CD44和LRP表達(dá)與前列腺腺癌發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)的研究

馬鳳艷 黃炳臣 黃小英

【摘要】目的探討CD44與肺耐藥蛋白（LRP）在前列腺腺癌（PAC）中的表達(dá)及其關(guān)聯(lián)性。方法采用免疫組織化學(xué)SP法檢測(cè)CD44和LRP在92例PAC和40例良性前列腺增生（BPH）組織中的表達(dá)，通過Spearmans等級(jí)相關(guān)及Logistic回歸模型分析CD44和LRP表達(dá)的關(guān)聯(lián)性及其對(duì)PAC發(fā)病的影響。結(jié)果CD44和LRP在PAC腫瘤組織中的陽(yáng)性率分別為46.7%和42.4%，高于BPH組的陽(yáng)性率（分別為20.0%和22.5%），差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<005）;CD44和LRP表達(dá)增加PAC發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)，對(duì)應(yīng)風(fēng)險(xiǎn)值分別為3.51和2.54;PAC腫瘤組織中CD44與LRP表達(dá)呈正相關(guān)（r=0.39，P<0.01）。結(jié)論CD44與LRP的異常表達(dá)可能與PAC的發(fā)生密切相關(guān)，二者在PAC的發(fā)病過程中可能發(fā)揮重要作用。

【關(guān)鍵詞】前列腺腺癌;CD44;LRP;發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)

中圖分類號(hào)：R737.25 文獻(xiàn)標(biāo)志碼：ADOI：10.3969/j.issn.1003-1383.2019.01.003

前列腺腺癌（Prostatic adenocarcinoma，PAC）是中老年男性常見的惡性腫瘤之一[1]。在中國(guó)，盡管前列腺癌發(fā)病率遠(yuǎn)低于西方國(guó)家，但近年來呈明顯上升趨勢(shì)，且大多數(shù)患者初診時(shí)已經(jīng)發(fā)生轉(zhuǎn)移，預(yù)后較差[2]。近年來，有研究顯示CD44和LRP的異常表達(dá)涉及一些腫瘤如腸癌等的發(fā)生和發(fā)展[3～4]，但在PAC中，它們之間是否存在關(guān)聯(lián)未見報(bào)道。本研究采用免疫組化二步法對(duì)PAC以及良性前列腺增生（Benign prostatic hyperplasia，BPH）患者的組織學(xué)標(biāo)本中CD44和肺耐藥蛋白（Lung resistance-related protein，LRP）的表達(dá)進(jìn)行分析，以期探討PAC中CD44和LRP的關(guān)聯(lián)性及其對(duì)PAC發(fā)病的影響。

1材料與方法

1.1材料

收集2016年1月～2017年9月間在右江民族醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院病理科確診的帶有石蠟包埋組織標(biāo)本的PAC患者92例，平均年齡（77.0±4.1）歲。所有患者術(shù)前均未行化療、放療及內(nèi)分泌治療。此外，收集來自同一時(shí)期同一醫(yī)院的帶有石蠟包埋組織標(biāo)本的BPH患者40例作為對(duì)照，平均年齡（76.0±5.7）歲。獲取所有研究對(duì)象的適量石蠟包埋組織標(biāo)本用于CD44和LRP的表達(dá)分析。

1.2試劑和方法

所有組織均經(jīng)4%中性甲醛固定，石蠟包埋。鼠抗人CD44單克隆抗體、鼠抗人LRP單克隆抗體、SP即用型免疫組化試劑盒及DAB顯色劑均購(gòu)自福州邁新公司。石蠟組織切片厚4 μm，按照說明書的操作規(guī)范，使用免疫組化SP法對(duì)所有標(biāo)本進(jìn)行CD44和LRP的染色分析。本研究中，我們采用PBS緩沖液代替一抗作陰性對(duì)照，用已知陽(yáng)性的大腸癌組織作陽(yáng)性對(duì)照。

1.3統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

應(yīng)用SPSS 17.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，計(jì)數(shù)資料采用百分率進(jìn)行統(tǒng)計(jì)描述，統(tǒng)計(jì)推斷用χ2檢驗(yàn)來分析，相關(guān)性分析采用Spearmans等級(jí)相關(guān)。檢驗(yàn)水準(zhǔn)：α=0.05，雙側(cè)檢驗(yàn)。

2結(jié)果

2.1CD44和LRP表達(dá)對(duì)PAC發(fā)病的影響

CD44在BPH和PAC組織中的陽(yáng)性率分別為20.0%（8/40）和46.7%（43/92），BPH組織中CD44的陽(yáng)性率明顯低于PAC組織，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<005）;而LRP在BPH和PAC組織中的陽(yáng)性率分別為225%（9/40）和42.3%（39/92），BPH組織中LRP的陽(yáng)性率明顯低于PAC組織，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。Logistic回歸分析結(jié)果顯示CD44和LRP表達(dá)可增加PAC發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)，對(duì)應(yīng)風(fēng)險(xiǎn)值分別為351（1.46～8.43）和2.54（1.08～5.93）。見表1。

