元寶楓葉生物活性物質(zhì)研究進(jìn)展

白 雪，李小英*，邱宗海

(1.西南林業(yè)大學(xué)生態(tài)與水土保持學(xué)院,云南昆明 650224；2.昆明海之靈生物科技開(kāi)發(fā)有限公司,云南昆明 650224)

元寶楓(AcertruncatumBunge)是槭樹(shù)科(Aceraceae)槭樹(shù)屬植物，因翅果形似中國(guó)古代金錠“元寶”而得名。20世紀(jì)70年代，原西北農(nóng)學(xué)院王性炎教授首次用元寶楓種子榨取食用油以緩解我國(guó)食用油緊張的壓力，直到2005年，王性炎教授發(fā)現(xiàn)元寶楓籽中含有高達(dá)5.2%的神經(jīng)酸，開(kāi)創(chuàng)了腦科學(xué)史上的新紀(jì)元，經(jīng)過(guò)更加深入的研究后發(fā)現(xiàn)元寶楓葉及種皮中也含有大量有益的生物活性物質(zhì)[1]。在王性炎教授科研成果的推動(dòng)下，大量學(xué)者從不同方面對(duì)元寶楓進(jìn)行了研究，如栽培育種、元寶楓各部分生物活性物質(zhì)的含量及提取工藝等。隨著元寶楓產(chǎn)業(yè)的不斷發(fā)展，對(duì)元寶楓的開(kāi)發(fā)應(yīng)用研究不僅僅再停留于元寶楓籽油，許多研究者對(duì)元寶楓葉活性物質(zhì)的成分進(jìn)行了研究，發(fā)現(xiàn)元寶楓葉中含有多種生物活性成分，如黃酮類(lèi)、綠原酸、多糖、維生素、氨基酸、超氧化物歧化酶(SOD)等，其中綠原酸、黃酮含量較高[2-4]，且大量的研究為掌握元寶楓葉有效成分的動(dòng)態(tài)含量規(guī)律、元寶楓葉有效活性物質(zhì)的提取及應(yīng)用開(kāi)發(fā)提供了依據(jù)，為元寶楓產(chǎn)業(yè)中能夠準(zhǔn)確高效獲取和高效開(kāi)發(fā)應(yīng)用元寶楓葉中的有效成分提供指導(dǎo)。

1 不同研究條件下元寶楓葉生物活性物質(zhì)含量

1.1干旱脅迫目前，元寶楓在干旱脅迫下，其葉的生物活性物質(zhì)研究以葉的植物保護(hù)酶和滲透調(diào)節(jié)物質(zhì)的動(dòng)態(tài)研究為主。水分是限制植物生長(zhǎng)的重要因子，幾乎所有的植物對(duì)水分脅迫都有一定的耐受性，當(dāng)植物受到干旱脅迫時(shí)，會(huì)引起植物保護(hù)酶和滲透調(diào)節(jié)物質(zhì)活性發(fā)生改變，使植物細(xì)胞中活性氧產(chǎn)生與清除之間失去平衡，引發(fā)膜脂過(guò)氧化作用，嚴(yán)重時(shí)可導(dǎo)致植物死亡[5]。胡景江等[6]采用盆栽控水法和聚乙二醇6000(PEG6000)處理法研究了1年生和7年生元寶楓在水分脅迫條件下元寶楓膜脂過(guò)氧化作用的變化與抗旱性的關(guān)系，結(jié)果發(fā)現(xiàn)隨脅迫時(shí)間的延長(zhǎng)和脅迫程度的加深，丙二醛(MDA)含量和質(zhì)膜相對(duì)透性逐漸增大，但在輕度和中度水分脅迫條件下增幅不顯著。SOD和過(guò)氧化氫酶(CAT)活性隨脅迫程度加深緩慢降低，在同一脅迫程度下一定的時(shí)間范圍內(nèi)，2種酶活性均呈增高趨勢(shì)，并逐漸接近正常水平，這與元寶楓對(duì)干旱的適應(yīng)性有關(guān)，說(shuō)明元寶楓在缺水條件下，體內(nèi)的保護(hù)酶仍能保持較高的活性水平。徐蓮珍等[7]在西北農(nóng)林科技大學(xué)苗圃基地上，對(duì)1年生元寶楓苗木在干旱條件下葉中滲透調(diào)節(jié)物質(zhì)與保護(hù)酶活性的影響進(jìn)行了研究，結(jié)果顯示元寶楓葉中滲透調(diào)節(jié)物質(zhì)脯氨酸(Pro)和可溶性糖含量增加，而可溶性蛋白含量降低；SOD、過(guò)氧化物酶(POD)、CAT活性隨干旱強(qiáng)度增大開(kāi)始增加，而在重度脅迫時(shí)，酶活性下降，但干旱脅迫時(shí)的酶活性始終高于正常水分時(shí)?？灼G菊等[8]對(duì)山東農(nóng)業(yè)大學(xué)新校區(qū)林學(xué)實(shí)驗(yàn)站的元寶楓苗木進(jìn)行了干旱處理，結(jié)果顯示元寶楓凈光合速率均呈下降趨勢(shì)；Pro含量在整個(gè)脅迫期間顯著增大，中度干旱脅迫對(duì)幼苗的生長(zhǎng)沒(méi)有顯著抑制，各指標(biāo)反應(yīng)良好；在土壤最大持水量為40%以上時(shí)，元寶楓生長(zhǎng)情況較好，總的來(lái)說(shuō)，元寶楓具有一定的抗旱性，短期的干旱處理可以提高元寶楓體內(nèi)保護(hù)酶的活性，但長(zhǎng)時(shí)間的重度干旱脅迫對(duì)元寶楓生長(zhǎng)不利。

