滅活疫苗在虹鱒魚養(yǎng)殖中應(yīng)用技術(shù)初探

文/劉園園

虹鱒魚屬鮭形目、鮭科魚類。目前是葫蘆島市冷水魚類養(yǎng)殖的主要品種。然而，隨著虹鱒魚養(yǎng)殖規(guī)模的不斷擴(kuò)大，養(yǎng)殖產(chǎn)量、產(chǎn)值的不斷提高，疫病問題也日漸突顯，特別是近年來，困擾筆者和養(yǎng)殖戶的傳染性造血器官壞死?。↖HN），給養(yǎng)殖戶造成極大的經(jīng)濟(jì)損失，嚴(yán)重的挫傷了養(yǎng)殖者的積極性，也給科技人員帶來了很大困擾。2017年4月結(jié)合遼寧省水產(chǎn)技術(shù)推廣總站實施的“虹鱒魚IHN疫苗的初步應(yīng)用”項目，葫蘆島市水產(chǎn)技術(shù)推廣站在本地區(qū)采用滅活疫苗分別進(jìn)行了注射滅活疫苗與無注射魚苗的對比、注射不同部位及運(yùn)用浸泡滅活疫苗的方法的對比試驗。本人有幸參與了項目全程，現(xiàn)將試驗情況總結(jié)如下：

一、材料與方法

（一）試驗時間與地點(diǎn)

本次試驗時間為：2017年4月27日～2018年4月30日；試驗地點(diǎn)選在建昌縣文臣冷水魚養(yǎng)殖專業(yè)合作社。

（二）試驗材料

1.接種疫苗、試驗物質(zhì)的準(zhǔn)備

此次虹鱒魚滅活疫苗是由遼寧出入境檢驗檢疫局技術(shù)中心動物檢驗科利用遼寧省本溪市虹鱒魚養(yǎng)殖場發(fā)病魚研制的油乳劑滅活疫苗。疫苗性狀為乳白色油狀液體，規(guī)格500mL；麻醉藥品為乙二醇苯醚（分析純AR）；注射器選擇一次性1mL獸醫(yī)用塑料注射器。另備有16號針頭、抄網(wǎng)、矮凳、魚桶、下水褲、手套、水質(zhì)監(jiān)測儀、酒精、棉簽、食鹽等。

2.接種虹鱒魚的選擇和暫養(yǎng)

本次接種疫苗的虹鱒魚為養(yǎng)成商品魚的魚種和親魚，虹鱒魚的選擇要求規(guī)格一致、健康。本試驗選擇的是25g/尾～30g/尾的虹鱒魚魚種。

3.注射前的準(zhǔn)備工作

（1）麻醉藥物的配制和魚體麻醉操作：將50g乙二醇苯醚加入200L清水進(jìn)行稀釋配制成麻醉液，然后將麻醉液放入魚桶中。將挑選后需要接種疫苗的虹鱒魚魚種放入盛有麻醉液的魚桶中進(jìn)行麻醉（圖1），以魚種在魚桶中不游動為宜，然后開始疫苗接種。

（2）暫養(yǎng)網(wǎng)箱制作與安裝：暫養(yǎng)網(wǎng)箱采用的是聚乙烯網(wǎng)布，網(wǎng)目為0.1cm?？蚣転椤疤铩币?guī)格為1.2m×0.8m×0.3m，材料采用Φ10螺紋鋼進(jìn)行焊接，在“田”字形框架中間用螺紋鋼焊接，以增加框架強(qiáng)度。整體網(wǎng)用直徑為3mm的聚乙烯繩與框架固定。暫養(yǎng)網(wǎng)箱一般安裝在要注射疫苗的魚池中，要求網(wǎng)箱柱腳距池底8cm為宜，便于水體流通。

