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    鋸緣閉殼龜模式種的飼養(yǎng)、繁殖要素

    2019-04-02 12:27:20曹鑫盛張鳳東潘建洲陳成勛
    漁業(yè)致富指南 2019年6期
    關(guān)鍵詞:消化道個體試驗(yàn)

    路 斌 曹鑫盛 張鳳東 潘建洲 左 騰 陳成勛

    鋸緣閉殼龜(Gray,1862)舊稱鋸緣攝龜(Gray,1862)(王培潮,2000),俗稱八角龜、八棱龜、方龜?shù)?。屬淡水龜亞科,閉殼龜屬的一種,在中國分布于廣東、廣西、海南、湖南、云南等地區(qū)(van Dijk et al.,2012)。鋸緣閉殼龜不僅能用于炮制傳統(tǒng)名貴中藥——龜板,還是棲息地原住民所喜愛的食物,并且隨著寵物龜市場的發(fā)展,其寵物價(jià)值還在逐漸增加。該物種為我國及國際自然保護(hù)聯(lián)盟(IUCN)共同列入的瀕危(EN)物種(趙爾宓,1998),甚至于2000年列入瀕危野生動植物國際貿(mào)易公約(CITES)附錄Ⅱ(曾巖,2011)。

    因此加強(qiáng)保護(hù)該物種的野生種群,控制非法貿(mào)易,推進(jìn)該物種人工飼養(yǎng)、繁殖相關(guān)研究的進(jìn)展尤為重要。2015年起,試驗(yàn)組聯(lián)合廣西(南寧、桂林、防城港),廣東(茂名、中山、順德)兩地共6戶具有相關(guān)資質(zhì)的養(yǎng)殖戶及全國各地愛好者共12名,對鋸緣閉殼龜?shù)臋z疫防疫、人工飼養(yǎng)、疾病防治等方面進(jìn)行了大膽的探索和研究。在廣西大學(xué)、天津農(nóng)學(xué)院的多名教授的指導(dǎo)下解決了諸多養(yǎng)殖問題,研究中試驗(yàn)組協(xié)助引種的鋸緣閉殼龜首年存活率超過95%,總結(jié)了一定的經(jīng)驗(yàn)和方法。

    1 材料與方法

    1.1 養(yǎng)殖環(huán)境

    試驗(yàn)地點(diǎn)位于廣西省桂林市永??h(109°36′50″~110°14′19″E,24°37′48″~25°36′39″N),該地區(qū)為亞熱帶季風(fēng)氣候,平均海拔148m,森林覆蓋率74.8%,臺風(fēng)影響小,年平均降水量2000mm以上,年平均氣溫18.8℃。在民房內(nèi)搭建養(yǎng)殖區(qū)(圖1),選取1.5m×4m的室內(nèi)陽臺,設(shè)長3.5m、高2m的通風(fēng)窗(圖1:1),朝西南方向,地面采用糙面瓷磚反鋪的方式,防止鋸緣閉殼龜在求偶、交配、攝食等活動時滑倒。養(yǎng)殖區(qū)通風(fēng)良好,日常光照強(qiáng)度可達(dá)10000Lx。設(shè)水槽4個(圖1:2),水槽長35cm×寬25cm×高10cm,以滿足飲水及涉水的需求。于每年6-8月在養(yǎng)殖區(qū)加入長45cm×寬40cm×高10cm的產(chǎn)卵盆2個(圖1:3),底部鉆小孔透水防積,內(nèi)置8cm厚的消毒腐殖土,供產(chǎn)卵使用。搭設(shè)1m×1m及1m×2m的2個木質(zhì)種植架(圖1:4),架高50cm,起遮陽等作用。在養(yǎng)殖區(qū)內(nèi)陽光直射區(qū)域及非陽光直射區(qū)域各設(shè)1測量點(diǎn)(圖1:5),于每日2:00、8:00、14:00、20:00測量溫度和相對濕度,并每日清潔水槽及養(yǎng)殖區(qū)地面。

    圖1 鋸緣閉殼龜養(yǎng)殖區(qū)示意圖

    表1 各試驗(yàn)組的鋸緣閉殼龜模式種飼養(yǎng)狀況

    表2 鋸緣閉殼龜種龜餌料配方及營養(yǎng)成分

    1.2 試驗(yàn)方法

    1.2.1 試驗(yàn)動物

    試驗(yàn)組自2014年起探尋鋸緣閉殼龜人工養(yǎng)殖、繁殖技術(shù),至2016年止,將試驗(yàn)結(jié)果總結(jié)后,于同年聯(lián)合養(yǎng)殖戶共計(jì)6戶,進(jìn)行鋸緣閉殼龜模式種的養(yǎng)殖生產(chǎn)試驗(yàn)。試驗(yàn)共引種鋸緣閉殼龜模式種147只,均采用相似養(yǎng)殖環(huán)境,相同飼養(yǎng)方法及孵化方法進(jìn)行養(yǎng)殖。經(jīng)過1年的飼養(yǎng),該龜死亡率均低于10%,試驗(yàn)情況如下(表1)。

