卵巢癌骨轉(zhuǎn)移患者的血清β-CTx、N-MID和β-Crosslaps表達(dá)水平及臨床意義

陳雪，李秋菊，楊利麗，李俊峰

吉林大學(xué)第二醫(yī)院1骨科，2檢驗(yàn)科，長春 1300410

卵巢癌是一種臨床上較為常見的女性生殖系統(tǒng)惡性腫瘤，近年來，隨著女性生活、工作壓力的增加以及生活方式的改變，其發(fā)病率呈逐年增加趨勢[1]。卵巢癌作為一種癥狀不典型的惡性腫瘤，難以早期發(fā)現(xiàn)，容易發(fā)生轉(zhuǎn)移，其中骨轉(zhuǎn)移較為常見，尤其是晚期卵巢癌患者，部分患者會合并不同程度的骨轉(zhuǎn)移[2]。卵巢癌在發(fā)生骨轉(zhuǎn)移后可引起嚴(yán)重的骨痛以及病理性骨折等不良事件，對患者的生活質(zhì)量和生命安全造成嚴(yán)重威脅[3]。因此，如何對卵巢癌骨轉(zhuǎn)移患者進(jìn)行早期診斷及合理治療具有重要的臨床意義。目前，影像技術(shù)是最為常用的惡性腫瘤骨轉(zhuǎn)移的診斷方法，但該方法很難在短時(shí)間內(nèi)反映病情變化。隨著實(shí)驗(yàn)室技術(shù)的不斷發(fā)展與完善，血清學(xué)指標(biāo)因具有檢測方便、微創(chuàng)、重復(fù)性高以及安全性好等優(yōu)勢，獲得臨床醫(yī)師的廣泛關(guān)注[4]。研究表明，骨代謝標(biāo)志物能夠及時(shí)、動(dòng)態(tài)地反映正在進(jìn)行的骨重建狀況，在惡性腫瘤骨轉(zhuǎn)移的早期診治中具有重要作用[5]。本研究對卵巢癌骨轉(zhuǎn)移患者的血清骨代謝標(biāo)志物β-I型膠原羧基端肽（β typeIcollagen carboxyl terminal peptide，β-CTx）、N-端骨鈣素（N-terminal osteocalcin，N-MID）及β-膠原特殊序列（special sequence of β collagen，β-Crosslaps）水平進(jìn)行了檢測，并分析其臨床意義，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 對象與方法

1.1 研究對象

選取2013年11月至2016年12月吉林大學(xué)第二醫(yī)院收治的64例卵巢癌骨轉(zhuǎn)移患者為卵巢癌骨轉(zhuǎn)移組。納入標(biāo)準(zhǔn)：①經(jīng)病理學(xué)診斷確診為卵巢癌；②經(jīng)計(jì)算機(jī)體層攝影（CT）或磁共振成像（MRI）檢查證實(shí)發(fā)生骨轉(zhuǎn)移；③具有骨痛癥狀。排除標(biāo)準(zhǔn)：①合并嚴(yán)重的心、肝、腎功能不全的患者；②合并血液病及嚴(yán)重感染的患者；③合并骨質(zhì)疏松癥、骨關(guān)節(jié)炎的患者。64例卵巢癌骨轉(zhuǎn)移患者的年齡為28～63歲，平均（48.26±8.31）歲；組織學(xué)分型：漿液性43例，黏液性10例，內(nèi)膜樣腺癌6例，透明細(xì)胞癌5例；組織學(xué)分級：高分化41例，中分化23例；病理分期：Ic期14例，Ⅱ期50例；有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移31例，無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移33例。選取同期64例未發(fā)生骨轉(zhuǎn)移的卵巢癌患者為卵巢癌無骨轉(zhuǎn)移組。納入標(biāo)準(zhǔn)：①經(jīng)病理學(xué)診斷確診為卵巢癌；②經(jīng)CT或MRI檢查證實(shí)未發(fā)生骨轉(zhuǎn)移；③無骨痛癥狀。排除標(biāo)準(zhǔn)：①合并嚴(yán)重的心、肝、腎功能不全的患者；②合并血液病以及嚴(yán)重感染的患者。64例卵巢癌無骨轉(zhuǎn)移患者的年齡為26～65歲，平均（48.94±10.21）歲；組織學(xué)分型：漿液性40例，黏液性15例，內(nèi)膜樣腺癌6例，透明細(xì)胞癌3例；組織學(xué)分級：高分化45例，中分化19例；病理分期：Ic期10例，Ⅱ期54例；有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移35例，無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移29例。卵巢癌骨轉(zhuǎn)移組和卵巢癌無骨轉(zhuǎn)移組患者的年齡、組織學(xué)分型、組織學(xué)分級、病理分期及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況比較，差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），具有可比性。另選取64例健康體檢女性作為健康組，年齡26～65歲，平均（47.21±9.34）歲。3組研究對象的年齡比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），具有可比性。根據(jù)骨轉(zhuǎn)移病灶數(shù)目將卵巢癌骨轉(zhuǎn)移患者分為4組，骨轉(zhuǎn)移病灶≤6個(gè)為A組，6個(gè)＜骨轉(zhuǎn)移病灶≤20個(gè)為B組，20個(gè)＜骨轉(zhuǎn)移病灶≤30個(gè)為C組，骨轉(zhuǎn)移病灶＞30個(gè)為D組。本研究經(jīng)吉林大學(xué)第二醫(yī)院倫理委員會審批通過，所有研究對象均對本研究知情并簽署知情同意書。