元寶楓葉中保護(hù)酶SOD、CAT和POD以及可溶性糖等活性物質(zhì)在干旱脅迫下仍能維持較高的活性水平，這是元寶楓耐旱的根本原因，可見(jiàn)適度的干旱處理可提高元寶楓葉中生物活性物質(zhì)的含量，同時(shí)為元寶楓葉生物活性物質(zhì)的大量獲取提供了更多的可能。

1.2月份、季節(jié)變化元寶楓葉中的生物活性成分在不同的生長(zhǎng)月份和不同的生長(zhǎng)季節(jié)會(huì)產(chǎn)生動(dòng)態(tài)變化，通過(guò)對(duì)元寶楓葉中生物活性物質(zhì)的動(dòng)態(tài)變化研究，以確定含量最高的月份或季節(jié)，為高效開(kāi)發(fā)和利用元寶楓葉提供科學(xué)指導(dǎo)。樊艷平等[9]用方差分析和多重比較的方法，研究了山西省農(nóng)業(yè)科學(xué)院果樹(shù)研究所5年生元寶楓葉內(nèi)黃酮、綠原酸含量及有關(guān)成分隨月份的變化規(guī)律，結(jié)果表明元寶楓葉內(nèi)黃酮含量最高為8月，含量為5.86%，綠原酸含量最高為6月，含量為3.62%，SOD酶活性最高為8月，葉綠素含量最高為6月，可溶性糖含量最高為9月，不同月份SOD活性、葉綠素、可溶性糖含量差異顯著。也有學(xué)者對(duì)元寶楓葉中多酚含量進(jìn)行了研究[10]，結(jié)果顯示4月嫩葉和11月落葉中的多酚含量較高，是良好的抗氧化劑資源。樊媛潔等[11]對(duì)北京陶然亭公園元寶楓葉中有效成分含量的動(dòng)態(tài)變化和對(duì)脂肪酸合酶(FAS)的抑制作用進(jìn)行了研究，結(jié)果顯示不同月份的元寶楓葉中總多酚、黃酮和綠原酸含量不同；多酚類(lèi)物質(zhì)含量最高為7月，葉中黃酮和綠原酸類(lèi)含量最高為11月；不同月葉提取物對(duì)FAS都有抑制作用，但抑制效果有較大差異，其中7月份葉提取物對(duì)FAS的抑制作用最大，明顯高于其他月份。龐曉莉等[12]對(duì)重慶璧山鳳湖仙山生態(tài)農(nóng)業(yè)開(kāi)發(fā)公司生產(chǎn)基地的元寶楓葉肉和葉柄主要生化成分的季節(jié)變化規(guī)律進(jìn)行了研究，結(jié)果顯示元寶楓葉中黃酮總量平均達(dá)4.15%，其中夏季葉中黃酮總量>秋季葉中黃酮總量>春季葉中黃酮總量，葉肉黃酮總量>葉柄黃酮總量；葉中綠原酸平均為1.58%，葉綠原酸含量季節(jié)差異不明顯，其中春季含量略高，葉肉綠原酸含量>葉柄綠原酸含量。

