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    狐尾藻在不同營(yíng)養(yǎng)底泥腐解過(guò)程中胡敏酸的變化

    2019-03-29 07:12:40巴翠翠張毅敏張志偉湯志凱顧詩(shī)云
    中國(guó)環(huán)境科學(xué) 2019年3期
    關(guān)鍵詞:底泥組分水體

    巴翠翠,張毅敏,楊 飛,孔 明,張志偉,湯志凱,顧詩(shī)云

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    狐尾藻在不同營(yíng)養(yǎng)底泥腐解過(guò)程中胡敏酸的變化

    巴翠翠1,2,張毅敏2*,楊 飛2,孔 明2,張志偉1,2,湯志凱1,2,顧詩(shī)云1,2

    (1.常州大學(xué)環(huán)境與安全工程學(xué)院,江蘇 常州 213164;2.環(huán)境保護(hù)部南京環(huán)境科學(xué)研究所,江蘇 南京 210042)

    采用平行因子分析方法,結(jié)合紫外吸收光譜?三維熒光光譜以及傅里葉變換紅外光譜技術(shù),研究了沉水植物狐尾藻在低、中、高營(yíng)養(yǎng)底泥腐解過(guò)程中胡敏酸(HA)的變化,進(jìn)一步揭示了不同營(yíng)養(yǎng)底泥對(duì)沉水植物腐解的影響機(jī)制.結(jié)果表明,底泥營(yíng)養(yǎng)水平越高,狐尾藻腐解得越快(<0.05),釋放出更多的溶解性有機(jī)碳(DOC)、溶解性總氮(DTN)、溶解性總磷(DTP)和腐殖質(zhì);底泥營(yíng)養(yǎng)程度與HA的疏水性?分子復(fù)雜性?分子量大小呈正相關(guān)(<0.05);熒光鑒別出不同營(yíng)養(yǎng)底泥HA都含有1種類(lèi)蛋白質(zhì)組分C2和2種類(lèi)富里酸組分C1、C3,且類(lèi)富里酸組分和類(lèi)蛋白質(zhì)組分在不同腐解條件下具有相似的組分特征;不同營(yíng)養(yǎng)底泥不同時(shí)間提取的HA紅外圖譜較為相似,表明不同腐解條件不同時(shí)間提取的HA含有相似的官能團(tuán),狐尾藻腐爛高營(yíng)養(yǎng)底泥組提取的HA含有更多的芳香性物質(zhì)和有機(jī)磷.采用光譜分析法對(duì)狐尾藻腐爛分解HA成分的化學(xué)結(jié)構(gòu)特征進(jìn)行系統(tǒng)的研究,可深入了解不同營(yíng)養(yǎng)底泥對(duì)沉水植物腐解的影響機(jī)制,為湖泊水環(huán)境生態(tài)治理和修復(fù)提供理論參考.

    平行因子分析;三維熒光光譜;紅外光譜;底泥;狐尾藻腐解;胡敏酸

    沉水植物是水環(huán)境的重要調(diào)節(jié)者,一方面可通過(guò)分泌化感物質(zhì)等直接抑制藻類(lèi)生長(zhǎng)繁殖[1-2],另一方面可通過(guò)吸收水體和沉積物中的營(yíng)養(yǎng)鹽改善水體水質(zhì)[3-4].但沉水植物具有一定的生命周期,當(dāng)單一季節(jié)沉水植物進(jìn)入衰亡期后,大量植物死亡、殘?bào)w通過(guò)淋溶作用及微生物分解釋放大量的有機(jī)質(zhì)和營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),易造成水體的二次污染,如東平湖菹草腐解引發(fā)水生態(tài)環(huán)境惡化,造成魚(yú)類(lèi)大量死亡[5].腐殖質(zhì)是自然界中最豐富的有機(jī)質(zhì),由胡敏酸(HA)?富里酸(FA)?胡敏素(humin)3部分組成,由于腐殖質(zhì)結(jié)構(gòu)中含有大量的官能團(tuán),可與多種有機(jī)、無(wú)機(jī)物質(zhì)發(fā)生相互作用,從而對(duì)這些物質(zhì)的環(huán)境化學(xué)行為產(chǎn)生影響.研究表明,水生植物殘?bào)w通過(guò)微生物分解縮合產(chǎn)生腐殖質(zhì),能影響水體中污染物的遷移和轉(zhuǎn)化,加深水體污染程度[6-7]. HA是腐殖質(zhì)主要的活躍成分,因此有必要對(duì)湖泊水生植物腐爛分解成分的化學(xué)結(jié)構(gòu)特征進(jìn)行系統(tǒng)研究,以期為更進(jìn)一步了解湖泊有機(jī)質(zhì)變化機(jī)制提供科學(xué)依據(jù).

