日糧鈣水平對空懷期云南半細(xì)毛羊生長性能及血清生化指標(biāo)和繁殖相關(guān)激素的影響

李衛(wèi)娟，薛 白，李銀江，王思宇，歐陽依娜，趙遠(yuǎn)崇，高 新，洪瓊花*

（1.云南省畜牧獸醫(yī)科學(xué)院，云南昆明 650224；2.四川農(nóng)業(yè)大學(xué)動物營養(yǎng)研究所，四川成都 611130；3.巧家縣畜牧工作站，云南邵通 654600）

空懷期母羊的營養(yǎng)狀況對于其繁殖性能有重要影響，因此合理配制日糧及補飼是提高空懷期母羊生產(chǎn)性能的有效措施。鈣是動物的宏量且必須營養(yǎng)素之一。目前，有關(guān)反芻動物鈣的需要量參數(shù)主要依據(jù)美國國家標(biāo)準(zhǔn)NRC（2007）和我國《肉羊飼養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)》（NY/T816-2004）。在NRC（2007）中，綿羊每天對鈣的維持需要量為0.016 g/kgBW[1]。一些學(xué)者發(fā)現(xiàn)，NRC推薦的營養(yǎng)水平并不符合我國肉羊的營養(yǎng)需要[2-3]，如不同品種的羔羊、育成羊、妊娠母羊和哺乳母羊[4-9]，而空懷期綿羊的鈣需要量研究未見報道。

云南半細(xì)毛羊是以云南本地山谷型藏羊與細(xì)毛羊雜交后代為母本，引入羅姆尼羊、林肯羊公羊，經(jīng)過育成雜交、橫交固定、自群繁育培育十余年而成的毛肉兼用型半細(xì)毛羊新品種。目前尚無可借鑒的全套營養(yǎng)需要量標(biāo)準(zhǔn)及參數(shù)。為更好地發(fā)展和推廣這一毛肉兼用型綿羊新品種，有必要開展特定品種不同生長、生理階段的各種營養(yǎng)素需要量的系統(tǒng)研究。目前，國內(nèi)反芻動物空懷期營養(yǎng)研究可參考的文獻(xiàn)很少，云南半細(xì)毛羊更處于空白狀態(tài)。本試驗旨在探討日糧鈣水平對空懷期云南半細(xì)毛羊生長性能、血液生化指標(biāo)和繁殖相關(guān)激素水平的影響，為空懷期云南半細(xì)毛羊精準(zhǔn)營養(yǎng)的系統(tǒng)研究提供基礎(chǔ)性資料。

1 材料與方法

1.1 試驗動物 試驗在昆明易興恒畜牧科技有限責(zé)任公司進(jìn)行，選用50只體況良好、體重相近、38月齡的經(jīng)產(chǎn)2胎空懷期云南半細(xì)毛羊，隨機分為5組，每組10只，每只羊單欄飼養(yǎng)。試驗羊購自昭通市巧家縣賴石山種畜場，所有試驗羊預(yù)試前進(jìn)行藥物驅(qū)蟲。

1.2 試驗日糧 試驗日糧按無外源鈣補充及分別補充碳酸鈣0.10%、0.45%、0.88%、1.30%設(shè)計，日糧鈣水平實測值分別為0.40%、0.45%、0.53%、0.66%、0.85%，其他營養(yǎng)成分保持一致。日糧組成及營養(yǎng)成分見表1。

表1 試驗日糧組成及養(yǎng)分含量（風(fēng)干基礎(chǔ)）

1.3 飼養(yǎng)管理及生長性能測定 試驗前將欄舍打掃干凈、消毒，并檢查飼槽和水槽有無異常。所有試驗羊單欄飼喂，羊進(jìn)入羊舍后進(jìn)行藥物驅(qū)蟲處理。5 d后稱重分組，然后進(jìn)入為期14 d的預(yù)試期。在預(yù)試期，每天08:00、17:00各喂料1次，自由飲水，每天記錄每只試驗羊的采食量，根據(jù)前1 d的采食量調(diào)整第2天飼喂量，確保飼槽內(nèi)有10%左右的剩料。預(yù)試期結(jié)束，試驗羊稱重后進(jìn)入30 d正試期。正試期每天的飼養(yǎng)管理同預(yù)試期，30 d正試期結(jié)束后稱重。