    1.2.2 試驗(yàn)材料

    電子數(shù)顯卡尺(150T, Meinaite公司);爬蟲專用羊毛防滑地毯(美國zoomed公司);電子天平(DT2000,美國雙杰公司);紐扣式自動溫濕度記錄儀(DS1923,Maxim公司);溫控器(JCM-33A-A/M BK,日本神港SHINKO公司);顯微鏡(13395H2X,Leica公司);雙筒實(shí)體解剖鏡(SMZ-168,美國motic公司);水浴鍋(HH-6,江蘇省金壇市榮華儀器制造有限公司);恒溫?fù)u床(KYC-10B,上海福瑪試驗(yàn)設(shè)備有限公司);低溫高速離心機(jī)(Microfuge 22R Centrifuge,美國Beckman公司);龜用開口器;鑷子;注射器;藥物;餌料;天然乳膠管;標(biāo)記筆。

    1.2.3 方法

    試驗(yàn)組在適宜的引種時間,選擇合法引種渠道,挑選適宜引種的體質(zhì)較好的鋸緣閉殼龜模式種親龜(雄性大于400g,雌性大于600g)進(jìn)行引種,雌雄配比為雄性∶雌性等于1∶2.5。引種后應(yīng)在檢疫、消毒后方可引入養(yǎng)殖區(qū),引入養(yǎng)殖區(qū)后進(jìn)行編號、原生動物等消化道病原驅(qū)殺、對應(yīng)疾病治療、開食馴餌后方可進(jìn)行常規(guī)飼養(yǎng)。

    主要餌料選擇特制半水龜糧(表2),其營養(yǎng)組成測定均參考相關(guān)國家標(biāo)準(zhǔn)方法。每周添加1次鮮活餌料(新鮮水果、蘑菇及鮮活昆蟲等)進(jìn)行混合投喂(鮮活餌料與龜糧的濕重比為4:1),并在活動區(qū)掛設(shè)墨魚骨(海螵蛸),供其自由啃食補(bǔ)充鈣質(zhì)。

    2 飼養(yǎng)、繁殖關(guān)鍵技術(shù)

    2.1 鋸緣閉殼龜引種

    鋸緣閉殼龜目前尚無具有一定規(guī)模的繁殖單位,因此種源主要依賴自非法捕捉、走私者處解救;辦理相關(guān)證明如“獵捕證”后依法依規(guī)由其分布區(qū)域捕捉;以及在市場或其他養(yǎng)殖戶處購買。但是目前能引種的鋸緣閉殼龜大部分來自于越南等東南亞地區(qū),運(yùn)輸至我國后往往經(jīng)過長時間高密度運(yùn)輸、冰塊接觸降溫等強(qiáng)應(yīng)激因素影響。并且有部分龜在捕捉時被獵犬咬傷、被釣鉤刺破消化道、被陷阱機(jī)械損傷甚至有些商販為了提高鋸緣閉殼龜?shù)捏w質(zhì)量在出售前向龜腹腔注射水等液體。因此一定要嚴(yán)格把控引種質(zhì)量,避免引種后出現(xiàn)疾病甚至死亡。

    2.2 引種時間

    鋸緣閉殼龜主要棲息在熱帶及亞熱帶地區(qū),是一種陸棲性較強(qiáng)的龜類,但是當(dāng)氣溫低于16℃時明顯能觀察到其個體活性下降,抗應(yīng)激性也將會變差。因此在我國兩廣地區(qū)引種的時間建議在春季4-6月及秋季9-11月進(jìn)行(溫度20~28℃為宜)。經(jīng)過4年的摸索,最適宜引種的時間為9-11月,因?yàn)樵?016年4-6月引種時,曾觀察到懷卵雌性個體因運(yùn)輸顛簸導(dǎo)致輸卵管內(nèi)成型龜卵壓迫肝臟導(dǎo)致肝臟機(jī)械損傷而死亡的案例。

