酒依賴共病雙相情感障礙患者沖動攻擊行為與5-HTR1B基因多態(tài)性關聯(lián)分析

賀長興，鄒韶紅，賈麗娜，徐向東，趙宗峰，佟鈣玉，張 義，張 丞

(1.石河子大學醫(yī)學院，新疆 石河子 832003；2.新疆維吾爾自治區(qū)人民醫(yī)院，新疆 烏魯木齊 830001；3.新疆精神衛(wèi)生中心，新疆 烏魯木齊 830002

酒依賴在雙相情感障礙患者中較普遍，45%的雙相情感障礙患者共病酒依賴，兩種疾病共病的終身患病率約為35%[1-3]。雙相情感障礙的自殺率是普通人群的20～30倍[4]，酒精的使用會影響雙相情感障礙的預后并增加其復發(fā)風險[5-6]。雙相情感障礙遺傳度為60%～85%，其遺傳度與親屬關系程度存在顯著關聯(lián)[7-8]。酒依賴的遺傳度為30%～70%，多巴胺(DA)系統(tǒng)、5-羥色胺(5-HT)系統(tǒng)與酒依賴相關[9-10]。精神疾病的攻擊行為分為手段性、沖動性、精神病性攻擊行為，雙相情感障礙的攻擊行為多數(shù)是沖動攻擊行為，大腦前額葉皮質5-HT能神經(jīng)元減少與其攻擊行為有關[11-13]。5-HT及其代謝物水平下降導致沖動攻擊行為增加，5-HTR1B被認為是與人類和嚙齒類動物攻擊性有關的候選基因，與多種精神病理學有關，包括病理性侵犯、酗酒和自殺等[14-15]。研究顯示，暴露在攻擊性環(huán)境中的大鼠5-HTR1B濃度增加，進而導致大鼠的沖動攻擊性增加[16]。已有較多關于5-HTR1B rs6296多態(tài)性與各種精神疾病患者沖動攻擊行為關聯(lián)性的研究報道[17-22]，但關于該基因多態(tài)性與酒依賴共病雙相情感障礙的研究尚無報道。本研究探討酒依賴共病雙相情感障礙患者的沖動攻擊行為與5-HTR1B rs6296基因多態(tài)性的關聯(lián)性，為酒依賴共病雙相情感障礙患者的沖動攻擊行為導致病理生理改變機制潛在遺傳學差異的研究提供參考。

1 對象與方法

1.1 對象

收集2013年1月-2014年10月就診于新疆維吾爾自治區(qū)人民醫(yī)院臨床心理科與新疆精神衛(wèi)生中心戒酒科的住院患者。入組標準：①符合《精神障礙診斷與統(tǒng)計手冊(第4版)》(Diagnostic and Statistical Manual of Mental Disorders，fourth edition，DSM-IV)酒依賴診斷標準，同時符合雙相情感障礙診斷標準；②男性；③經(jīng)兩名具備精神科主治醫(yī)師以上職稱的醫(yī)師明確診斷。排除標準：①有腦器質性疾病史、軀體疾病史；②患有其他精神活性物質和非依賴性物質所致心境障礙。符合入組標準且不符合排除標準共230例。根據(jù)修訂版外顯攻擊行為量表(Modified Overt Aggression Scale，MOAS)評分分為研究組(沖動攻擊行為組)和對照組(無沖動攻擊行為組)：MOAS加權總分≥5分且“體力攻擊”項≥1分，為研究組(n=128)；加權總分≤4分且“體力攻擊”項為0分，為對照組(n=102)。本研究通過新疆維吾爾自治區(qū)人民醫(yī)院倫理委員會審批，研究對象及家屬均簽署知情同意書。

1.2 方法

1.2.1 評定方法

采用自制一般情況調查表收集研究對象的年齡、民族、受教育程度、經(jīng)濟狀況等資料。采用MOAS評定患者入院前1周攻擊行為的種類和程度。采用0～4分5級評分法，MOAS將4類攻擊行為分別命名為言語攻擊、對財產(chǎn)的攻擊、自身攻擊和體力攻擊。以MOAS加權總分評定患者總體嚴重程度，加權總分=言語攻擊評分×1+對財產(chǎn)的攻擊評分×2+自身攻擊評分×3+體力攻擊評分×4。加權總分越高，攻擊行為越強。

由1名精神科主治醫(yī)師和研究者共同對患者進行測評，測評地點為心理測評室。在調查前進行系統(tǒng)的評定方法學習和訓練。患者在研究者指導下填寫MOAS，其中有關攻擊行為的敏感問題由研究者對患者進行詳細講解溝通后記錄，若有可疑信息，則再次詢問其家屬以確認。