耗料增重比（F/G ）=干物質(zhì)采食量（DMI）/平均日增重（ADG）

1.4 血樣采集及指標(biāo)測定 母羊在空懷期的營養(yǎng)儲備是為了再次配種，本試驗于試驗結(jié)束前3 d測定相關(guān)繁殖激素水平，以觀察再次配種前母羊的激素狀況。每組試驗羊隨機挑選5只于晨飼前頸靜脈無菌采血，共采血3 d，每只試驗羊每天采血20 mL，分裝于10 mL離心管中，靜置30 min后于3 000 r/min離心20 min，獲得血清，將血清儲存于-20 冰柜中待測。

促卵泡素（FSH）、雌二醇（E2）、促黃體素（LH）、孕酮（P4）的測定采用南京建成賽浩科技有限公司的試劑盒和酶標(biāo)儀（Molecular Devices公司，Versa Max型）按照試劑盒說明書測定；堿性磷酸酶（ALP）、甲狀旁腺素（PTH）測定采用上海浩本生物科技有限公司生產(chǎn)的試劑盒檢測；鈣、磷測定依據(jù)張麗英的《飼料分析及飼料質(zhì)量檢測技術(shù)》（第三版）[10]。

1.5 統(tǒng)計分析 試驗數(shù)據(jù)采用Excel軟件進(jìn)行初步處理后用SPSS 19.0軟件進(jìn)行單因素方差分析（One-Way-ANOVA），用LSD法進(jìn)行多重比較，結(jié)果以平均值±標(biāo)準(zhǔn)差表示，P＞0.05表示差異不顯著，P＜0.05表示差異顯著，P＜0.01表示差異極顯著。

2 結(jié) 果

2.1 日糧鈣水平對空懷期云南半細(xì)毛羊生產(chǎn)性能的影響由表2可以看出，各組試驗羊初始體重（IBW）和結(jié)束體重（FBW）差異不顯著（P＞0.05），平均凈增重（ABG）以0.40%、0.53%鈣水平組較高，0.66%鈣水平組最低（P＞0.05）。0.53%鈣水平組ADG最高（P＞0.05）；0.45%鈣水平組DMI最高，0.66%組最低（P＜0.05）；0.66%鈣水平組的F/G與0.45%鈣水平組差異不顯著（P＞0.05），但顯著高于其他組（P＜0.05），其他組間差異不顯著（P＞0.05）。0.66%、0.85%鈣水平組的增重、采食量、耗料增重比表現(xiàn)不一；0.40%、0.45%、0.53%鈣水平組的生長性能表現(xiàn)較一致。

2.2 日糧鈣水平對空懷期云南半細(xì)毛羊血清生化指標(biāo)的影響 由表3可見，各組間血清ALP、PHT、鈣、磷差異不顯著（P＞0.05）。5組血清磷在1.20～1.71 mmol/L，除0.85%鈣水平組稍低于正常范圍外，其他組均在正常范圍（1.29～5.16 mmol/L）。

2.3 日糧鈣水平對空懷期云南半細(xì)毛羊血清中相關(guān)繁殖激素的影響 由表4可見，不同鈣水平組的FSH有一定程度的波動，0.53%鈣水平組血清中FSH顯著高于0.45%鈣水平組（P＜0.05），其他組間差異不顯著（P＞0.05）；0.40%鈣水平組E2極顯著高于0.45%、0.53%鈣水平組（P＜0.01），顯著高于0.85%鈣水平組（P＜0.05）；0.40%、0.85%鈣水平組LH顯著高于0.53%鈣水平組（P＜0.05）；各組間血清P4濃度沒有顯著差異（P＞0.05）。

