于穩(wěn)定,含量維持在3.6~3.7之間。仍處于較高水平,充分說(shuō)明了菜芙蓉產(chǎn)業(yè)開(kāi)發(fā)潛力巨大。
表1 菜芙蓉不同部位總黃酮、槲皮素、蘆丁、金絲桃苷、維生素及蛋白質(zhì)含量 (%)
注:“-”表示未檢出。
表2 菜芙蓉花不同時(shí)期總黃酮、槲皮素、蘆丁、金絲桃苷、維生素及蛋白質(zhì)含量 (%)
通過(guò)對(duì)菜芙蓉不同部位進(jìn)行硒及鋅含量的測(cè)定,植株的花部位的硒含量明顯高于其他部位,最高含量達(dá)到0.028mg·kg-1,而鋅的含量在植物的莖葉部位含量較高,主要因?yàn)殇\能增強(qiáng)作物的光合作用。它是作物體內(nèi)碳酸酐酶等一些酶的重要組成成分。含鋅的碳酸酐酶主要存在于葉綠體中,催化二氧化碳的水合作用,促進(jìn)碳水化合物的轉(zhuǎn)化,從而提高光合作用的強(qiáng)度。
表3 菜芙蓉不同部位硒及鋅含量
菜芙蓉在200多個(gè)秋葵植物中最具食用、藥用、保健價(jià)值,含有黃酮類(lèi)、多糖、甘露醇、不飽和脂肪酸、微量元素等活性成分。目前菜芙蓉黃酮類(lèi)成分藥理研究較多,但具體產(chǎn)業(yè)開(kāi)發(fā)類(lèi)研究較少,因此該研究針對(duì)不同部位,不同時(shí)期對(duì)植株體內(nèi)的生物黃酮,槲皮素、蘆丁、金絲桃苷以及蛋白質(zhì)進(jìn)行測(cè)定,從而確定最具有開(kāi)發(fā)潛力的植株部位。
該研究表明在植物的花中生物黃酮含量達(dá)到5.995%,遠(yuǎn)高于其他部位,說(shuō)明菜芙蓉的花是總黃酮的來(lái)源,同時(shí),菜芙蓉的不同部位的槲皮素、蘆丁、金絲桃苷含量從高到低依次為花、葉、根。且在給植株施用硒肥后,菜芙蓉的花部富硒效果明顯,因此菜芙蓉花具有較大的開(kāi)發(fā)價(jià)值。