（3）注射部位及劑量的選擇：本次疫苗注射部位為背鰭基部或腹鰭基部注射（圖2）；注射劑量是0.1mL/尾。

（三）試驗方法

1.注射法接種疫苗效果試驗

圖1 工作人員對虹鱒魚苗進(jìn)行麻醉

圖2 工作人員對虹鱒魚苗進(jìn)行滅活疫苗注射

本次試驗所用對象為虹鱒魚和金鱒魚，規(guī)格為25g/尾～30g/尾，體長為10cm～13cm。試驗魚種共60尾，30尾虹鱒魚和30尾金鱒魚。先將選擇好的虹鱒魚和金鱒魚放入事先配制好的麻醉液中進(jìn)行麻醉。待所有魚種麻醉好后，以每尾魚0.1mL的劑量進(jìn)行疫苗注射接種。30尾虹鱒魚進(jìn)行腹鰭基部注射，30尾金鱒魚進(jìn)行背鰭基部注射。具體操作方法是用手托住麻醉好的魚，針頭與注射部位成45°夾角，注射深度0.3cm～0.5cm，注射劑量是0.1mL/尾。然后迅速將注射疫苗后的魚放入暫養(yǎng)網(wǎng)箱中，并監(jiān)測和記錄接種疫苗后虹鱒魚的相關(guān)數(shù)據(jù)（表1）。同樣，對照組所用的網(wǎng)箱、魚體的規(guī)格及養(yǎng)殖條件和管理水平要與試驗組相同，并做好相關(guān)數(shù)據(jù)的監(jiān)測和記錄，以便于對比。

從表1可以看出：注射疫苗的虹鱒魚的成活率遠(yuǎn)遠(yuǎn)大于無注射疫苗的虹鱒魚；背鰭基部部位注射的虹鱒魚成活率大于腹鰭基部注射的虹鱒魚。

2.浸泡法接種滅活疫苗效果試驗

浸泡滅活疫苗試驗是水溫在13℃～18℃時進(jìn)行的。浸泡苗種規(guī)格為25g/尾～30g/尾，體長在10cm～13cm虹鱒魚苗。方法是先按0.5%疫苗濃度進(jìn)行配置于魚桶中，并加入充氧設(shè)備，然后將需接種的虹鱒魚放入盛有疫苗的魚桶中進(jìn)行浸浴接種；一般每次接種時間2h為宜。本試驗接種虹鱒魚數(shù)量為300尾（試驗數(shù)據(jù)見表2）。

表1 注射滅活疫苗對虹鱒魚預(yù)防效果的試驗統(tǒng)計

表2 浸泡滅活疫苗對虹鱒魚預(yù)防效果的試驗統(tǒng)計

從表2可以看出浸泡法接種該疫苗，免疫效果也很好，成活率可達(dá)90%。

二、結(jié)果與討論

利用傳染性造血器官壞死病毒滅活疫苗進(jìn)行預(yù)防接種在本地區(qū)虹鱒魚養(yǎng)殖中尚屬首次，從試驗效果來看，不管是注射法還是浸泡法接種，免疫效果都很好，接種后虹鱒魚的成活率都達(dá)到90%以上。試驗證明接種虹鱒魚IHN疫苗是預(yù)防虹鱒魚傳染性造血器官壞死病毒病很好的方法。

從試驗結(jié)果來看，注射法和浸泡法接種該疫苗，在虹鱒魚成活率上還有不同，注射法接種成活率要高于浸泡法接種，分析其原因主要是注射法接種疫苗直接注射到魚體肌肉中，疫苗的免疫效果直接也較快，再就是魚體獲得的疫苗量準(zhǔn)確。浸泡法接種是通過魚體的滲透作用原理使疫苗進(jìn)入魚體的，受水溫、疫苗濃度、每次接種魚的數(shù)量等原因影響，所以接種效果就差些。但注射法接種在技術(shù)操作中專業(yè)性較強(qiáng)，如果操作不熟練或操作不當(dāng)對魚體的損傷較大，相反浸泡法接種操作相對簡單些、實用些，對魚體傷害也較小。建議在實際操作過程中要根據(jù)具體情況，選擇適合的方法，要具體分析，因人而異。

本次接種疫苗的虹鱒魚規(guī)格為25g/尾～30g/尾，接種劑量是項目專家組的建議的用量即注射劑量是0.1mL/尾、浸浴濃度為0.5%。但在實際生產(chǎn)中，虹鱒魚的規(guī)格不可能都是25g/尾～30g/尾，可能大也可能小，因此接種劑量也要不同，具體采取什么濃度需要在今后的試驗中繼續(xù)總結(jié)。

眾所周知，疫苗的制作一般是使用當(dāng)?shù)夭◆~的病毒，再對該地區(qū)的魚進(jìn)行接種免疫是最科學(xué)，效果也是最好的。本次試驗的疫苗是取自本溪市患病的魚體，由遼寧出入境檢驗檢疫局研制的虹鱒魚IHN滅活疫苗。而本地區(qū)本批虹鱒魚的發(fā)眼卵來自本溪，試驗證明，本次試驗的免疫效果也很好。如若采用本地區(qū)的虹鱒魚發(fā)病的魚制作疫苗效果可能會更好。