    2.3 外觀選種方法

    挑選引種親龜前,其重點(diǎn)是親龜?shù)慕】?,首先確認(rèn)親龜體表(皮膚和外殼)無傷口、潰爛、鱗片脫落和炎性紅腫;其次觀察親龜眼睛是否有神,紅腫,不嗜睡,口腔無糜爛物,舌部顏色是否呈健康的粉色;最后輕捏親龜前腿,是否肌肉飽滿、有力,同時觀察其爬行姿態(tài)是否協(xié)調(diào),是否能四肢支撐軀體爬行而不是前肢拖行。

    選擇鋸緣閉殼龜時,應(yīng)當(dāng)優(yōu)先選擇背甲盾片年輪狀凹刻明顯、個體大、健壯、雙目有神、體表光潔無殘損、肌肉豐滿有力、頭頸伸縮自如、泄殖孔滾圓開闊的成熟的個體。

    其性成熟的雄性個體一般體質(zhì)量在400~800g,雌性個體體質(zhì)量在600~1000g,以個體大,背甲盾片年輪狀凹刻不平滑者為好。市場上偶見背甲盾片年輪狀凹刻極其平滑且頭喙部角質(zhì)較為厚重的大個體,這些往往是老齡親龜,沒有用于繁殖的價(jià)值。

    2.4 測量選種方法

    在鋸緣閉殼龜飼養(yǎng)試驗(yàn)中,發(fā)現(xiàn)鋸緣閉殼龜?shù)捏w質(zhì)量與其腹甲長度、寬度及外殼高度存在著關(guān)聯(lián)。并且通過對鋸緣閉殼龜野生及人工飼養(yǎng)一年以上的個體各10只進(jìn)行測量,得出鋸緣閉殼龜體質(zhì)量與腹甲長度的相關(guān)性最高,并且野生鋸緣閉殼龜?shù)南嚓P(guān)回歸曲線與人工飼養(yǎng)1年以上個體的存在顯著差異(p>0.05)(圖2、圖3)。

    野生個體體質(zhì)量與腹甲長度的回歸方程為:Y=6.795807X - 490.652159。

    人工飼養(yǎng)一年以上個體體質(zhì)量與腹甲長度的回歸方程為:Y=7.810972X-585.150070。

    在實(shí)際飼養(yǎng)中也發(fā)現(xiàn)在引種的鋸緣閉殼龜同等腹甲長度的條件下,體質(zhì)量更大的個體存活率更高,體質(zhì)更好。

    圖2 野生鋸緣閉殼龜個體體質(zhì)量與腹甲長度的回歸曲線

    圖3 人工飼養(yǎng)一年以上鋸緣閉殼龜體質(zhì)量與腹甲長度的回歸曲線

    2.5 鑒定性別

    可通過外形區(qū)分鋸緣閉殼龜性成熟個體的性別,其中雄性個體往往外殼狹長,腹甲有較明顯的凹陷,并且雄性尾部較為粗大,往往可以通過這些可見特征進(jìn)行區(qū)分。但是在實(shí)際條件下進(jìn)行性別區(qū)分,還是比較依賴操作者的經(jīng)驗(yàn)和熟練程度,并且因個體差異還是會存在誤差。因此在查閱大量文獻(xiàn)后發(fā)現(xiàn)可采用內(nèi)窺鏡由泄殖孔探入的檢查方法能準(zhǔn)確地鑒定鋸緣閉殼龜性別。

    2.6 檢疫防疫

    新引入親龜,尤其是野生個體,普遍攜帶寄生蟲及其他病原微生物。因此在引入親龜后,需要與健康個體隔離飼養(yǎng),隔離區(qū)域盡量遠(yuǎn)離飼養(yǎng)區(qū),并確保工具不能混用。一般隔離檢疫時間為2個月,隔離期間需要進(jìn)行統(tǒng)一的消毒及寄生蟲驅(qū)殺,并定期檢查記錄,有異常情況及時處理。

    2.7 人工馴餌

    大多數(shù)鋸緣閉殼龜在經(jīng)過引種過程的刺激以及生存環(huán)境的變化后,會出現(xiàn)較強(qiáng)的應(yīng)激反應(yīng),此時應(yīng)在消毒后給予新引進(jìn)親龜維生素C藥浴以增強(qiáng)其抗應(yīng)激能力并且在親龜引入后前三天不建議進(jìn)行投喂。

    新引入個體通常較為膽怯,具有較強(qiáng)的負(fù)趨光性(尋找躲避),當(dāng)親龜開始適應(yīng)環(huán)境,不再緊縮殼內(nèi)而是開始探索環(huán)境后,可以進(jìn)行人工誘食。經(jīng)過試驗(yàn),誘食性最佳的餌料為環(huán)毛蚓、熟香蕉、番茄及蠕動的大麥蟲。在誘食餌料投喂后健康的個體會注視、聞嗅食物,并試圖取食,同時觀察到當(dāng)某一個體開始攝食時,其視野內(nèi)的其他個體也會被吸引,從而開始索餌。