2.2PAC腫瘤組織中CD44和LRP表達(dá)的相關(guān)性

92例PAC組織中CD44和LRP均為陽(yáng)性27例，均為陰性37例，CD44陽(yáng)性而LRP陰性16例，LRP陽(yáng)性而CD44陰性12例，配對(duì)計(jì)數(shù)資料分析表明CD44和LRP表達(dá)的相關(guān)性呈正相關(guān)（Spearmans等級(jí)相關(guān)，r=0.39，P<0.01）。見表2。

3討論

PAC是一種好發(fā)于老年男性患者的常見惡性腫瘤，該腫瘤起源于前列腺分泌性上皮細(xì)胞[5～6]。在全世界范圍內(nèi)，PAC發(fā)病率居所有惡性腫瘤的第2位，死亡率居第5位[7]。通過BPH 和癌組織學(xué)分析發(fā)現(xiàn)無(wú)癥狀前列腺炎癥見于多數(shù)成年男性，約80%的患者前列腺組織存在不同程度的炎癥因子浸潤(rùn)[8]。大量的病例-對(duì)照研究證明，炎癥的持續(xù)存在將增加PAC的發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)[9～10]。在慢性炎癥微環(huán)境下，由于炎癥因子的不斷浸潤(rùn)或致癌物的反復(fù)刺激將導(dǎo)致前列腺上皮細(xì)胞的損傷，并發(fā)生體細(xì)胞基因組的改變[11]，增加基因的不穩(wěn)定性，進(jìn)而導(dǎo)致更多的基因突變，如MYC基因的過表達(dá)，抑癌基因NKX3.1、PTEN、CDKN1B的沉默等[12]，促使前列腺細(xì)胞轉(zhuǎn)化為高級(jí)別的PIN或早期癌變，而AR突變、ERG-TMPRSS2融合等又將驅(qū)動(dòng)PAC的進(jìn)展[13]，從分子水平研究前列腺癌發(fā)病機(jī)制對(duì)其防治均有重大意義[14～15]。

人類CD44基因位于11號(hào)染色體短臂上，長(zhǎng)約50 kb，包括20個(gè)高度保守的外顯子[16]。研究表明CD44異常表達(dá)可早于ras、p53等基因的異常，所以CD44的變異可能與ras基因激活有關(guān)，是癌形成的一個(gè)重要因素。有一項(xiàng)對(duì)結(jié)腸腫瘤p53突變和CD44蛋白的研究，在結(jié)腸腫瘤各期中觀察到有統(tǒng)計(jì)顯著性的p53、CD44V6表達(dá)增強(qiáng)的趨勢(shì)，p53和CD44V6表達(dá)間有顯著相關(guān)性[17]。Louis等[18]實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示前列腺腺癌p53陽(yáng)性率為78.26%，且隨著癌細(xì)胞分化程度降低、臨床分期增高和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移，p53蛋白陽(yáng)性率愈來愈高，可見p53可能是PAC患者預(yù)后的標(biāo)志物之一。由此推斷，CD44可能通過影響p53突變來調(diào)控PAC的發(fā)生發(fā)展。

已有報(bào)道，LRP 在多種癌癥中高表達(dá)，可以作為一個(gè)新的潛在的癌癥預(yù)測(cè)標(biāo)志物。如在胃癌當(dāng)中，LRP在癌組織中高表達(dá)，且多因素分析發(fā)現(xiàn)，LRP的表達(dá)與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移，TNM分期以及生存預(yù)后相關(guān)[19];在前列腺癌中，LRP在癌組織中高表達(dá)，且與腫瘤轉(zhuǎn)移和血清前列腺特異性抗原水平呈正相關(guān)，但與患者的生存預(yù)后以及激素治療敏感性呈負(fù)相關(guān)[20]。Kluth等[21]對(duì)500例前列腺癌組織進(jìn)行研究，發(fā)現(xiàn)LRP1基因重排1例，說明LRP1基因突變可能與PAC易感性有關(guān)。亦有相關(guān)研究證實(shí)，LRP在PAC中呈高表達(dá)[22]。本研究結(jié)果提示CD44和LRP二者在PAC組織中顯著高表達(dá)，與既往研究一致;而且，我們還首次證實(shí)了CD44和LRP表達(dá)水平呈正相關(guān)。但本研究也存在局限性，由于未對(duì)上述患者進(jìn)行隨訪，故而不能驗(yàn)證CD44和LRP的表達(dá)能否預(yù)測(cè)前列腺癌預(yù)后。

綜上，在PAC組織中，CD44和LRP表達(dá)增加，且它們間具有正向相關(guān)作用，這種上調(diào)的CD44和LRP在前列腺腺癌的發(fā)生中起重要作用。值得注意的是當(dāng)前研究結(jié)果是基于相對(duì)較小樣本獲得，而且我們也沒有開展相關(guān)機(jī)制研究，因此，本研究結(jié)果需要通過更大樣本并結(jié)合體內(nèi)外實(shí)驗(yàn)加以確認(rèn)。

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（收稿日期：2018-11-09修回日期：2019-01-07）

（編輯：潘明志）