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    丙型肝炎核心抗原與抗體聯(lián)合檢測在丙肝感染早期診斷中的應用價值

    2019-04-10 11:58:30王愛蘭倪永圣冼潔能和仕進何思杰黃翠芳晏文芬
    中國當代醫(yī)藥 2019年6期
    關(guān)鍵詞:聯(lián)合檢測丙型肝炎抗原

    王愛蘭 倪永圣 冼潔能 和仕進 何思杰 黃翠芳 晏文芬

    [摘要]目的 分析丙型肝炎核心抗原(HCV-cAg)與抗體(抗-HCV IgG)聯(lián)合檢測在丙肝感染早期診斷中的應用價值。方法 將2015年2月~2017年5月醫(yī)院各科室有丙肝高危感染風險的296例患者作為觀察對象,所有患者取血清進行HCV-cAg和抗-HCV、ALT、TBil檢查,以HCV-RNA檢測結(jié)果為金標準,觀察不同檢查方法診斷的患者HCV感染情況,分析HCV-cAg、抗-HCV IgG聯(lián)合用于疾病早期診斷的有效性。結(jié)果 HCV-RNA含量與ALT水平成正相關(guān)(r=0.978,P<0.05),HCV-RNA含量與Tbil水平無相關(guān)性(r=-0.681,P>0.05);抗-HCV IgG方法的檢出率為69.1%,HCV-cAg方法為82.3%,血清肝功能檢測方法為58.2%,HCV-cAg方法的檢出率高于抗-HCV IgG方法、血清肝功能檢測方法(P<0.05)???HCV IgG、HCV-cAg聯(lián)合檢出率最高,為96.5%,顯著高于HCV-cAg、血清肝功能聯(lián)合監(jiān)測的 90.9%,抗-HCV IgG、血清肝功能聯(lián)合檢測的74.5%,差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05);HCV-cAg、抗-HCV IgG聯(lián)合檢測的診斷價值高于單指標檢查。結(jié)論 抗-HCV IgG、HCV-cAg聯(lián)合用于HCV早期感染診斷,臨床檢出率高。

    [關(guān)鍵詞]早期感染;抗原;丙型肝炎;抗體;聯(lián)合檢測

    [中圖分類號] R512.6+3? ? ? ? ? [文獻標識碼] A? ? ? ? ? [文章編號] 1674-4721(2019)2(c)-0127-04

    [Abstract] Objective To analyze the application value of HCV-core antigen (HCV-cAg) and anti-HCV-immunoglobulin G (anti-HCV IgG) for joint detection in early diagnosis of hepatitis C infection. Methods All of 296 patients with high risks of HCV infection checked from February 2015 to May 2017 in each department were selected as observation objects. All the patients received the HCV-cAg, anti-HCV, alanine aminotransferase (ALT ) and total bilirubin (TBil) examinations. HCV-RNA test results were used as the gold standard to observe the HCV infection of patients diagnosed by different methods, and to analyze the effectiveness of combined use of HCV-cAg and anti-HCV IgG in early diagnosis of diseases. Results HCV-RNA content was positively correlated with ALT level (r=0.978, P<0.05), while HCV-RNA content was not correlated with Tbil level (r=0.681, P>0.05). The detection rate of anti-HCV IgG, HCV-cAg and serum liver function was 69.1%, 82.3% and 58.2% respectively, and the detection rates of HCV-cAg was higher than that of anti-HCV IgG and serum liver function (P<0.05). The joint detection rate of anti-HCV IgG and HCV-cAg was the highest (96.5%), which was significantly higher than that of combined monitoring of HCV-cAg and serum liver function (90.9%), the combined detection of anti-HCV IgG and serum liver function (74.5%) had statistical difference (P<0.05). The diagnostic value of combined detection of HCV-cAg and anti-HCV IgG was higher than that of single index examination. Conclusion Combination of anti-HCV IgG and HCV-cAg for early diagnosis of HCV infection has a high clinical detection rate.

    [Key words] Early infection; Antigen; Hepatitis C; Antibody; Joint detection

    丙型肝炎是臨床一種為丙型肝炎病毒(HCV)感染所致的肝臟疾病,相關(guān)數(shù)據(jù)統(tǒng)計顯示目前全球近1.8億人感染HCV,感染率在3%左右,同時每年仍有近3.5萬新發(fā)者,臨床發(fā)病率呈上升趨勢[1-2]。此病早期癥狀不明顯,發(fā)病隱蔽,不易發(fā)覺,可通過吸毒、輸血、針刺等方式傳播,可致肝臟纖維化、壞死,并逐漸發(fā)展為肝硬化、肝癌等,危及患者生命安全[3-4]。早期有效診斷疾病對控制HCV傳播、丙肝防治有重要意義,因此如何有效診斷早期丙肝感染得到臨床關(guān)注,肝功能指標(ALT、TBil)在一定程度上能反映肝臟病理情況,而檢測血清中HCV相關(guān)指標有助于疾病的早期診斷、治療[5]。本研究觀察296例丙肝高危感染風險者以丙型肝炎核心抗原(HCV-cAg)、丙肝抗體(抗-HCV IgG)、ALT、TBil檢測檢查診斷情況,旨在為后期臨床疾病的早期檢出提供依據(jù)。