    水生植物腐解是一個(gè)復(fù)雜的過(guò)程,除受自身質(zhì)量、組織結(jié)構(gòu)和纖維含量等影響[8-9]外,水體環(huán)境如pH值?DO、溫度、營(yíng)養(yǎng)鹽濃度、干濕交替等也會(huì)對(duì)腐解產(chǎn)生重要影響[10-12].除此之外,研究發(fā)現(xiàn)底泥的理化性質(zhì)也對(duì)水生植物腐解有著顯著影響, Debusk等[13]研究了不同P含量底泥條件下植物腐解速率的變化,發(fā)現(xiàn)香蒲、鋸齒草葉在不同P含量底泥(從高到低)中腐解速率依次降低;Eli?ka等[14]研究底泥營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)含量與濕地大型植物腐解之間的關(guān)系,發(fā)現(xiàn)底泥l(xiāng)ogC/P(質(zhì)量比)>4000時(shí),腐解過(guò)程就會(huì)變得非常緩慢.目前關(guān)于沉水植物在不同營(yíng)養(yǎng)底泥條件下腐解產(chǎn)生腐殖質(zhì)的研究較少,因此,本文以沉水植物狐尾藻為研究對(duì)象,設(shè)計(jì)模擬試驗(yàn),利用紫外吸收光譜、三維熒光光譜以及傅里葉變換紅外光譜技術(shù)分析狐尾藻在不同營(yíng)養(yǎng)底泥腐解過(guò)程中的變化,深入了解不同營(yíng)養(yǎng)底泥對(duì)沉水植物腐解的影響機(jī)制,以期為湖泊水環(huán)境生態(tài)治理和修復(fù)提供理論參考.

    1 材料與方法

    1.1 試驗(yàn)材料

    表1 試驗(yàn)底泥理化性質(zhì)(g/kg) Table 1 Test soil physical and chemical properties (g/kg)

    沉水植物狐尾藻采集于太湖梅梁灣湖區(qū),根據(jù)已有的研究結(jié)果[15],云南洱海?東太湖、五里湖分別為低、中、高營(yíng)養(yǎng)水平湖泊,以這些湖泊底泥營(yíng)養(yǎng)指標(biāo)為參照,試驗(yàn)底泥為某稻麥輪作田園土,通過(guò)添加不同梯度營(yíng)養(yǎng)鹽配置低、中、高營(yíng)養(yǎng)底泥材料.試驗(yàn)底泥理化性質(zhì)見(jiàn)表1.

    1.2 試驗(yàn)方法

    1.2.1 試驗(yàn)設(shè)計(jì) 試驗(yàn)地點(diǎn)在常州大學(xué)玻璃溫室,試驗(yàn)時(shí)間為2017年7~10月,實(shí)驗(yàn)周期120d.試驗(yàn)裝置為18個(gè)直徑55cm,高65cm,容積100L的圓柱體塑料桶,每6個(gè)塑料桶鋪放10kg低、中、高營(yíng)養(yǎng)底泥和80L自來(lái)水,靜放1周.試驗(yàn)開(kāi)始前挑選成熟狐尾藻植株,去除異物用自來(lái)水洗凈,并將植物體表多余水分晾干,用濾布將其包裹后放入試驗(yàn)裝置中.試驗(yàn)按照底泥營(yíng)養(yǎng)程度以及是否添加狐尾藻設(shè)6個(gè)試驗(yàn)組:低營(yíng)養(yǎng)底泥組(L0、L1),中營(yíng)養(yǎng)底泥組(M0、M1),高營(yíng)養(yǎng)底泥組(H0、H1),其中L0、M0、H0不添加狐尾藻;L1、M1、H1加入3kg/m3狐尾藻,每個(gè)試驗(yàn)組重復(fù)3次.

    在試驗(yàn)第0,1,4,8,13,19,26,36,48,60d采集水樣,測(cè)定水體的基本理化指標(biāo);在試驗(yàn)第0,20,40,60,120d采集底泥,待自然風(fēng)干后過(guò)20目篩,混勻提取HA.

    1.2.2 指標(biāo)測(cè)定 采用便攜式水質(zhì)測(cè)定儀YSI測(cè)定水體的pH值?溶解氧(DO),堿性過(guò)硫酸鉀消解紫外分光光度法測(cè)定溶解性總氮(DTN)、溶解性總磷(DTP),溶解性有機(jī)碳(DOC)的含量采用島津TOC分析儀測(cè)定.

    底泥中HA的提取與凈化采用國(guó)際腐殖質(zhì)協(xié)會(huì)提出的參考方法[16].提取出來(lái)的HA液體樣品經(jīng)0.45μm玻璃纖維濾膜(GF/F,Whatman,450℃,灼燒4h)過(guò)濾后,濾液置于4℃冰箱保存待用;部分儲(chǔ)備液進(jìn)行冷凍干燥,作為待測(cè)固體樣品.HA的含碳量采用重鉻酸鉀比色法測(cè)定(F-HZ-DZ-TR-0048).