    2.8 交配與交配創(chuàng)傷

    鋸緣閉殼龜在交配時雄性會啃咬雌龜?shù)念i盾,很多時候會導(dǎo)致雌性的皮膚破裂甚至頸盾缺損(圖4),同時雄性的鋸緣閉殼龜也會出現(xiàn)較為嚴(yán)重的求偶打斗現(xiàn)象。因此在鋸緣閉殼龜親龜飼養(yǎng)時,尤其是交配期需要將雌性和雄性分開飼養(yǎng),如果有條件雄性個體應(yīng)當(dāng)單獨(dú)隔離飼養(yǎng),避免不必要的損失。

    圖4 因交配頸盾缺損的鋸緣閉殼龜雌性個體

    2.9 產(chǎn)卵及孵化記錄

    鋸緣閉殼龜?shù)姆敝持饕譃樗膫€階段:求偶發(fā)情;爬背交配;營巢產(chǎn)卵;龜卵孵化。人工養(yǎng)殖條件下,鋸緣閉殼龜求偶發(fā)情、爬背交配每年4-11月均有發(fā)生,高峰期為每年5-6月,平均交配成功率為11.7%;營巢產(chǎn)卵時間為每年6-8月,成年雌性個體每年產(chǎn)卵1~4窩,每窩產(chǎn)1~3枚,正常龜卵質(zhì)量為(13.59±2.03,n=65)g,卵長徑(38.985±7.335,n=65)mm,卵短徑(23.22±2.43,n=65)mm,龜卵孵化時間(91.5±5.5,n=15)日。

    3 常見疾病與分析

    3.1 寄生生物感染

    3.1.1 體表寄生生物感染

    鋸緣閉殼龜常見體外寄生生物主要是山蛭、軟蜱,其中尤其以軟蜱最為常見,均多見于親龜腿窩或脖頸上。山蛭可用氯化鈉、生石灰等直接殺滅,軟蜱則可用細(xì)線扎緊軟蜱口器刺入皮膚部分的根部,小心拔除防止口器斷裂引起感染,并需要對傷口進(jìn)行消毒、抗感染處理。

    3.1.2 原生動物感染

    新引入的親龜由于各種刺激的存在,均易出現(xiàn)免疫力下降的現(xiàn)象,此時消化道內(nèi)原生動物就非常容易暴發(fā)、感染,常見的原生動物感染源有:毛滴蟲、球蟲及變形蟲。在試驗(yàn)過程中,采用口服硝基咪唑類抗生素——奧硝唑(用量100~250mg/kg)對消化道內(nèi)原生動物進(jìn)行驅(qū)殺,同時還能殺滅、抑制腸道內(nèi)部分有害菌類的暴發(fā)。(圖5)

    圖5 鋸緣閉殼龜后腸內(nèi)寄生蟲卵或原生動物孢囊

    3.1.3 消化道寄生蟲感染

    鋸緣閉殼龜野生個體消化道寄生蟲數(shù)量通常較多,其中常見種類主要為線蟲動物門的蛔蟲、蟯蟲,扁形動物門的絳蟲和棘頭動物門的棘頭蟲等。在本試驗(yàn)中選擇口服左旋咪唑(用量15mg/kg)配合肌肉注射伊維菌素(用量0.05mg/kg)治療消化道寄生蟲感染,并在實(shí)踐中得到了較好的反饋(圖5)。

    3.2 病原微生物感染

    3.2.1 皮膚感染和甲殼損傷

    龜類在運(yùn)輸過程中,非常容易因?yàn)榕鲎病⒛Σ梁蜖坷仍斐赏鈧l(fā)皮膚感染和甲殼損傷,引發(fā)感染。除此之外,鋸緣閉殼龜作為陸地棲息習(xí)性較強(qiáng)的龜類,如果長期飼養(yǎng)在過于潮濕且密閉的環(huán)境中,也非常容易導(dǎo)致外殼、皮膚感染,出現(xiàn)潰爛。因此在鋸緣閉殼龜飼養(yǎng)時應(yīng)給予其自由選擇干濕度的環(huán)境,例如較干旱的環(huán)境搭配飲水盆的組合。