    1資料與方法

    1.1一般資料

    將2015年2月~2017年5月醫(yī)院各科室有丙肝高危感染風險的296例患者作為觀察對象,所有患者懷疑為丙肝感染高危者,其中男158例,女138例;年齡21~71歲,平均(45.3±4.8)歲。所有患者均行HCV-cAg和抗-HCV、ALT、TBil檢查。

    1.2試劑、儀器、方法

    血清提取方法:所有觀察對象于清晨空腹取肘靜脈血5 ml,放于抗凝管中保存,隨后送檢,對樣血進行離心處理,參數(shù):3000 r/min,時間為10 min,取血清置于低溫冰箱中保存,檢驗時提前從冰箱中取出放置至復溫。

    試劑、儀器:FC酶標儀(美國Thermo公司)、洗板機Wellwash型(美國Thermo公司)、電熱恒溫水浴箱(深圳匯松)、加樣器(芬蘭百得)、熒光定量PCR儀(型號7500 美國ABI公司)、全自動生化分析儀(型號7600 日立)、BY-R18高速冷凍離心機(北京白洋醫(yī)療器械有限公司);HCV IgG試劑盒購自英科新創(chuàng)(廈門)科技有限公司,HCV-cAg采用山東萊博生物科技有限公司,ALT試劑盒由北京利德曼生化股份有限公司提供,TBil試劑盒由北京利德曼生化股份有限公司提供。

    方法:HCV-cAg,以ELISA法檢測,設(shè)置陰性、空白對照、陽性孔,并按試劑盒說明進行操作,質(zhì)控品采用自制低值質(zhì)控品,同時本次截止值為陰性對照孔平均值+0.10,OD值測定選擇主波450 nm、副波630 nm進行比色???HCV IgG檢測:以ELISA法檢測,設(shè)置陰性、空白對照、陽性各兩孔,所有操作嚴格按照試劑盒說明進行,室內(nèi)質(zhì)控品由英科新創(chuàng)提供,室間質(zhì)控品由衛(wèi)生部臨床檢驗中心提供,本次截止值為陰性對照孔平均值+0.12,本次OD值測定選擇主波450 nm、副波630 nm進行比色。肝功能檢測:以全自動生化分析儀對血清ALT值測定,采用終釩酸鹽氧化法對TBil進行測定,嚴格按照試劑盒說明進行。HCV-RNA檢測:采用RT-PCR法測定,以全自動熒光定量PCR儀進行檢測,嚴格按照試劑盒說明進行操作。

    1.3觀察指標

    以HCV-RNA檢測結(jié)果為金標準,觀察各組患者的HCV感染情況,分析HCV-cAg、抗-HCV IgG聯(lián)合用于疾病檢測的臨床價值。其中HCV IgG檢測以O(shè)D值S/COV≥1為陽性,S/COV<1為陰性;HCV-cAg檢測,OD值大于或等于cut off值為陽性,OD值小于cut off值為陰性;HCV-RNA檢測以病毒載量103拷貝/ml以下為陰性,103~105拷貝/ml為少量復制,106~107拷貝/ml為病毒中量復制,108拷貝/ml以上病毒大量復制,同時以HCV-RNA檢測陽性表示患者確診丙肝[6-7]。ALT參考值:5~50 U/L;TBil參考值:1.71~17.10 μmol/L。診斷率=(真陰性+真陽性)例數(shù)/總例數(shù)×100%;特異度=真陰性例數(shù)/(假陽性+真陰性)例數(shù)×100%;敏感度=真陽性例數(shù)/(真陽性+假陰性)例數(shù)×100%。

    1.4統(tǒng)計學方法

    采用統(tǒng)計學軟件SPSS 19.0分析數(shù)據(jù),計量資料以均數(shù)±標準差(x±s)表示,采用t檢驗;計數(shù)資料以率表示,采用χ2檢驗;相關(guān)性采用Pearson相關(guān)性分析方法,以P<0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

    2結(jié)果

    2.1 HCV-RNA含量與ALT、TBil水平的相關(guān)性

    HCV-RNA含量與ALT水平成正相關(guān)(r=0.978,P<0.05),HCV-RNA含量與TBil水平無相關(guān)性(r=-0.681,P>0.05)(表1)。

    2.2 不同檢測方式檢出率的比較

    296例患者行HCV-RNA檢查,陽性55例,抗-HCV IgG方法的檢出38例,檢出率為69.1%,HCV-cAg方法檢出48例,檢出率為87.3%,檢測肝功能法檢出32例,檢出率為58.2%,三者比較,差異有統(tǒng)計學意義(χ2=11.663,P<0.05)。

