血清心肌肌鈣蛋白T、氨基末端B型利鈉肽前體、尿酸水平與慢性心力衰竭患者心功能的相關(guān)性研究

胡榮權(quán)，蘇偉青，吳阿蘭，楊銳能

慢性心力衰竭是慢性原發(fā)性心肌病變和心室長期負荷過重所致［1］。因絕大多數(shù)慢性心力衰竭患者伴有各器官臟器淤血表現(xiàn)，故又稱為充血性心力衰竭，最常見的發(fā)病因素有原發(fā)性或繼發(fā)性擴張型心肌病變、冠心病、肺源性心臟病、高血壓心臟病、甲狀腺功能亢進癥、重度貧血等［2］。40歲人群中慢性心力衰竭的患病率約為1%，年齡每增加10歲，患病率增加1倍；＞70歲人群中其患病率達10%，且多數(shù)患者表現(xiàn)為無癥狀心力衰竭［3］。左心室射血分數(shù)（LVEF）為心力衰竭的有效指標，當(dāng)LVEF≤30%時提示左心室功能障礙，其中僅1/3的患者表現(xiàn)為有癥狀，2/3患者無癥狀［4］。有癥狀的慢性心力衰竭患者早期機體可通過代償機制使心室排血量滿足活動時血供和休息時組織代謝的需要，但在后期機體代償機制不能維持足夠的心排血量，即功能失代償期［5］，該階段患者病死率和致殘率較高，故早期發(fā)現(xiàn)、早期救治患者預(yù)后可觀。心肌肌鈣蛋白T（cTnT）、氨基末端B型利鈉肽前體（NT-proBNP）、尿酸（UA）均參與了慢性心力衰竭的發(fā)生發(fā)展，但目前三者與慢性心力衰竭患者心功能的相關(guān)性研究報道較少。本研究旨在分析血清cTnT、NT-proBNP、UA水平與慢性心力衰竭患者心功能的相關(guān)性，現(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2015年1月—2018年1月廉江市人民醫(yī)院心血管內(nèi)科收治的慢性心力衰竭患者48例，其中男25例，女23例；平均年齡（50.4±12.6）歲；紐約心臟病協(xié)會（NYHA）分級：Ⅱ級16例，Ⅲ級16例，Ⅳ級16例。納入標準：二維超聲心動圖及多普勒超聲顯示LVEF≤40%，左心室收縮末期容量指數(shù)≤45 ml/m2。排除標準：合并先天性心臟病、急性心力衰竭、不穩(wěn)定型心絞痛、多發(fā)性心肌炎或皮肌炎、肝腎功能不全者。本研究經(jīng)廉江市人民醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理委員會審核批準。所有患者簽署知情同意書。

1.2 觀察指標

1.2.1 一般資料 包括性別、年齡、原發(fā)病等，其中原發(fā)病包括擴張型心肌病、冠心病、肺源性心臟病、高血壓心臟病、甲狀腺功能亢進癥等。

1.2.2 血清cTnT、NT-proBNP、UA水平 患者于空腹12 h后次日清晨采集靜脈血5 ml，置于含枸櫞酸鈉抗凝劑15 ml真空無菌管中，室溫靜置20 min，4 ℃ 2 000 r/min離心20 min（離心半徑50 cm），留取上層清液，將其分裝至新的EP管中，置于-80 ℃冰箱中保存待測。采用酶聯(lián)免疫吸附試驗檢測血清cTnT、NT-proBNP、UA水平，具體步驟如下：（1）按照試劑盒說明書要求準備實驗中所需試劑；（2）取100 μl待測樣品或者cTnT、NT-proBNP、UA標準品加入已經(jīng)包被好的含cTnT、NT-proBNP、UA抗體的96酶標板中，放在恒溫37 ℃培養(yǎng)箱孵育45 min；（3）洗滌：用配置好的洗滌液洗板5次，并在濾紙上拍干，加入第一抗體工作液，輕輕震蕩搖勻，室溫孵育20 min。再次洗板，方法同前。加入第二抗體工作液，輕輕震蕩混勻，室溫孵育20 min。再次洗板后拍干，加入顯色底物并輕輕震蕩混勻，37 ℃環(huán)境下孵育15 min，此時顯色底物與cTnT、NT-proBNP、UA抗體耦聯(lián)的酶結(jié)合顯色藍色，顏色越深則含量越高。15 min后加入終止液，輕輕震蕩混勻，此時反應(yīng)體系由藍色迅速變?yōu)辄S色，采用酶標儀檢測OD值，檢測波長為540 nm。利用標準品濃度及對應(yīng)的OD值繪制回歸曲線，得出回歸方程，當(dāng)系數(shù)＞0.92時認為實驗結(jié)果可靠。根據(jù)標準曲線和所得的OD值計算各組血清cTnT、NT-proBNP、UA水平。