1.2.2 基因組DNA提取及特定片段PCR擴增

在患者住院次日早晨，使用抗凝管收集3～4 mL空腹外周靜脈血。采用試劑盒法提取DNA。rs6296上游引物為：5'-GAAACAGACGCC CAACAGGAC-3'，下游引物為：5'-GAAACAGACG CCCAACAGGAC-3'。PCR反應總體系：30 μL，反應液：PCR mix 15 μL，模板DNA：1 μL，上下游引物各1 μL(10 mol/L)，添加滅菌雙蒸水至30 μL，使用PCR擴增儀擴增。反應程序：95℃預變性5 min，95℃變性30 s，58℃退火45 s，72℃延伸30 s；35個循環(huán)，72℃延伸5 min，4℃保存。反應結束后取擴增產(chǎn)物5 μL，置于1%瓊脂糖凝膠中電泳20 min(恒壓150 V)，使用凝膠成像系統(tǒng)對電泳結果進行觀測、拍照。由北京鼎國生物技術工程公司對PCR產(chǎn)物進行測序、分型并記錄rs6296位點的多態(tài)性。

1.3 統(tǒng)計方法

采用SPSS 17.0進行統(tǒng)計分析。Hardy-Weinberg平衡檢驗、基因型分布和等位基因頻率差異比較均采用χ2檢驗。

2 結 果

2.1 兩組一般情況比較

研究組128例，均為漢族，年齡24～64 歲，平均(40.18±6.25)歲；對照組102例，均為漢族，年齡26～63 歲，平均( 41.08±6.28)歲。兩組一般資料比較差異無統(tǒng)計學意義(P均> 0.05)。見表1。

表1 兩組一般資料比較

2.2 兩組等位基因和基因型頻率比較

有沖動攻擊行為的酒依賴共病雙相情感障礙患者組與無沖攻擊行為組5-HTR1B rs6296位點等位基因和基因型頻率差異均無統(tǒng)計學意義(P均>0.05)。見表2。

3 討 論

本實驗對酒依賴共病雙相情感障礙患者的沖動攻擊行為與5-HTR1B rs6296基因多態(tài)性的關聯(lián)性進行研究，結果顯示酒依賴共病雙相情感障礙患者沖動攻擊行為與5-HTR1B rs6296基因多態(tài)性無相關性。目前部分關于精神疾病的癥狀學、基因學研究取得了與本研究一致的結果：Contini等[17]的單倍型分析實驗表明，5-HTR1B rs6296多態(tài)性在酒依賴患者中存在強陽性控制。Yi等[18]對漢族穢語綜合癥(Tourette syndrome，TS)患者的研究顯示，5-HT1B rs6296基因多態(tài)性與漢族TS患者的沖動攻擊行為無相關性。Müller等[19]對注意力缺陷多動障礙(Attention-deficit hype ractivity disorder，ADHD)患者與5-HT1BR關聯(lián)性進行研究，結果顯示rs6296位點與ADHD患者外在的反社會行為無關聯(lián)性。

表2 兩組等位基因和基因型頻率比較[n(%)]

另外幾項研究結果與本研究存在差異：Ortiz等[20]認為血清素(5-HT又稱為血清素)與谷氨酸之間存在的生物作用可能影響強迫癥(Obsessive-compulsive disorder，OCD)兒童患者的病理生理學途徑，且rs6296位點基因多態(tài)性與之有著明顯的相關性。Kao等[21]的研究顯示，5-HTR1B rs6296-C等位基因通過降低HTR1B mRNA水平，進而導致抑郁癥患者表現(xiàn)出更多的攻擊行為，甚至產(chǎn)生自殺意念。Hakulinen等[22]的一項大樣本研究顯示，5-HTR1B SNP rs6296與兒童時期的攻擊行為有關，攜帶C/C基因型的個體比攜帶C/G者更具有攻擊性。HTR1B SNP rs6296可能修改了童年攻擊行為與成年人敵對行為之間的關系。激進的行為和敵意可能會形成一種生活過程模式，而HTR1B rs6296基因可能有助于這種模式的發(fā)展。5-HT是色氨酸代謝途徑的產(chǎn)物，是人類中樞神經(jīng)系統(tǒng)最重要的神經(jīng)遞質之一，在學習、記憶、睡眠及情緒中發(fā)揮重要作用。5-HT受體通過激酶和磷脂酶信號通路級聯(lián)介導其生物學效應，最終改變突觸后電位、可塑性和基因表達。

上述實驗提示rs6296基因多態(tài)性與沖動攻擊行為的關聯(lián)性在不同的精神障礙中存在不同的效應。也有研究表明5-HTR1B其他位點基因也存在相似的效應：Huang等[23]對精神病患者和健康志愿者的實驗結果顯示：藥物濫用障礙和重度抑郁似乎與5-HTR1B G861C基因座有關，但未發(fā)現(xiàn)雙相情感障礙、精神分裂癥、酗酒和自殺企圖與該基因多態(tài)性相關。

本研究不足之處：酒依賴及雙相情感障礙是多病因、多基因遺傳性疾病，本實驗進行了5-HT1B基因單位點的多態(tài)性研究，忽略了環(huán)境因素在疾病病因學中的作用。在以后的實驗中應進一步完善各基因的多位點多態(tài)性聯(lián)合研究，并增加與環(huán)境因素、負性生活經(jīng)歷的交互研究。