表2 日糧鈣水平對空懷期云南半細(xì)毛羊生產(chǎn)性能的影響

表3 日糧鈣水平對空懷期云南半細(xì)毛羊血清生化指標(biāo)的影響

表4 日糧鈣水平對空懷期云南半細(xì)毛羊血清繁殖激素的影響

3 討 論

3.1 日糧不同鈣水平對空懷期云南半細(xì)毛羊生長性能未見明顯影響 一般情況下，在配種前增強日糧的營養(yǎng)水平可使空懷期母羊迅速恢復(fù)體況以達(dá)到配種要求。研究表明，理想的體況能促進(jìn)發(fā)情排卵，有利于提高母羊受胎率、羔羊初生重和繁殖成活率[11-12]。生產(chǎn)實踐中發(fā)現(xiàn)，云南半細(xì)毛羊在哺乳期2個月內(nèi)的日增重持續(xù)表現(xiàn)為負(fù)增長，導(dǎo)致母羊哺乳結(jié)束后往往達(dá)不到配種所需體重，再發(fā)情所需時間較長。從云南半細(xì)毛羊的育種過程中發(fā)現(xiàn)，哺乳結(jié)束后母羊體重一般較配種所需的理想體重低2～3 kg。因此，如何在斷奶后以較短的時間恢復(fù)適宜體況是空懷期母羊日糧營養(yǎng)研究的重要目標(biāo)。本試驗結(jié)果表明，0.40%、0.45%、0.53%、0.66%、0.85%鈣水平組試驗羊的凈增重分別為2.31、1.77、2.44、1.47、1.99 kg，以0.40%鈣水平組和0.53%鈣水平組增重情況理想，且都達(dá)到了配種的理想體重。趙智力[4]研究認(rèn)為，高鈣、高磷日糧水平能夠顯著提高白絨山羊的日增重和飼料轉(zhuǎn)換率；朱新民等[7]研究發(fā)現(xiàn)，隨著日糧鈣水平的增加，波爾山羊日增重有上升的趨勢；Kegley等[13]認(rèn)為，適宜的高鈣、磷水平日糧能夠提高動物的生長性能。本研究與以上研究結(jié)論不完全一致，可能與以上試驗未針對空懷期母羊和不同母羊品種有關(guān)。已有的試驗結(jié)果多與鈣、磷同步水平有關(guān)，本試驗固定磷水平，僅鈣水平呈線性上升，所體現(xiàn)的鈣磷比分別為1.93、2.04、2.56、3.16、4.33，而0.40%、0.45%、0.53%鈣水平組均具有較適宜的鈣磷比。綜上，適宜的日糧鈣磷比較單因子高鈣水平對空懷期母羊體況恢復(fù)更有利。

3.2 日糧單因子鈣水平對空懷期云南半細(xì)毛羊血清生化指標(biāo)無顯著影響 血清鈣、磷、PTH含量和ALP活性常被研究者用于估計動物體內(nèi)鈣、磷營養(yǎng)狀況以及評定需要量的血液學(xué)參數(shù)[5]。盧宋藩[15]報道，綿羊血清鈣正常值為2.5～3.0 mmol/L，無機磷正常值為1.29～5.16 mmol/L。而盧德勛[16]認(rèn)為，血清鈣、磷作為牛羊營養(yǎng)缺乏指標(biāo)時，其臨界水平分別為2.00、1.45 mmol/L。朱新民等[7]研究表明，日糧鈣、磷水平對生長期波雜山羊血清磷濃度無顯著影響。Oberbauer等[17]研究發(fā)現(xiàn)，綿羊血清鈣濃度隨著日糧鈣水平的增加而升高，且均在正常值范圍，而日糧鈣水平對血清磷無顯著影響。本試驗結(jié)果表明，5組試驗羊血清鈣濃度為2.02～2.64 mmol/L，血清磷濃度為1.20～1.71 mmol/L。除0.85%鈣水平組血清磷濃度低于前人研究的1.29 mmol/L[16]或1.45 mmol/L[15]的臨界水平外，其他組均達(dá)到正常水平；而血清鈣雖高于2.00 mmol/L的最低臨界水平，但隨著日糧鈣水平的增加，血清鈣濃度從2.64 mmol/L反向降低到2.02 mmol/L，與前人研究日糧鈣與血清鈣同步提高的結(jié)論背離。