每月元寶楓葉中主要的生物活性物質(zhì)有所不同，說(shuō)明元寶楓葉活性物質(zhì)含量動(dòng)態(tài)研究還存在很大的空間；黃酮和綠原酸含量在相同月份動(dòng)態(tài)變化有差異，說(shuō)明元寶楓葉中生物活性物質(zhì)含量不僅僅受季節(jié)影響，還受到林齡、立地條件、生長(zhǎng)區(qū)等因素的影響。若不考慮其他因素，元寶楓葉最適宜在7月和8月采摘，也可根據(jù)葉片品質(zhì)，選擇性去除葉柄，從葉肉中獲得更高純度的綠原酸和黃酮。

1.3光照條件光是影響植物存活、生長(zhǎng)、繁殖與分布的重要環(huán)境因子[13]。農(nóng)業(yè)生產(chǎn)上常常通過(guò)調(diào)控光強(qiáng)來(lái)調(diào)節(jié)植物生長(zhǎng)，不同光強(qiáng)會(huì)使得植物體內(nèi)活性物質(zhì)的積累發(fā)生動(dòng)態(tài)變化。樊艷平等[14-15]對(duì)山西省農(nóng)業(yè)科學(xué)院果樹(shù)研究所2年生元寶楓進(jìn)行了不同光強(qiáng)及不同覆蓋處理，結(jié)果顯示元寶楓葉黃酮含量最高為60%自然光處理下，全自然光處理下綠原酸和VC含量可達(dá)最高，而元寶楓葉SOD活性含量最大值出現(xiàn)在45%自然光處理下；在白膜覆蓋下黃酮含量最高，在綠膜覆蓋下綠原酸和葉綠素含量最高，在紅膜覆蓋下SOD 活性含量最高，說(shuō)明不同的光強(qiáng)處理、不同覆蓋處理對(duì)元寶楓葉內(nèi)生物活性物質(zhì)含量的影響均極顯著。韓麗英[16]對(duì)山西省太谷縣城南的元寶楓做了相似的研究，在自然光下，用遮陽(yáng)網(wǎng)來(lái)設(shè)置不同光照強(qiáng)度，用彩色薄膜覆蓋控制光質(zhì)，對(duì)不同條件下元寶楓葉綠原酸含量進(jìn)行了測(cè)定，結(jié)果顯示在不同光質(zhì)條件下，綠原酸質(zhì)量濃度大小關(guān)系依次為自然光照條件、綠色薄膜覆蓋條件、紅色薄膜覆蓋條件、藍(lán)色薄膜覆蓋條件、黃色薄膜覆蓋條件，其中藍(lán)色與黃色薄膜覆蓋條件下綠原酸含量差異不顯著。在不同光強(qiáng)條件下，綠原酸質(zhì)量濃度大小關(guān)系依次為5%自然光條件、25%自然光條件、35%自然光條件、全自然光照強(qiáng)度。盡管光照強(qiáng)度對(duì)綠原酸質(zhì)量濃度有顯著影響，但并不是光照強(qiáng)度越大綠原酸質(zhì)量濃度越大。

總的來(lái)說(shuō)，不同膜覆蓋對(duì)綠原酸含量總體影響不大，不同研究中光照條件對(duì)綠原酸含量影響仍存在差異，總體來(lái)看，要從元寶楓葉中獲取較高含量綠原酸和SOD，可采取自然光、紅膜覆蓋處理。目前，光照條件對(duì)元寶楓葉中生物活性物質(zhì)的研究較少，應(yīng)當(dāng)充分利用光照條件可人工調(diào)控這一優(yōu)勢(shì)展開(kāi)更多研究。