1.3 統(tǒng)計學(xué)方法 采用SPSS 17.0統(tǒng)計軟件進行數(shù)據(jù)分析，計數(shù)資料分析采用χ2檢驗；計量資料以（x± s）表示，多組間比較采用單因素方差分析，組間兩兩比較采用q檢驗；血清cTnT、NT-proBNP、UA水平與慢性心力衰竭患者NYHA分級的相關(guān)性分析采用多元線性回歸分析。以P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 不同NYHA分級患者一般資料及血清cTnT、NT-proBNP、UA水平比較 不同NYHA分級患者性別、年齡、原發(fā)病比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）。不同NYHA分級患者血清cTnT、NT-proBNP、UA水平比較，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）；NYHA分級Ⅳ級患者血清cTnT、NT-proBNP、UA水平高于NYHA分級Ⅱ、Ⅲ級患者，NYHA分級Ⅲ級患者血清cTnT、NT-proBNP、UA水平高于NYHA分級Ⅱ級患者，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05，見表1）。

2.2 多元線性回歸分析 以NYHA分級為因變量（賦值：Ⅱ級=1，Ⅲ級=2，Ⅳ級=3），以血清cTnT、NT-proBNP、UA為自變量進行多元線性回歸分析，結(jié)果顯示，血清cTnT、NT-proBNP、UA水平與慢性心力衰竭患者NYHA分級呈正相關(guān)（P＜0.05，見表2）。

表2 血清cTnT、NT-proBNP、UA水平與慢性心力衰竭患者NYHA分級的多元線性回歸分析Table 2 Mutivariate Linear regression analysis on correlations of serum levels of cTnT，NT-proBNP and UA with NYHA classification in patients with chronic heart failure

3 討論

慢性心力衰竭是各種原因心肌損傷患者在多種內(nèi)源性神經(jīng)內(nèi)分泌和細胞因子作用下引起心肌結(jié)構(gòu)和功能改變，最終導(dǎo)致心臟泵血功能低下的一種復(fù)雜臨床綜合征，因此，反映心肌細胞損傷的一些標志物也可反映心力衰竭嚴重程度。

心力衰竭患者常伴有肺淤血、肺水腫、體循環(huán)淤血和水鈉潴留等臨床癥狀，最終會導(dǎo)致全心衰竭，因此早期診斷慢性心力衰竭有助于患者早期治療及康復(fù)［6］。目前診斷慢性心力衰竭的主要方法有以下3種［7］，（1）X線檢查：可根據(jù)心臟擴大程度和動態(tài)改變間接反映心臟功能狀態(tài)，為心臟病的病因診斷提供重要參考。（2）超聲心動圖檢查：可更準確地提供各心腔大小變化及心瓣膜結(jié)構(gòu)及功能情況，評估心臟的收縮功能和舒張功能，其中多普勒超聲檢查是判斷舒張功能的常用方法。（3）放射性核素檢查：有助于判斷心室腔的大小，還可通過記錄放射活性-時間曲線計算左心室最大充盈速率，以反映心臟舒張功能。慢性心力衰竭其他檢查方法還包括心-肺吸氧運動試驗、有創(chuàng)性血流動力學(xué)檢查等［8］。既往研究發(fā)現(xiàn)，血清cTnT、NT-proBNP水平與急性冠脈綜合征患者血清心型脂肪酸結(jié)合蛋白（hearttype fatty acid binding protein，H-FABP）水平呈正相關(guān)［6］，而UA可作為預(yù)測心功能指標之一［9］。