初漢平[18]研究得出，日糧不同鈣水平對泌乳奶牛血漿ALP活性影響顯著，隨著日糧鈣水平的提高血漿ALP活性逐漸升高。本試驗中隨著日糧鈣水平的增加，ALP的活性呈現(xiàn)不規(guī)律的變化，且差異不顯著。 堿性磷酸酶的活性與成骨細(xì)胞密切相關(guān)，成骨細(xì)胞可以產(chǎn)生堿性磷酸酶，堿性磷酸酶可反映骨骼的形成狀況。本試驗的研究對象均為經(jīng)產(chǎn)2胎空懷期云南半細(xì)毛羊，其骨骼的發(fā)育已完成，同時可能與本試驗鈣磷比有關(guān)，隨著日糧鈣水平的升高，鈣磷比逐漸增大，超過了正常范圍，導(dǎo)致ALP的活性呈現(xiàn)不規(guī)律變化。

PTH是由甲狀旁腺分泌的一種調(diào)節(jié)骨骼代謝的激素。PTH作用于骨骼組織中，抑制破骨細(xì)胞向成骨細(xì)胞轉(zhuǎn)化，促進(jìn)間質(zhì)細(xì)胞向破骨細(xì)胞轉(zhuǎn)化，加強骨質(zhì)的分解，動員出骨骼中的鈣游離到血液中，通過此功能維持和調(diào)節(jié)血液中鈣水平的平衡。血液中鈣水平的濃度反作用于PTH的活性，血液中PTH增加表明血鈣濃度不足，PTH下降則血鈣濃度過高[19]。本試驗中5個處理組的PTH和血清鈣處于較穩(wěn)定水平，未見受日糧鈣水平升高的影響。

綜上所述，在本試驗中，日糧鈣水平對血清鈣、磷和ALP、PHT水平均無顯著影響。血清鈣隨日糧鈣水平增加而呈下降趨勢，可能與本試驗日糧鈣磷比失衡有關(guān)，需進(jìn)一步研究。

3.3 日糧鈣水平對空懷期云南半細(xì)毛羊血清中相關(guān)繁殖激素的影響不顯著 鈣是母畜生長發(fā)育和維持正常生理機能必需的礦物元素之一，在其繁殖過程中也起著重要作用[20]。母羊日糧中鈣缺乏或過剩都會對母羊繁殖性能產(chǎn)生不同影響，具體會表現(xiàn)在繁殖期的激素水平上。鈣離子參與黃體和P4的合成，也是卵母細(xì)胞成熟所需的物質(zhì)[21]。血液中雌激素和P4的濃度調(diào)控下丘腦前葉對FSH和LH的分泌，從而控制母羊發(fā)情和排卵[22]。本試驗中，低鈣日糧組（0.40%鈣水平）E2濃度最高，隨著日糧鈣水平的增加，E2濃度逐漸降低；而各組P4處于較高水平，說明血液中P4濃度不受日糧鈣水平影響，而是與繁殖期有關(guān)；血清中FSH和LH濃度呈現(xiàn)不規(guī)律的變化，說明這2種激素水平在臨配種前也不受日糧鈣水平的影響。本試驗中，0.40%鈣水平組母羊的4種繁殖激素水平較高，以E2水平最為明顯，低鈣日糧的激素水平表現(xiàn)同步于生長性能，可能與低鈣日糧母羊獲得最大體況恢復(fù)有關(guān)，因此體現(xiàn)出較好的配種前準(zhǔn)備。

4 結(jié) 論

本研究在固定日糧磷水平為0.21%水平條件下，日糧鈣水平為0.53%組日糧組的空懷期云南半細(xì)毛羊表現(xiàn)出較好的生長性能、臨配種前生理生化和激素水平的準(zhǔn)備；隨著日糧鈣水平增加，日糧鈣磷比加強，未見對生長性能、生化指標(biāo)和激素水平有明顯正向的增強作用，可能與試驗日糧鈣磷比失衡有關(guān)。