2 元寶楓葉生物活性物質(zhì)的不同提取工藝

2.1綠原酸綠原酸具有抗炎、抗菌解毒等作用，綠原酸在植物界的分布十分廣泛，是許多中藥材以及水果蔬菜中的主要有效成分，但綠原酸含量高的植物不多，而元寶楓葉中綠原酸含量高達(dá)4%[17]。近年來(lái)關(guān)于綠原酸提取工藝也在不斷改進(jìn)，但關(guān)于元寶楓葉中綠原酸提取的最優(yōu)工藝未形成較為系統(tǒng)的研究。王樂(lè)等[18]對(duì)元寶楓中綠原酸的提取工藝做了簡(jiǎn)單介紹，綠原酸的提取方法主要有醇提、水提、超臨界萃取等。劉祥義等[19]利用超聲提取綠原酸的提取率為指標(biāo)，研究了在不同條件下對(duì)元寶楓葉中綠原酸提取的影響，以乙醇溶液為溶劑，利用超聲效應(yīng)提取元寶楓葉中綠原酸，對(duì)超聲強(qiáng)度、超聲作用時(shí)間、料液比等因素進(jìn)行研究，得到綠原酸提取的最優(yōu)條件為室溫下乙醇質(zhì)量分?jǐn)?shù)30%，超聲強(qiáng)度2檔，作用時(shí)間15 min，料液比(干燥葉用量∶60%乙醇用量)為1∶16，提取次數(shù)2次。胡青平等[20]采用乙醇提取法和酶提取法提取元寶楓葉中綠原酸，發(fā)現(xiàn)酶提取法的綠原酸提取率高于乙醇提取法，同時(shí)對(duì)酶法提取所選用酶的種類(lèi)進(jìn)行了篩選，并通過(guò)單因素試驗(yàn)、正交試驗(yàn)和方差分析得到了酶法提取綠原酸的最優(yōu)操作條件，結(jié)果表明選用纖維素酶提取元寶楓綠原酸效果較好，最佳操作參數(shù)為纖維素酶添加量0.015%、pH為4.5、酶解溫度50 ℃、酶解時(shí)間1.5 h。

超聲提取較常規(guī)提取具有可以節(jié)省溶劑、節(jié)省提取時(shí)間、提高提取率等優(yōu)點(diǎn)；酶提取法較乙醇提取法具有提取條件溫和、活性物質(zhì)不易失活、操作簡(jiǎn)單、無(wú)溶劑殘留等優(yōu)點(diǎn)。因此，對(duì)于不同生產(chǎn)要求，超聲提取法和酶法提取元寶楓葉綠原酸都是可行有效的。

2.2黃酮黃酮類(lèi)物質(zhì)有抑菌、抗腫瘤、抗氧化等生理活性[21]。馬登磊等[22]采用熒光分析法對(duì)陜西楊陵元寶楓葉(粉碎機(jī)磨碎并過(guò)40目篩)總黃酮含量進(jìn)行了測(cè)定，研究發(fā)現(xiàn)采用熒光分析法，通過(guò)改變激發(fā)光的波長(zhǎng)，能夠減小綠原酸對(duì)黃酮測(cè)定的干擾，可作為元寶楓葉總黃酮含量測(cè)定的參考方法。黃酮的提取受到料液比、乙醇濃度、時(shí)間、溫度因素的影響。王蘭珍等[23]以西北林學(xué)院東院試驗(yàn)地的元寶楓葉為材料，比較了熱水提取法、堿液提取法、70%乙醇提取法、60%丙酮提取法、甲醇提取法的黃酮提取率及提取物中總黃酮含量，黃酮提取率大小依次為60%丙酮提取法(19.92%)、70%乙醇提取法(12.20%)、堿液提取法(4.16%)、甲醇提取法(1.16%)、熱水提取法(0.72%)。曾里等[24]以四川元寶公司提供的元寶楓葉為原料，研究超聲波技術(shù)在元寶楓黃酮浸提中的應(yīng)用，通過(guò)改變?nèi)軇舛?、提取時(shí)間、料液比等條件對(duì)產(chǎn)品提取得率的影響進(jìn)行了探討，并比較了傳統(tǒng)浸提法、超聲波2種方法的提取，結(jié)果顯示超聲波法提取元寶楓黃酮是一種快速、高效、節(jié)能的新型提取方法，其中超聲波提取元寶楓黃酮的最佳浸提條件為溶劑使用60%乙醇，料液比為1∶25，超聲作用時(shí)間為30 min，浸提溫度為60 ℃，提取得率為6.26%。

元寶楓葉黃酮的提取技術(shù)已經(jīng)較為成熟，從提取率來(lái)看，采用70%乙醇提取法和60%丙酮提取法較為理想；若要減小測(cè)定過(guò)程中綠原酸對(duì)黃酮的干擾，可采用熒光分析法；要實(shí)現(xiàn)批量快速、高效提取元寶楓葉黃酮可采取超聲波技術(shù)提取法。