    3.2.2 細(xì)菌性消化道感染

    鋸緣閉殼龜新引進(jìn)個體的腸道細(xì)菌感染常常伴隨著原生動物感染共同發(fā)生,其最主要的癥狀為病龜乏力、嗜睡、糞便惡臭并成果凍狀(雞蛋清狀)。主要病原為點(diǎn)狀氣單胞菌、大腸桿菌、嗜水氣單胞菌等,驅(qū)殺原生動物的奧硝唑?qū)捬蹙延休^強(qiáng)的殺滅作用,如果感染嚴(yán)重可配合恩諾沙星等抗生素共同投喂。

    3.3 胃插管給藥

    消化道原生動物或細(xì)菌感染嚴(yán)重的個體往往嗜睡且出現(xiàn)食欲廢絕癥狀,甚至出現(xiàn)便血、肢體腫脹等癥狀。此時藥浴和拌餌投喂均難以治愈,應(yīng)選用插胃管的方式經(jīng)胃部給藥。試驗(yàn)組曾對鋸緣閉殼龜消化道進(jìn)行解剖,其結(jié)構(gòu)與地龜非常相似,因此在胃管插入時可參考地龜?shù)南澜Y(jié)構(gòu),使用無毒軟乳膠管插入,膠管另一端連接注射器給藥。在2016年時,曾記錄到養(yǎng)殖戶直接經(jīng)口灌喂藥液,導(dǎo)致藥液進(jìn)入肺部引起鋸緣閉殼龜肺炎的案例。

    4 分析與討論

    4.1 雌雄飼養(yǎng)比例

    理論上鋸緣閉殼龜雌性個體數(shù)量一定的條件下,龜卵受精率、孵化率與雄性的數(shù)量成正比,但考慮到雄性需要單獨(dú)隔離飼養(yǎng),空間成本較高。因此本試驗(yàn)中雌雄飼養(yǎng)比例為1∶2.5,經(jīng)統(tǒng)計(jì),鋸緣閉殼龜繁殖率、受精率、交配率遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于其他文章所記錄的數(shù)據(jù),但是最優(yōu)雌雄比尚有待進(jìn)一步的研究。

    4.2 恢復(fù)消化道微生物群落

    在腸道病原微生物驅(qū)殺過程中,有益微生物(益生菌)群落結(jié)構(gòu)也會受到影響,并且由于飼養(yǎng)環(huán)境與親龜原生境的不同,其腸道益生菌群落結(jié)構(gòu)也存在差異。因此,如何恢復(fù)、保持消化道益生菌群落的穩(wěn)態(tài),一直是困擾試驗(yàn)組的問題。經(jīng)過查閱資料及整理,試驗(yàn)組大膽嘗試用人工飼養(yǎng)一年以上健康的鋸緣閉殼龜糞便與餌料混合,投喂新引種的鋸緣閉殼龜。事實(shí)證明這個方法起到了非常好的效果,鋸緣閉殼龜?shù)囊N成活率超過91%(表1),遠(yuǎn)高于同類文章的記錄。下一步我們擬對鋸緣閉殼龜腸道微生物的種類、組成進(jìn)行測定,試圖進(jìn)一步了解其腸道微生物結(jié)構(gòu)。

    5 小結(jié)

    本試驗(yàn)組致力于對鋸緣閉殼龜?shù)难芯?,于全人工條件下連續(xù)兩年成功繁殖、孵化出子一代個體,屬國內(nèi)首例。并將鋸緣閉殼龜從引種、飼養(yǎng)、繁殖等三個方面進(jìn)行要點(diǎn)總結(jié),進(jìn)行分析,并在試驗(yàn)中取得了較為理想的成果。本試驗(yàn)組將會繼續(xù)對鋸緣閉殼龜進(jìn)行深入的研究,隨著研究的深入我們將為鋸緣閉殼龜?shù)娜斯し敝澈鸵巴夥N源保護(hù)提供更多更有價(jià)值的參考。

    致謝:天津農(nóng)學(xué)院教師孫學(xué)亮、石紅鑰老師及研究生陳繼楚、楊澤寧,本科生唐一然、羅升略;廣西大學(xué)研究生李琳、龐海峰、王叢剛等,本科生楊悅等;校外人員盧沛侖、劉宏寶、張海、韋川源等給予本研究在試驗(yàn)場地建設(shè),繪圖及數(shù)據(jù)測量、統(tǒng)計(jì)方面的幫助;以及養(yǎng)殖者劉洪高、凌維鑫、等提供引種資源及養(yǎng)殖數(shù)據(jù);最后感謝張藝琦和王松琪獸醫(yī)師、彭玉凱同學(xué)在消化道寄生生物辨認(rèn)的幫助及相關(guān)用藥咨詢,在此一并致以誠摯的謝意。

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