    采用島津UV2700紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)對(duì)紫外吸收光譜進(jìn)行測(cè)定,波長(zhǎng)范圍為200~800nm,掃描波長(zhǎng)間隔1nm,分別測(cè)定HA樣品在260,400,465,600, 665nm處的吸光度值,并計(jì)算SUVA260、E4/E6以及Δlg值.SUVA260是反映HA疏水性強(qiáng)弱的指標(biāo),是單位溶解性有機(jī)碳濃度下波長(zhǎng)260nm處的吸收系數(shù),即以樣品在紫外260nm的吸光度值乘以100除以DOC的比值表示[17];E4/E6是反映HA分子量與芳化度的指標(biāo),是吸光度在465與665nm處的比值;Δlg(色調(diào)系數(shù))是反映HA分子復(fù)雜性的指標(biāo),等于吸光度在400與600nm處比值的對(duì)數(shù)值.

    使用熒光分光光度計(jì)(CaryEclipse,美國(guó)安捷倫)測(cè)定樣品的熒光光譜,首先稀釋樣品使得其在波長(zhǎng)254nm處吸光度小于0.1[18].激發(fā)光源150W疝弧燈;PMT電壓700V;信噪比>110;響應(yīng)時(shí)間0.05s;帶通x=5nm,m=2nm;掃描速度2400nm/min;掃描光譜進(jìn)行儀器自動(dòng)校正.激發(fā)波長(zhǎng)x的掃描范圍為220~400nm,發(fā)射波長(zhǎng)m的掃描范圍280~550nm.

    采用傅里葉變換紅外光譜儀(FTIR光譜儀,Nicolet iS50,United States)iS50,將1mg凍干的HA樣品與400mg干燥的KBr磨細(xì)混勻,將微量樣品放置在金剛石窗口上,壓成薄片后測(cè)試,光譜掃描波數(shù)范圍為500~4000cm-1,掃描次數(shù)為16次,分辨率為4cm-1.

    2 結(jié)果與分析

    2.1 狐尾藻腐解過(guò)程中水質(zhì)主要指標(biāo)的變化

    如圖1a所示,L1、M1、H1組DO呈先降低后升高的趨勢(shì),這與腐解過(guò)程相關(guān).腐解初期,首先植物腐爛分解消耗氧,其次植物體大量死亡漂浮在水體表面,阻礙了原有水體對(duì)大氣中氧的吸收,造成DO迅速下降,試驗(yàn)第1d,L1、M1、H1組水體DO迅速降低至0.22,0.13,0.14mg/L;試驗(yàn)后期,隨著植物殘?bào)w不斷沉降,大氣復(fù)氧能力得到恢復(fù),水中DO逐漸升高,其中L1、M1、H1組DO分別在第36,26,19d大幅度升高,說(shuō)明在一定范圍內(nèi),底泥營(yíng)養(yǎng)水平越高,狐尾藻腐解得越快.

    圖1 腐解過(guò)程中不同營(yíng)養(yǎng)底泥組DO、DOC、DTN、DTP的濃度變化 Fig.1 Changes of DO,DOC,DTN and DTP concentrations in different nutrient sediments during decomposition

    L0、M0、H0為未添加植物的樣品,其有機(jī)質(zhì)的庫(kù)存量越來(lái)越少,DOC濃度隨著腐解時(shí)間的增長(zhǎng)而逐漸降低,其余處理組的DOC濃度呈先增后減的趨勢(shì)(圖1b).狐尾藻腐解初期,苯醇溶出物和水溶性物質(zhì)先不斷釋放DOC進(jìn)入水體,導(dǎo)致水體的DOC含量升高,隨后大量的微生物需要利用DOC作為碳源和能源滿足自身生長(zhǎng)繁殖的需求,因而該階段DOC濃度表現(xiàn)為下降趨勢(shì)[19].其中,L1、M1、H1組分別在第36,26,13d DOC 釋放量達(dá)到最大,說(shuō)明與空白組相比,在一定范圍內(nèi),底泥營(yíng)養(yǎng)水平的提高可以促進(jìn)狐尾藻腐解過(guò)程中DOC的釋放,且L1、M1、H1組DOC的凈釋放量分別為3.307,6.105,7.263mg/L,可以看出,DOC的凈釋放量隨著底泥營(yíng)養(yǎng)水平的提高呈遞增趨勢(shì),也許是高營(yíng)養(yǎng)底泥的速效養(yǎng)分促進(jìn)了微生物的活動(dòng)?增加了微生物的活性,從而提高了對(duì)有機(jī)質(zhì)的分解速率[20].