急性心肌梗死后心肌細胞損傷，通透性發(fā)生變化，心肌細胞內(nèi)的大分子物質(zhì)流出并進入血液循環(huán)，其主要損傷標志物為肌紅蛋白、肌鈣蛋白、肌酸激酶同工酶［10］。心肌細胞中富含游離肌鈣蛋白T和結(jié)合肌鈣蛋白T，且當(dāng)心力衰竭發(fā)生后心肌細胞迅速、持久地釋放肌鈣蛋白T進入血液，而血清中cTnT升高可達3周，是心臟特異性抗原，與骨骼肌肌鈣蛋白T只有1%左右的交叉反應(yīng)率，特異度較高［11］。有研究顯示，高水平肌鈣蛋白T與心肌缺血嚴重程度密切相關(guān)，肌鈣蛋白T水平越高、持續(xù)時間越長的急性心肌梗死患者心功能越差［12］。本研究結(jié)果顯示，NYHA分級Ⅳ級患者血清cTnT水平高于NYHA分級Ⅱ、Ⅲ級患者，NYHA分級Ⅲ級患者血清cTnT水平高于NYHA分級Ⅱ級患者，進一步行多元線性回歸分析顯示，血清cTnT水平與慢性心力衰竭患者NYHA分級呈正相關(guān)，與上述研究結(jié)果一致。

近年來研究證實，NT-proBNP可反映急性心肌梗死后心功能狀態(tài)，其診斷急性心力衰竭的靈敏度和特異度均較高［13］，且與慢性心力衰竭患者預(yù)后有關(guān)［14-15］。本研究結(jié)果顯示，NYHA分級Ⅳ級患者NT-proBNP水平高于NYHA分級Ⅱ、Ⅲ級患者，NYHA分級Ⅲ級患者NT-proBNP水平高于NYHA分級Ⅱ級患者，行多元線性回歸分析結(jié)果顯示，NT-proBNP水平與慢性心力衰竭患者NYHA分級呈正相關(guān)，提示隨著NYHA分級增大，慢性心力衰竭患者血清NT-proBNP水平升高，與曾雪等［16］研究結(jié)果一致。

UA是人體嘌呤代謝的終產(chǎn)物，在慢性溶血性貧血、橫紋肌溶解、慢性心力衰竭患者中水平較高，且與慢性心力衰竭的發(fā)生發(fā)展有著密切關(guān)系［17］，UA水平與心功能分級呈正相關(guān)［16］。本研究結(jié)果顯示，NYHA分級Ⅳ級患者UA水平高于NYHA分級Ⅱ、Ⅲ級患者，NYHA分級Ⅲ級患者UA水平高于NYHA分級Ⅱ級患者，進一步行多元線性回歸分析結(jié)果顯示，血清UA水平與慢性心力衰竭患者NYHA分級呈正相關(guān)，提示隨著NYHA分級增大，慢性心力衰竭患者血清UA水平升高，分析其原因可能為心肌細胞損傷后對缺血、缺氧高度敏感，代謝尤其是嘌呤類代謝加快，UA釋放入血增多［18］。

綜上所述，慢性心力衰竭患者血清cTnT、NT-proBNP、UA水平隨著NYHA分級增大而升高，三者均與慢性心力衰竭患者心功能呈正相關(guān)；但本研究樣本量較小、觀察指標較少，結(jié)果結(jié)論仍需擴大樣本量、檢測多時間指標以進一步研究證實。

作者貢獻：胡榮權(quán)進行試驗設(shè)計與實施、資料收集整理、撰寫論文并對文章負責(zé)；蘇偉青、吳阿蘭進行試驗實施、評估、資料收集；楊銳能進行質(zhì)量控制及審校。

本文無利益沖突。