細(xì)胞因子表達(dá)水平與體外受精-胚胎移植術(shù)后早產(chǎn)的關(guān)系▲

陳巧佩 楊欽靈 潘平山 趙江陽 周暉登 王立芳

(廣西壯族自治區(qū)婦幼保健院1 檢驗(yàn)科，2 產(chǎn)科，南寧市 530003，電子郵箱：chenqiaopei@163.com)

目前，體外受精-胚胎移植(invitrofertilization-embryo transfer，IVF-ET)已成為治療不孕癥的主要手段，術(shù)后臨床妊娠率不斷提高，但移植術(shù)后早產(chǎn)率也與之俱增。廣西地處中國的西南部，孕婦早產(chǎn)率，尤其是IVF-ET術(shù)后的早產(chǎn)率更高，嚴(yán)重影響了優(yōu)生優(yōu)育的推進(jìn)[1]。因此，積極尋找早產(chǎn)的病因是產(chǎn)科醫(yī)生面臨的重要問題。目前引起早產(chǎn)的原因尚未完全明了，可能與遺傳、免疫、感染等因素相關(guān)[2]。本文檢測IVF-ET術(shù)后早產(chǎn)孕婦及自然妊娠早產(chǎn)孕婦、孕周相當(dāng)正常妊娠孕婦的外周血中干擾素(interferon，IFN)-γ、白細(xì)胞介素(interleukin，IL)-2、IL-4的表達(dá)差異，探討免疫調(diào)節(jié)異常與IVF-ET術(shù)后早產(chǎn)的關(guān)系，為預(yù)防、診治IVF-ET術(shù)后早產(chǎn)提供一定的理論與臨床參考依據(jù)。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 回顧性分析2015～2017年在我院分娩的79例產(chǎn)婦的資料，均排除嚴(yán)重心肝腎疾病、糖尿病、甲狀腺功能異常、腫瘤、血液性疾病及免疫性疾病及正在服用免疫藥物者。根據(jù)妊娠結(jié)局分為IVF-ET術(shù)后早產(chǎn)組32例，自然妊娠早產(chǎn)組31例，正常足月妊娠組16例。根據(jù)有無感染(絨毛炎癥、宮內(nèi)感染)，將IVF-ET術(shù)后早產(chǎn)和自然妊娠早產(chǎn)產(chǎn)婦分為感染組及非感染組。IVF-ET術(shù)后早產(chǎn)感染組16例，年齡(29.68±2.24)歲，分娩時孕周(32.69±3.05)周；IVF-ET術(shù)后早產(chǎn)組非感染組16例，年齡(30±2.48)歲，分娩時孕周(33±2.22)周；自然妊娠早產(chǎn)感染組15例，年齡(28.6±2.75)歲，分娩時孕周(31.07±3.15)周，自然妊娠早產(chǎn)非感染組16例，年齡(28.88±2.78)歲，分娩時孕周(31.63±3.14)周；正常妊娠組均為無臨床感染的孕婦，年齡(28.25±1.61)歲，分娩時孕周(39.13±1.09)周。5組年齡比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，具有可比性。

1.2 細(xì)胞因子檢測方法 各組產(chǎn)婦于妊娠20～25周時采集其外周靜脈血2～4 ml，取血清置于-80℃中保存?zhèn)溆?。采用定量酶?lián)免疫吸附法檢測外周血血清IFN-γ、IL-2、IL-4水平，酶聯(lián)免疫吸附試劑盒購自eBioscience公司(IFN-γ批號：85-BMS228，IL-2批號：85-BMS221/2，IL-4批號：85-BMS225/2)，嚴(yán)格按照產(chǎn)品說明書操作。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析 應(yīng)用SPSS 16.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。計(jì)量資料以(x±s)表示，多組均數(shù)比較采用單因素方差分析，兩兩比較采用LSD-t法。以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

5組IFN-γ水平比較，差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。IVF-ET術(shù)后早產(chǎn)感染組、自然妊娠早產(chǎn)感染組、正常妊娠組IL-4水平高于IVF-ET術(shù)后早產(chǎn)非感染組、自然妊娠早產(chǎn)非感染組(均P<0.05)；IVF-ET術(shù)后早產(chǎn)感染組IL-4水平高于自然妊娠早產(chǎn)感染組、正常足月妊娠組(均P<0.05)；正常妊娠組、自然妊娠早產(chǎn)非感染組、IVF-ET術(shù)后非感染組IL-4水平依次降低(均P<0.05)。各組均未檢測到IL-2表達(dá)。見表1。

表1 各組血清IFN-γ、IL-2及IL-4水平比較(x±s，pg/ml)

注： LDL表示檢測低于IL-2的下限值(18.8 pg/ml)，無法得到具體數(shù)值。*除自然妊娠早產(chǎn)感染組與正常足月妊娠組外，其余組間兩兩比較均P<0.05。