    不同營(yíng)養(yǎng)底泥對(duì)狐尾藻腐解釋放DTN、DTP的影響不同(圖1c、d).L0、M0、H0空白處理組隨著腐解時(shí)間增長(zhǎng),DTN、DTP的濃度基本無(wú)變化,L1、M1、H1添加植物處理組DTN、DTP的濃度均先增大后減小.其中,L1、M1、H1組分別在第48,36,26d DTN釋放量最大,在第36,26,19d DTP釋放量達(dá)到最大值,可見(jiàn), DTN、DTP與 DOC有著相似的變化特征,在該試驗(yàn)條件下,底泥營(yíng)養(yǎng)水平的提高可以促進(jìn)狐尾藻腐解過(guò)程中DTN、DTP的釋放(<0.05),這與Debusk等[13]研究成果相似.

    2.2 狐尾藻腐解過(guò)程中底泥HA碳含量的變化

    由表2可知,腐解第0d, L0、M0、H0空白組 HA含量無(wú)明顯差異,表明在該試驗(yàn)條件下,添加不同梯度的營(yíng)養(yǎng)鹽對(duì)HA碳含量無(wú)顯著影響,隨著腐解時(shí)間增長(zhǎng),有機(jī)質(zhì)逐漸腐解,HA碳含量逐漸降低;低營(yíng)養(yǎng)底泥處理組的HA碳含量呈增長(zhǎng)趨勢(shì),其余處理組整體呈先增后減的趨勢(shì),L1、M1、H1組分別在第120,60,40d HA碳含量達(dá)到最大,隨著腐解時(shí)間增長(zhǎng),HA碳含量均逐漸下降,表明在該試驗(yàn)條件下,高營(yíng)養(yǎng)底泥可以促進(jìn)狐尾藻腐解釋放腐殖質(zhì)(<0.05),這與圖1的研究結(jié)果是相同的.這是因?yàn)楦郀I(yíng)養(yǎng)底泥向水體釋放N、P營(yíng)養(yǎng)鹽較多,狐尾藻腐解過(guò)程中對(duì)N、P等養(yǎng)分需求較高,當(dāng)植物在含這些養(yǎng)分較高的環(huán)境下腐解時(shí),微生物群落生長(zhǎng)加快,狐尾藻腐解速率快,釋放出更多的HA,隨著時(shí)間的推移,有機(jī)質(zhì)逐漸腐解,導(dǎo)致HA碳含量相應(yīng)降低.

    表2 底泥HA碳含量的變化情況(g/kg) Table 2 Changes in the carbon content of sediment humic acid (g/kg)

    2.3 狐尾藻腐解過(guò)程中底泥HA紫外吸收光譜的變化

    SUVA260是反映HA疏水性強(qiáng)弱的指標(biāo),數(shù)值越大代表疏水性越強(qiáng),疏水組分越多[21].由表3可見(jiàn),H0組中HA的SUVA260值明顯大于L0、M0組,表明在該試驗(yàn)條件下,高營(yíng)養(yǎng)底泥中HA的疏水性更強(qiáng);各處理組HA的SUVA260值逐漸增大,表明HA的疏水性隨著狐尾藻腐解過(guò)程逐漸增強(qiáng).

    E4/E6的大小與HA的分子量及芳化度密切相關(guān),E4/E6值越高,說(shuō)明腐殖質(zhì)的分子量越大,結(jié)構(gòu)越復(fù)雜[22].由表4可見(jiàn),空白處理組中HA的E4/E6值大小順序?yàn)镠0>M0>L0,表明在該試驗(yàn)條件下,底泥營(yíng)養(yǎng)程度越高,HA的相對(duì)分子量更大;狐尾藻腐解過(guò)程中,處理組HA的E4/E6值呈增加的趨勢(shì),表明隨著腐解的進(jìn)行,HA芳化度升高,結(jié)構(gòu)復(fù)雜化.高營(yíng)養(yǎng)底泥可以促進(jìn)狐尾藻的腐解,狐尾藻殘?bào)w沉降在底泥中,殘?bào)w在腐殖化過(guò)程中會(huì)形成芳構(gòu)化度高?脂肪性強(qiáng)的小分子,從而使高營(yíng)養(yǎng)底泥較其他試驗(yàn)組結(jié)構(gòu)更復(fù)雜[23].