2.3多酚多酚類(lèi)物質(zhì)是具有獨(dú)特生理活性和藥理活性的天然產(chǎn)物,是元寶楓葉的主要活性物質(zhì)之一，具有抗腫瘤、抗氧化、抗病毒等作用。有研究表明，大多數(shù)多酚類(lèi)物質(zhì)能夠抑制FAS，抑制作用的大小與提取物中多酚類(lèi)物質(zhì)含量成正比[25]。目前，有大量研究為獲取更高純度的多酚提供了方法。葉燕彬等[26]采用大孔樹(shù)脂分離純化法，對(duì)純化元寶楓葉總多酚的工藝條件進(jìn)行了篩選評(píng)價(jià)，大孔樹(shù)脂分離純化法以元寶楓葉總多酚的靜態(tài)與動(dòng)態(tài)吸附量和解吸率為指標(biāo)篩選大孔樹(shù)脂，采用紫外分光光度法測(cè)定元寶楓葉總多酚含量，通過(guò)比較HPD100型、HPD-400型、AB-8型、 DA201型、D101型5種大孔樹(shù)脂對(duì)元寶楓葉多酚分離效果，發(fā)現(xiàn)HPD100型大孔樹(shù)脂分離效果較好，HPD100型大孔樹(shù)脂在篩選出的工藝條件下，樹(shù)脂的吸附-解吸附性能穩(wěn)定，且能較好地分離純化元寶楓葉總多酚，多酚含量純化前為28.55%，純化后為39.52%，大大提升了多酚的純度，純化后的多酚物質(zhì)提高了其對(duì)FAS的抑制能力。蔡霞等[27]以乙醇作為提取溶劑，探討了溶劑濃度、微波溫度、提取時(shí)間、料液比等因素對(duì)多酚提取的影響，并將超聲波法、磁力攪拌法和微波萃取法進(jìn)行比較，發(fā)現(xiàn)微波萃取法較其他2種方法有明顯優(yōu)勢(shì)，且確定了微波法從元寶楓葉中提取多酚的最佳工藝條件：乙醇濃度90%、物料顆粒120目、料液比(干燥葉用量∶90%乙醇用量)為1∶15、微波溫度160 ℃、提取時(shí)間5 min、輻射前常溫浸泡時(shí)間10 min，在此條件下，元寶楓葉中多酚的提取得率為93.08 g/kg。以上方法都可用于元寶楓葉多酚的提取，其中微波萃取法提取率高，且所需時(shí)間短，而采用大孔樹(shù)脂進(jìn)行元寶楓葉多酚分離純化則能夠提升多酚的純度，具有可多次重復(fù)使用、操作簡(jiǎn)單等特點(diǎn)，2種方法是否可以同時(shí)用于元寶楓葉多酚的提取以提高元寶楓葉多酚的利用率，值得進(jìn)一步研究。

2.4其他元寶楓葉中除了主要成分黃酮、綠原酸和多酚，還有許多其他活性物質(zhì)，如兒茶素、沒(méi)食子酸、SOD等，但都未形成較為系統(tǒng)的提取工藝。其中沒(méi)食子酸是鞣質(zhì)在稀酸和酶作用下的水解產(chǎn)物，具有抗突變、抗氧化、抗腫瘤和保肝消炎等作用；兒茶素具有抑制腫瘤、清除自由基、護(hù)膚美容等作用；SOD能夠有效地清除植物細(xì)胞內(nèi)的多種活性氧，維持植物正常的生命活動(dòng)，具有良好的抗氧化作用[28]。李珺等[29]用高效液相色譜法測(cè)定元寶楓葉中游離和水解沒(méi)食子酸的含量，測(cè)定結(jié)果為水解沒(méi)食子酸含量為1.456%，游離沒(méi)食子酸含量為0.045%，不同季節(jié)含量不同。吳松蘭等[30]用高效液相色譜法測(cè)定元寶楓中兒茶素類(lèi)物質(zhì)含量，表沒(méi)食子兒茶素(EGC)、表兒茶素(EC)和沒(méi)食子茶素沒(méi)食子酸酯(GCG)平均含量分別為38.9、28.9、28.4 mg/kg。以上研究均只是測(cè)定了元寶楓葉活性物質(zhì)含量，并未對(duì)其提取工藝進(jìn)行評(píng)價(jià)篩選。

3 元寶楓葉生物活性物質(zhì)的應(yīng)用開(kāi)發(fā)