3 討 論

早產(chǎn)是導(dǎo)致80%圍生兒死亡及50%以上存活新生兒患病的主要原因[3-4]。早產(chǎn)的機(jī)制復(fù)雜，與宮內(nèi)感染、子宮頸口關(guān)閉不全、妊娠合并癥、免疫失衡等有關(guān)[2]。IVF-ET術(shù)后的臨床妊娠率不斷提高，但移植術(shù)后自發(fā)早產(chǎn)率也隨之增高，其早產(chǎn)率為48.4%[1]。我院近5年IVF-ET術(shù)后早產(chǎn)率為25%～30%，遠(yuǎn)高于5%～15%的自然妊娠早產(chǎn)率[3]。因此，分析IVF-ET術(shù)后自發(fā)早產(chǎn)的相關(guān)因素，對指導(dǎo)臨床預(yù)防早產(chǎn)有重要意義。血清中細(xì)胞因子表達(dá)異常提示機(jī)體免疫功能失調(diào)，但其在早產(chǎn)產(chǎn)婦中的變化及其意義尚不清楚。

細(xì)胞因子是機(jī)體免疫細(xì)胞和非免疫細(xì)胞合成和分泌的小分子多肽類因子，既是炎癥介質(zhì)又是免疫調(diào)節(jié)因子。Th1細(xì)胞介導(dǎo)細(xì)胞免疫，主要分泌IL-2、IFN-γ、腫瘤壞死因子-α、IL-12等因子；Th2細(xì)胞介導(dǎo)體液免疫，主要分泌IL-4、IL-6、IL-10等因子。Th1型細(xì)胞因子有免疫殺傷作用，可抑制胚胎著床、滋養(yǎng)細(xì)胞生長，對妊娠無益；而Th2型細(xì)胞因子主要介導(dǎo)B細(xì)胞增殖，抗體產(chǎn)生，同種排斥反應(yīng)的免疫耐受，有利于妊娠[5]。因此，正常妊娠時以Th2型細(xì)胞因子為主，自然流產(chǎn)時則出現(xiàn)Th1型細(xì)胞因子增多的現(xiàn)象。有研究結(jié)果顯示，原因不明之復(fù)發(fā)性流產(chǎn)產(chǎn)婦的外周血IL-2、IFN-γ水平升高[6]。 Kedzierska-Markowicz等[7]也發(fā)現(xiàn)，早產(chǎn)產(chǎn)婦宮頸分泌物中的IL-1β、 IL-8、 IFN-γ水平高于足月產(chǎn)產(chǎn)婦。但本研究結(jié)果顯示，各組產(chǎn)婦IFN-γ水平無明顯差異(P>0.05)，因此IFN-γ水平與早產(chǎn)的關(guān)系仍需進(jìn)一步證實(shí)；在各組產(chǎn)婦血清中均沒有檢測到IL-2，可能與試劑盒的檢測靈敏度相關(guān)。此外，IVF-ET術(shù)后早產(chǎn)非感染組、自然妊娠早產(chǎn)非感染組IL-4水平均低于正常足月妊娠組(均P<0.05)，且以IVF-ET術(shù)后早產(chǎn)非感染組IL-4水平最低(P<0.05)。提示在無感染的情況下，IL-4水平降低可能與IVF-ET術(shù)后早產(chǎn)有關(guān)，這與既往研究結(jié)果相似[6]。

IL-4 由活化的Th2細(xì)胞產(chǎn)生，是一種抗炎性因子，可誘導(dǎo)T、B淋巴細(xì)胞的活化增殖，促進(jìn)感染的發(fā)生，且與感染的嚴(yán)重程度呈正相關(guān)[8]。此外，IL-4通過拮抗IFN-γ活性作用而抑制細(xì)胞介導(dǎo)的免疫反應(yīng)，抑制Th1細(xì)胞活化，促進(jìn)T細(xì)胞向Th2分化，Th2細(xì)胞形成后分泌更多的IL-4，形成循環(huán)[9]。在本研究中，IVF-ET術(shù)后早產(chǎn)感染組、自然妊娠早產(chǎn)感染組血IL-4水平均高于IVF-ET術(shù)后早產(chǎn)非感染組、自然妊娠早產(chǎn)非感染組，且IVF-ET術(shù)后早產(chǎn)感染組血IL-4水平均高于自然妊娠早產(chǎn)感染組、正常足月妊娠組(均P<0.05)，這可能是感染誘發(fā)并激活了自然殺傷細(xì)胞等免疫細(xì)胞，導(dǎo)致IL-4水平升高，因此在IVF-ET術(shù)后，感染所導(dǎo)致的IL-4過度表達(dá)也可誘發(fā)早產(chǎn)，這與Dudley等[10]的研究結(jié)果相似。

綜上所述，IL-4水平異?？赡芘cIVF-ET術(shù)后早產(chǎn)有關(guān)，在無感染的情況下，IL-4水平下降或可引起早產(chǎn)，而感染所導(dǎo)致的IL-4過度表達(dá)也可誘發(fā)早產(chǎn)。