    Δlg(色調(diào)系數(shù)),它能夠反映分子的復(fù)雜性.一般來(lái)說(shuō),Δlg值越高,樣品中醇羥基(R–OH)、甲氧基(CH3O–)的含量增加,羧基(–COOH)?酚羥基(Ar–OH)、羰基(C═O)的含量降低,樣品的分子結(jié)構(gòu)由復(fù)雜變簡(jiǎn)單,氧化程度以及芳香性降低[24].由表5可見(jiàn),空白組中HA各營(yíng)養(yǎng)程度的Δlg值變化趨勢(shì)與E4/E6恰好相反,大小順序依次為L(zhǎng)0>M0>H0,表明在該試驗(yàn)條件下,底泥營(yíng)養(yǎng)程度與HA分子的復(fù)雜性呈正相關(guān)(<0.05),即與低營(yíng)養(yǎng)底泥相比,高營(yíng)養(yǎng)底泥中的HA分子更為復(fù)雜;各處理組隨時(shí)間變化HA的Δlg值均逐漸減小,表明隨著實(shí)驗(yàn)的進(jìn)行,HA芳香性增強(qiáng),結(jié)構(gòu)復(fù)雜化.芳香族物質(zhì)不易溶于水,這也解釋了HA含有較多疏水組分以及隨著腐解的進(jìn)行,HA疏水性增強(qiáng)的現(xiàn)象.

    在該試驗(yàn)條件下,由于不同營(yíng)養(yǎng)底泥理化性質(zhì)不同,高營(yíng)養(yǎng)底泥中可能含有更多的真菌木霉,根據(jù)胡承彪等[25]研究發(fā)現(xiàn),木霉一般在適宜條件下具有較強(qiáng)的分解纖維素、半纖維素?木質(zhì)素及很多難分解物質(zhì)的能力,而這些物質(zhì)通過(guò)分解和氧化產(chǎn)生的醌型化合物分泌到體外,細(xì)胞自溶時(shí)很容易縮合-聚合成芳構(gòu)化度高、脂肪性強(qiáng)的腐殖質(zhì)[23,26],而且Anderson和Domsch等[27]從真菌中提取出腐殖酸型的多聚物發(fā)現(xiàn)其性質(zhì)類(lèi)似灰色HA,表明在高營(yíng)養(yǎng)底泥微生物作用下,HA的分子量較大,結(jié)構(gòu)較復(fù)雜.其性質(zhì)類(lèi)似灰色HA,在該研究中底泥營(yíng)養(yǎng)程度與HA的疏水性、分子復(fù)雜性、分子量大小呈正相關(guān)(<0.05)可能和以上因素有關(guān).

    表3 底泥HA的SUVA260 [L/(mg·cm)] Table 3 SUVA260 of sediment humic acid [L/(mg·cm)]

    表4 底泥HA的E4/E6Table 4 E4/E6 of sediment humic acid

    表5 底泥腐殖質(zhì)組分的ΔlgK Table 5 ΔlgK of sediment humic acid

    2.4 狐尾藻腐解過(guò)程中底泥的熒光光譜特性

    采用平行因子分析法(PARAFAC)對(duì)底泥提取出來(lái)的樣品三維熒光光譜進(jìn)行分解,各熒光物質(zhì)及其相應(yīng)位置見(jiàn)表6.低營(yíng)養(yǎng)底泥組分離出3種熒光組分(圖2),組分C1具有2個(gè)峰,主次峰對(duì)應(yīng)的發(fā)射波長(zhǎng)分別為290,360nm,激發(fā)波長(zhǎng)為230nm,主峰230nm/290nm對(duì)應(yīng)傳統(tǒng)A峰(240~270nm/370~ 440nm)且激發(fā)波長(zhǎng)發(fā)生藍(lán)移,主要為紫外區(qū)類(lèi)富里酸熒光峰[28],次峰230nm/360nm位于傳統(tǒng)的B峰(225~237nm/340~381nm)區(qū)域,為類(lèi)色氨酸熒光峰[29-30],該組分熒光特性主要體現(xiàn)為類(lèi)富里酸物質(zhì);組分C2是以類(lèi)酪氨酸為主的類(lèi)蛋白物質(zhì),該組分(240nm?260nm/370nm)具有1個(gè)發(fā)射波長(zhǎng),對(duì)應(yīng)2個(gè)激發(fā)波長(zhǎng),主峰240nm/370nm對(duì)應(yīng)傳統(tǒng)C峰(220~225nm/340~380nm)發(fā)現(xiàn)一定紅移,主要為類(lèi)酪氨酸熒光峰[31],次峰260nm/370nm為紫外區(qū)類(lèi)富里酸熒光峰;組分C3為類(lèi)富里酸物質(zhì),該組分(225nm?260nm、320nm/425nm)具有3個(gè)峰,峰(225nm/425nm)相對(duì)傳統(tǒng)B峰發(fā)現(xiàn)一定藍(lán)移,峰260nm/425nm對(duì)應(yīng)為紫外區(qū)類(lèi)富里酸熒光A峰區(qū)域內(nèi),峰320nm/ 425nm位于傳統(tǒng)的D峰(310~360nm/370~450nm)區(qū)域,為可見(jiàn)區(qū)類(lèi)富里酸熒光峰[32].