1.2 研究方法

血清β-CTx、N-MID及β-Crosslaps水平檢測：卵巢癌患者于入院第2天，健康體檢者于體檢當(dāng)日，空腹抽取靜脈血5 ml，離心后-80℃保存，采用全自動(dòng)免疫分析儀（購自法國bioMerieux公司）測定血清β-CTx、N-MID及β-Crosslaps水平。

治療方法：卵巢癌骨轉(zhuǎn)移患者及無骨轉(zhuǎn)移患者根據(jù)病情給予化療、癌痛治療或雙磷酸鹽骨保護(hù)治療。

1.3 隨訪

對卵巢癌骨轉(zhuǎn)移患者隨訪1年，根據(jù)死亡情況分為死亡組和未死亡組，比較兩組患者入院時(shí)的血清β-CTx、N-MID及β-Crosslaps水平。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS 20.0軟件對-數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（±s）表示，多組間比較采用單因素方差分析，多組間兩兩比較采用LSD-t檢驗(yàn)，兩組間比較采用獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料以例數(shù)和率（%）表示，組間比較采用χ2檢驗(yàn)。以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 3組研究對象血清β-CTx、N-MID及β-Crosslaps水平的比較

卵巢癌骨轉(zhuǎn)移組、卵巢癌無骨轉(zhuǎn)移組和健康組患者的血清β-CTx、N-MID及β-Crosslaps水平比較，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）。卵巢癌骨轉(zhuǎn)移組患者的血清β-CTx、N-MID及β-Crosslaps水平均高于卵巢癌無骨轉(zhuǎn)移組和健康組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；卵巢癌無骨轉(zhuǎn)移組和健康組的血清β-CTx、N-MID及β-Crosslaps水平比較，差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。（表1）

表1 3組研究對象-血清β-CTx、N-MID及β-Crosslaps水平的比較（ng/ml，±s）

表1 3組研究對象-血清β-CTx、N-MID及β-Crosslaps水平的比較（ng/ml，±s）

注：*與卵巢癌骨轉(zhuǎn)移組比較，P＜0.05

組別 β-CTx N-MID β-Crosslaps

2.2 不同骨轉(zhuǎn)移病灶數(shù)目的卵巢癌骨轉(zhuǎn)移患者血清β-CTx、N-MID及β-Crosslaps水平的比較

A組、B組、C組、D組卵巢癌骨轉(zhuǎn)移患者的血清β-CTx、N-MID及β-Crosslaps水平比較，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）；隨著骨轉(zhuǎn)移病灶數(shù)目的增加，患者的血清β-CTx、N-MID及β-Crosslaps水平均逐漸升高，4組間兩兩比較，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。（表2）

表2 不同骨轉(zhuǎn)移病灶數(shù)目的卵巢癌骨轉(zhuǎn)移患者血清-β-CTx、N-MID及β-Crosslaps水平的比較（ng/ml，±s）

表2 不同骨轉(zhuǎn)移病灶數(shù)目的卵巢癌骨轉(zhuǎn)移患者血清-β-CTx、N-MID及β-Crosslaps水平的比較（ng/ml，±s）

注：a與A組比較，P＜0.05；b與B組比較，P＜0.05，c與C組比較，P＜0.05

組別 β-CTx N-MID β-Crosslaps

2.3 不同預(yù)后情況的卵巢癌骨轉(zhuǎn)移患者入院時(shí)血清β-CTx、N-MID及β-Crosslaps水平的比較

隨訪1年，64例卵巢癌骨轉(zhuǎn)移患者中，13例（20.31%）患者死亡，51例（79.69%）患者未死亡。未死亡組患者入院時(shí)的血清β-CTx、N-MID及β-Crosslaps水平均明顯低于死亡組患者，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）。（表3）