    2.3聯(lián)合檢查方法檢出率的比較

    抗-HCV IgG、HCV-cAg聯(lián)合檢測53例,檢出率為96.5%,HCV-cAg聯(lián)合血清肝功能檢測50例,檢出率為90.9%,抗-HCV IgG聯(lián)合血清肝功能檢測41例,檢出率為74.5%,三者比較,差異有統(tǒng)計學意義(χ2=12.768,P<0.05),可見,抗- HCV IgG、HCV-cAg聯(lián)合檢出率最高。

    2.4不同檢查方法診斷價值的比較

    診斷率:聯(lián)合> HCV-cAg>抗-HCV IgG>血清肝功能,特異度:聯(lián)合>抗-HCV IgG組> HCV-cAg組、血清肝功能組,敏感度:聯(lián)合> HCV-cAg>抗-HCV IgG>血清肝功能,具體見表2。

    3討論

    丙肝發(fā)病隱匿癥狀不明顯,故疾病早期診斷主要依據(jù)臨床實驗室檢查結(jié)果,HCV-RNA檢查是目前臨床疾病診斷的金標準,但其檢查價格昂貴,耗時較長,故不適用于早期丙肝感染篩選,同時患者感染后HVC抗體轉(zhuǎn)陽一般需要近70 d的窗口期,因此如何選擇有效的檢查方式準確診斷疾病得到臨床醫(yī)師的關(guān)注[8]。ALT、TBil作為肝功能的重要指標,有學者發(fā)現(xiàn)只要有1%肝細胞壞死便可導致人體血液中ALT水平升高,ALT、TBil水平能有效反映患者的肝臟損害情況。臨床認為,丙型肝炎患者由于病毒感染肝功能會受影響,故而將ALT、TBil用于疾病診斷。本研究中,HCV-RNA含量與ALT水平成正相關(guān)(r=0.978,P<0.05),HCV-RNA含量與TBil水平無相關(guān)性(P>0.05),血清肝功能組檢測陽性與HCV-RNA相符32例,確診率為58.2%,提示ALT、TBil用于診斷丙肝感染存在一定的誤診情況,分析原因部分HCV對肝臟的損害具有隱匿性,導致早期未有肝細胞壞死、肝臟損害情況發(fā)生,同時個體免疫應答也會造成ALT水平異常,故感染檢出率不高[9]。

    抗-HCV IgG、HCV-cAg檢查是目前疾病常見的檢測手段,且近幾年以ELISA 法檢測,檢查敏感性提高,但鑒于患者感染后抗-HCV IgG出現(xiàn)時間較晚,窗口期時間較長,故臨床仍存在漏診情況,因此有學者提出聯(lián)合檢查,以提高疾病早期檢出率[10-11]。本研究中,以HCV-RNA檢查陽性為標準,抗-HCV IgG組檢出率為69.1%,HCV-cAg組為82.3%,血清肝功能組為58.2%,HCV-cAg方法的檢出率高于抗-HCV IgG、血清肝功能檢查方法(P<0.05);同時不同檢查方式聯(lián)合診斷的檢出率比較,差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05),且抗-HCV IgG、HCV-cAg聯(lián)合檢出率最高為96.5%;抗-HCV IgG、HCV-cAg診斷價值高于單指標檢查,提示HCV IgG、HCV-cAg聯(lián)合檢查診斷準確率較高,在陳偉岳等[12]學者的研究結(jié)果指出HCV-cAg和HCV-RNA檢測結(jié)果符合率為94%,提示HCV-cAg有良好的靈敏度,用于HCV感染檢測,檢出率高,與本研究結(jié)果相符,同時學者研究中有3例抗-HCV 陰性而HCV-cAg檢查呈陽性,且后期跟蹤患者3周后抗-HCV IgG轉(zhuǎn)陽,其認為HCV-cAg能較抗-HCV 先檢測到HCV感染。HCV-RNA作為病毒復制的直接標志,人體HCV感染后HCV-RNA陽性出現(xiàn)比抗-HCV早約50 d,但其檢查設(shè)備復雜、人配備要求高,且受多種因素影響[13]。而HCV-cAg作為HCV感染后早期可出現(xiàn)的敏感指標,窗口期一般在2周左右,其血清轉(zhuǎn)陽僅比HCV-RNA遲1~2 d,且操作相對簡單,設(shè)備要求較易滿足[14]。本研究結(jié)果提示抗-HCV IgG、HCV-cAg聯(lián)合檢查能有效將HCV感染的窗口期提前,從而更早發(fā)現(xiàn)感染,有效提高臨床疾病檢出率,這對疾病早診斷、早治療有重要意義[15]。

    綜上所述,HCV-cAg、抗-HCV IgG聯(lián)合用于HCV早期感染診斷,臨床檢出率高,可在臨床推廣應用。

    [參考文獻]

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    (收稿日期:2018-08-09? 本文編輯:許俊琴)

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