    中營(yíng)養(yǎng)底泥組分離出3種熒光組分(圖2),組分C1(230nm/290nm、360nm)、C2(245nm、260nm/ 370nm)與低營(yíng)養(yǎng)底泥組分離出來(lái)的C1組分(230nm/ 290nm、360nm)、C2組分(240nm?260nm/370nm)大致相同,分別為類(lèi)富里酸、類(lèi)蛋白物質(zhì);組分C3(265nm、320nm/425nm)是以類(lèi)富里酸為主的類(lèi)腐殖酸組分,主峰265nm/425nm對(duì)應(yīng)為紫外區(qū)類(lèi)富里酸熒光,次峰320nm/425nm對(duì)應(yīng)為可見(jiàn)區(qū)類(lèi)富里酸熒光.

    高營(yíng)養(yǎng)底泥組分離出3種熒光組分(圖2),組分C1(240nm/370nm)只有一個(gè)熒光峰,對(duì)應(yīng)為紫外區(qū)類(lèi)富里酸熒光;組分C2(225nm/295nm)對(duì)應(yīng)傳統(tǒng)C峰區(qū)域且發(fā)射波長(zhǎng)發(fā)生紅移;組分C3(265nm、320nm/430nm)與中營(yíng)養(yǎng)底泥組分離出來(lái)的的C3組分(265nm、320nm/425nm)大致相同.

    表6 DOM的主要熒光物質(zhì)及其相應(yīng)位置 Table 6 The main fluorescent substances and these positions in DOM

    圖2 不同處理組底泥HA的熒光光譜 Fig.2 Fluorescence spectra of sediment humic acid in different treatment groups

    狐尾藻在3種營(yíng)養(yǎng)底泥條件下腐解分離得到的熒光物質(zhì)主要為類(lèi)富里酸和類(lèi)蛋白質(zhì),類(lèi)蛋白質(zhì)包括類(lèi)酪氨酸和類(lèi)色氨酸物質(zhì),本實(shí)驗(yàn)中得到的類(lèi)蛋白熒光峰主要反映的是生物降解來(lái)源的類(lèi)酪氨酸物質(zhì),代表與微生物降解產(chǎn)生的芳香性蛋白類(lèi)結(jié)構(gòu)有關(guān)的熒光基團(tuán)[33];出現(xiàn)類(lèi)富里酸熒光峰說(shuō)明樣品中含有較多的羰基和羧基結(jié)構(gòu)[34].

    利用平行因子分析法所得熒光組分在不同營(yíng)養(yǎng)底泥?不同腐解時(shí)間的濃度得分值max進(jìn)行制圖,max表示各類(lèi)熒光峰的熒光強(qiáng)度或各樣品中各組分的含量.由圖3可知,低營(yíng)養(yǎng)底泥處理組的max值與腐解時(shí)間成正比,呈增長(zhǎng)趨勢(shì)(<0.05),中營(yíng)養(yǎng)?高營(yíng)養(yǎng)底泥處理組的max值整體均呈先升高后下降的趨勢(shì),也許是因?yàn)樵谠撛囼?yàn)條件下,高營(yíng)養(yǎng)底泥中的微生物可以提高有機(jī)質(zhì)的分解速率,此分析結(jié)果與圖1結(jié)論相同;在整個(gè)腐解過(guò)程中,組分C3含量最低,低營(yíng)養(yǎng)?中營(yíng)養(yǎng)底泥樣品組分C1占據(jù)主導(dǎo)地位,與低?中營(yíng)養(yǎng)底泥組相比,高營(yíng)養(yǎng)底泥樣品組分C2,即類(lèi)蛋白熒光峰強(qiáng)度較高,這可能是由于高營(yíng)養(yǎng)底泥提取的HA樣品分子結(jié)構(gòu)上帶有更多的芳環(huán)氨基酸[43].

    2.5 狐尾藻腐解過(guò)程中底泥HA的紅外光譜特性

    對(duì)狐尾藻在低、中、高營(yíng)養(yǎng)底泥中腐爛分解各階段產(chǎn)生的HA進(jìn)行紅外光譜分析,結(jié)果見(jiàn)圖4~6.各類(lèi)化合物紅外吸收波數(shù)范圍參見(jiàn)文獻(xiàn)[44].

    本實(shí)驗(yàn)中HA吸收峰主要出現(xiàn)在:510~400(C—N—C胺類(lèi)),550~465(C—C=O羧酸),740~720(—(CH2)n—烷烴類(lèi)),1055~915(P—O—C有機(jī)磷類(lèi)),1390~1360 (SO2Cl磺酰氯),1650~1600(芳香基上的C=C伸縮振動(dòng)),3520~3320cm-1(—NH2芳香胺?伯胺和酰胺).