表3 不同預(yù)后情況的卵巢癌骨轉(zhuǎn)移患者入院時(shí)血清-β-CTx、N-MID及β-Crosslaps水平的比較（ng/ml，±s）

表3 不同預(yù)后情況的卵巢癌骨轉(zhuǎn)移患者入院時(shí)血清-β-CTx、N-MID及β-Crosslaps水平的比較（ng/ml，±s）

組別 β-CTx N-MID β-Crosslaps

3 討論

卵巢癌轉(zhuǎn)移至骨組織由多種因素共同導(dǎo)致，尤其是腫瘤細(xì)胞與骨組織之間的相互作用，對骨轉(zhuǎn)移的發(fā)生起到了主導(dǎo)作用[6-7]。有研究認(rèn)為，卵巢癌骨轉(zhuǎn)移的發(fā)生以及對骨組織的損傷可能是由于卵巢癌細(xì)胞轉(zhuǎn)移至骨組織后導(dǎo)致機(jī)體產(chǎn)生部分可溶性介質(zhì)，這些介質(zhì)釋放后激活了破骨細(xì)胞和成骨細(xì)胞，破壞了骨代謝的微環(huán)境，導(dǎo)致頑固性骨痛、病理性骨折等[8]。因此，卵巢癌骨轉(zhuǎn)移的發(fā)生可能會導(dǎo)致骨代謝標(biāo)志物水平的改變，并且這種改變早于影像學(xué)上的形態(tài)改變。本研究對卵巢癌骨轉(zhuǎn)移患者的主要骨代謝標(biāo)志物水平進(jìn)行分析，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，卵巢癌骨轉(zhuǎn)移組患者的血清β-CTx、N-MID及β-Crosslaps水平均高于卵巢癌無骨轉(zhuǎn)移組和健康組（P＜0.05），但卵巢癌無骨轉(zhuǎn)移組和健康組的血清β-CTx、N-MID及β-Crosslaps水平比較，差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）；隨著骨轉(zhuǎn)移病灶數(shù)目的增加，卵巢癌骨轉(zhuǎn)移患者的血清β-CTx、N-MID及β-Crosslaps水平逐漸升高（P＜0.05），提示血清β-CTx、N-MID及β-Crosslaps可以在一定程度上預(yù)測卵巢癌骨轉(zhuǎn)移的發(fā)生，并可對骨轉(zhuǎn)移病情進(jìn)行評價(jià)。β-CTx是一種骨吸收標(biāo)志物，在破骨細(xì)胞介導(dǎo)的骨吸收過程中，I型膠原羧基端肽（collagen carboxyl terminal peptide，CTx）被釋放到血液中，并降解成為β-CTx，因此，β-CTx可以有效反映骨吸收的代謝情況[9-10]。β-Crosslaps也是I型膠原蛋白的羧基末端降解產(chǎn)物，由于成熟的I型膠原易β異構(gòu)化，在骨重吸收期間α和β-Crosslaps形成交聯(lián)，可以反映骨重吸收情況[11-12]。N-MID是存在于骨基質(zhì)中的一種重要的特異性非膠原蛋白，是骨鈣素被外周血中蛋白酶水解后的N端片段，其含量與各種骨代謝紊亂中的骨轉(zhuǎn)換率有密切的關(guān)系，可以有效反映骨生成情況[13]。骨生成指標(biāo)與骨吸收指標(biāo)同時(shí)升高，說明骨轉(zhuǎn)移時(shí)骨形成與骨吸收同時(shí)存在，破骨細(xì)胞不斷清除舊骨，成骨細(xì)胞形成類骨質(zhì)并進(jìn)行礦化的兩個(gè)過程在時(shí)間和空間上緊密耦聯(lián)并發(fā)生在同一重建單位中。當(dāng)惡性腫瘤骨轉(zhuǎn)移時(shí)，由于腫瘤細(xì)胞的生長與侵襲，導(dǎo)致這一平衡被破壞，各種與骨轉(zhuǎn)換相關(guān)的調(diào)節(jié)因子發(fā)生變化，骨代謝指標(biāo)也發(fā)生變化[14-15]。因此，血清β-CTx、NMID及β-Crosslaps三種標(biāo)志物對卵巢癌骨轉(zhuǎn)移的診斷和病情評估具有重要意義。本研究對不同預(yù)后情況的卵巢癌骨轉(zhuǎn)移患者的血清β-CTx、N-MID及β-Crosslaps水平進(jìn)行分析，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，1年后未死亡組患者入院時(shí)的血清β-CTx、N-MID及β-Crosslaps水平均明顯低于死亡組患者（P＜0.01），提示卵巢癌骨轉(zhuǎn)移患者的血清β-CTx、N-MID及β-Crosslaps水平可在一定程度上預(yù)測患者預(yù)后。綜上所述，卵巢癌發(fā)生骨轉(zhuǎn)移時(shí)，血清骨代謝標(biāo)志物β-CTx、N-MID及β-Crosslaps水平均發(fā)生改變，其對疾病的診斷、病情評估及預(yù)后預(yù)測具有重要價(jià)值。