    從圖4~6可知,低、中、高營(yíng)養(yǎng)底泥不同時(shí)間提取的HA紅外光譜相似,表明不同腐解條件不同時(shí)間提取的HA含有相似的官能團(tuán),但仔細(xì)觀察各個(gè)HA紅外光譜,就會(huì)發(fā)現(xiàn)各樣品的特征峰吸收強(qiáng)度存在較明顯的差異.狐尾藻在低、中營(yíng)養(yǎng)底泥中腐解第60d,在1637cm-1出現(xiàn)了芳香基的C=C伸縮振動(dòng),而高營(yíng)養(yǎng)底泥處理組第40d在1637cm-1就出現(xiàn)了芳香基的C=C伸縮振動(dòng),表明狐尾藻腐爛底泥提取的HA含有較多的芳香性物質(zhì),高營(yíng)養(yǎng)底泥可以促進(jìn)狐尾藻腐解釋放芳香性物質(zhì);狐尾藻在高營(yíng)養(yǎng)底泥中腐解第120d,在1032cm-1特征峰處與低、中營(yíng)養(yǎng)底泥組相比較,吸收強(qiáng)度明顯增大,表明狐尾藻在高營(yíng)養(yǎng)底泥條件下腐解提取的HA含有較多的有機(jī)磷.王菊花[45]對(duì)不同微生物土壤腐殖質(zhì)中的HA進(jìn)行紅外表征也發(fā)現(xiàn)不同處理的紅外波形基本一致,表明不同微生物土壤中的HA有著相似的結(jié)構(gòu)C架.

    2.6 狐尾藻在不同營(yíng)養(yǎng)底泥腐解過(guò)程中HA各指標(biāo)相關(guān)性分析

    采用相關(guān)性分析對(duì)狐尾藻在不同營(yíng)養(yǎng)底泥腐解過(guò)程中得到的HA紫外參數(shù)?熒光參數(shù)進(jìn)行相關(guān)系數(shù)計(jì)算,可以客觀揭示底泥營(yíng)養(yǎng)水平與各個(gè)參數(shù)之間的聯(lián)系.各指標(biāo)之間的相關(guān)性分析顯示(表6),在低營(yíng)養(yǎng)底泥各紫外參數(shù)之間,SUVA260、E4/E6、Δlg兩兩均呈極顯著相關(guān)(<0.01),而與中、高營(yíng)養(yǎng)底泥紫外參數(shù)均未呈現(xiàn)顯著相關(guān)性,同樣的,中、高營(yíng)養(yǎng)底泥SUVA260、E4/E6、Δlg兩兩均達(dá)到極顯著相關(guān)(<0.01),而與其余處理組底泥紫外參數(shù)無(wú)相關(guān)性,上述現(xiàn)象表明狐尾藻在相同營(yíng)養(yǎng)底泥條件下腐解,SUVA260與E4/E6、Δlg密切相關(guān);不同營(yíng)養(yǎng)底泥對(duì)狐尾藻腐解產(chǎn)生HA的疏水性、芳化度以及分子復(fù)雜性具有較大影響.從表5還可發(fā)現(xiàn),低營(yíng)養(yǎng)底泥中的類(lèi)富里酸組分(L-C1、L-C3)與中、高營(yíng)養(yǎng)底泥中的類(lèi)富里酸組分(M-C1、M-C3、H-C1、H-C3)達(dá)極顯著相關(guān)(<0.01),低營(yíng)養(yǎng)底泥中的類(lèi)蛋白組分(L-C2)與中、高營(yíng)養(yǎng)底泥中的類(lèi)蛋白組分(M-C2、H-C2、H-C3)達(dá)極顯著相關(guān)(<0.01),低營(yíng)養(yǎng)底泥中的類(lèi)蛋白組分(L-C2)與類(lèi)富里酸組分(L-C1、L-C3)呈顯著相關(guān)(<0.05),中、高營(yíng)養(yǎng)底泥中的類(lèi)蛋白組分(M-C2、H-C2)與類(lèi)富里酸組分(M-C1、M-C3、H-C1、H-C3)均呈顯著相關(guān)(<0.05),表明在該試驗(yàn)條件下,不管是相同營(yíng)養(yǎng)底泥,還是不同營(yíng)養(yǎng)底泥的類(lèi)富里酸組分和類(lèi)蛋白組分在不同腐解條件下都具有相似的組分特征[46].

    表6 不同指標(biāo)之間的相關(guān)性分析 Table 6 Results from correlation analysis of the different parameters

    注:**代表<0.01,*代表<0.05,L代表低營(yíng)養(yǎng),M代表中營(yíng)養(yǎng),H代表高營(yíng)養(yǎng).

    3 結(jié)論

    3.1 不同營(yíng)養(yǎng)底泥對(duì)狐尾藻腐解釋放DOC、DTN、DTP的影響不同,在試驗(yàn)條件下,底泥營(yíng)養(yǎng)水平的提高可以促進(jìn)狐尾藻腐解過(guò)程中DOC、DTN、DTP的釋放.低營(yíng)養(yǎng)底泥處理組的HA含量呈增長(zhǎng)趨勢(shì),低?中營(yíng)養(yǎng)底泥處理組整體呈先增后減的趨勢(shì),說(shuō)明高營(yíng)養(yǎng)底泥可以促進(jìn)狐尾藻腐解釋放腐殖質(zhì).

    3.2 SUVA260、E4/E6、Δlg紫外參數(shù)表明,隨著狐尾藻腐解的進(jìn)行,底泥營(yíng)養(yǎng)程度與HA疏水性強(qiáng)弱、分子的復(fù)雜性及分子量大小呈正相關(guān).

    3.3 低、中、高營(yíng)養(yǎng)底泥HA中三維熒光光譜都可分解為3種熒光組分,1種類(lèi)蛋白質(zhì)組分C2和2種類(lèi)富里酸組分C1、C3,且類(lèi)富里酸組分與類(lèi)蛋白質(zhì)組分在不同腐解條件下具有相似的組分特征;低營(yíng)養(yǎng)底泥處理組的max值隨著腐解時(shí)間的增加呈增長(zhǎng)趨勢(shì),中、高營(yíng)養(yǎng)底泥處理組的max值呈先升高后下降的趨勢(shì);在整個(gè)腐解過(guò)程中,組分C3含量最低,低、中營(yíng)養(yǎng)底泥樣品組分C1占據(jù)主導(dǎo)地位,與低、中營(yíng)養(yǎng)底泥組相比,高營(yíng)養(yǎng)底泥樣品組分C2含量較高.

    3.4 低、中、高營(yíng)養(yǎng)底泥不同時(shí)間提取的HA紅外圖譜較為相似,表明不同腐解條件不同時(shí)間提取的HA含有相似的官能團(tuán).高營(yíng)養(yǎng)底泥可以促進(jìn)狐尾藻腐解釋放芳香性物質(zhì),狐尾藻腐爛底泥提取的HA含有較多的芳香性物質(zhì)和有機(jī)磷.

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    Changes of humic acid in the process of decomposition of.

    BA Cui-cui1,2, ZHANG Yi-min2*, YANG Fei2, KONG Ming2, ZHANG Zhi-wei1,2, TANG Zhi-kai1,2, GU Shi-yun1,2

    School of Environmental and Safety Engineering, Changzhou University, Changzhou 213164, China;2.Nanjing Institute of Environmental Sciences, Ministry of Environmental Protection, Nanjing 210042, China)., 2019,39(3):1226~1236

    Humic acid (HA) of submerged plantwas studied by parallel factor analysis method, combined with UV absorption spectroscopy, three-dimensional fluorescence spectroscopy and Fourier transform infrared spectroscopy. The change of HA in low, medium and high nutrient sediments revealed the mechanism of the effects of different nutrient sediments on the decomposing of submerged plants. The results showed that the higher was the nutrient level of the sediment, the faster was the decomposing of the foxtail algae (<0.05), releasing more dissolved organic carbon (DOC), dissolved total nitrogrn (DTN), dissolved total phosphorus (DTP) and humus; The degree of nutrient of the sediment was positively correlated with the hydrophobicity, molecular complexity of and the molecular weight (<0.05); HA of different nutrient sediments were identified by fluorescence containing one kind of protein component C2 and two kinds of fulvic acid components C1, C3, while fulvic acid-like components and protein-like components had similar component characteristics under different decomposition conditions; HA extracted from different nutrient sediments analyzed by infrared spectra was similar at different times, indicating that HA extracted at different decomposition conditions and times contains similar functional groups, and the extracted HA from the foxtail algae rot high nutrient sediment group contained more aromatic substances and organic phosphorus. The higher was the nutrient level of the sediment, the more beneficial was to the enrichment and sedimentation of phosphorus. The chemical structure of humic acid components in the decomposition ofby spectral analysis was systematically analyzed. The results can provide a theoretical reference for the ecological management and restoration of lake water environment, and for in-depth understanding of the influence mechanism of different nutrient sediments on the decomposing of submerged plants.

    parallel factor analysis;three-dimensional fluorescence spectroscopy;infrared spectroscopy;sediments;decomposition;humic acid

    X171

    A

    1000-6923(2019)03-1226-11

    巴翠翠(1994-),安徽六安人,常州大學(xué)碩士研究生,主要研究方向?yàn)樗w污染與生態(tài)修復(fù).

    2018-08-07

    國(guó)家重大水體污染治理專(zhuān)項(xiàng)(2017ZX07202006);江蘇省太湖水環(huán)境綜合治理科研課題(TH2016402);中央級(jí)公益性科研院所基本科研業(yè)務(wù)專(zhuān)項(xiàng)(GYZX170104)

    *責(zé)任作者, 研究員, zym7127@163.com

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