3.1醫(yī)療方面近年來(lái)的研究表明元寶楓葉中提取出的生物活性物質(zhì)有極高的藥用價(jià)值。相關(guān)研究指出，F(xiàn)AS是治療肥胖及抗腫瘤的潛在靶點(diǎn)[25，31]。高麗芳等[32]對(duì)元寶楓葉提取物對(duì)營(yíng)養(yǎng)性肥胖大鼠的減肥作用及機(jī)制進(jìn)行了研究，利用營(yíng)養(yǎng)飼料制備大鼠肥胖模型，不同組別大鼠元寶楓葉提取物用量為10、30和100 mg/kg，試驗(yàn)結(jié)束后測(cè)定大鼠體重、體脂、食物消耗量、脂/體比及肝臟脂肪酸合酶活性指標(biāo)。試驗(yàn)持續(xù)31 d，結(jié)果與模型對(duì)照組比較，30 mg/kg 與100 mg/kg 組21 d后體重和試驗(yàn)終體重均顯著降低，即元寶楓葉提取物有減肥作用。鐘蓮梅等[33]對(duì)元寶楓葉中黃酮對(duì)脂多糖(LPS)誘導(dǎo)的小膠質(zhì)細(xì)胞株BV-2細(xì)胞炎性因子釋放的抑制作用進(jìn)行了研究，結(jié)果顯示元寶楓葉黃酮可通過(guò)調(diào)控LPS誘導(dǎo)的小膠質(zhì)細(xì)胞株BV-2細(xì)胞炎性因子釋放從而抑制小膠質(zhì)細(xì)胞激活，發(fā)揮抗神經(jīng)炎癥的作用。李麗華等[34]對(duì)云南元寶楓黃酮誘導(dǎo)個(gè)舊肺鱗癌細(xì)胞(YTMLC)凋亡誘導(dǎo)作用及相關(guān)基因表達(dá)的影響進(jìn)行了研究，結(jié)果顯示云南元寶楓黃酮可以抑制YTMLC體外生長(zhǎng)，引起腫瘤細(xì)胞壞死，誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡。元寶楓葉提取物是一種天然的藥物資源，可以作為減肥、治療神經(jīng)炎癥、防癌抗癌藥物進(jìn)行開(kāi)發(fā)應(yīng)用研究。

3.2食品方面元寶楓葉在食品方面的開(kāi)發(fā)主要是茶飲，有研究對(duì)元寶楓葉提取物的食用安全性進(jìn)行了評(píng)價(jià)，研究采用小鼠急性經(jīng)口毒性試驗(yàn)、遺傳毒性試驗(yàn)(小鼠骨髓細(xì)胞微核試驗(yàn)、小鼠精子畸變?cè)囼?yàn)和Ames試驗(yàn))及亞慢性毒性試驗(yàn)(90 d喂養(yǎng)試驗(yàn))，對(duì)元寶楓葉提取物的食用安全性進(jìn)行了評(píng)價(jià)，結(jié)果顯示元寶楓葉提取物在此試驗(yàn)條件下，未表現(xiàn)出有急性毒性和遺傳毒性；在1～2 g/kg 劑量范圍內(nèi)未顯示有亞慢性毒性[35]。夏輝[36]對(duì)元寶楓葉茶飲工藝進(jìn)行了研究，采用正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)對(duì)元寶楓葉茶飲工藝中影響因素進(jìn)行了篩選試驗(yàn)，結(jié)果顯示元寶楓葉汁最佳浸提條件為溫度70 ℃、時(shí)間40 min、葉水比1∶10、ZTC組分澄清劑用量40 g/kg、護(hù)色劑VC用量0.5 g/kg；飲料最佳配方為元寶楓葉汁稀釋l5倍、檸檬酸0.04%、白砂糖4%、蜂蜜0.5%、D-異抗壞血酸鈉0.01%；最佳殺菌方法為微波2 200 MHz、殺菌2 min；產(chǎn)品色澤為淡黃色，并制定了元寶楓葉茶飲料的質(zhì)量指標(biāo)。劉祥義等[37]對(duì)云南元寶楓茶營(yíng)養(yǎng)成分進(jìn)行了分析，結(jié)果顯示元寶楓茶粗蛋白含量為13.42%，氨基酸為117.9 g/kg 干葉，其中必需氨基酸占氨基酸總量的41.48%，單寧含量10.82%，SOD含量91.40 mg/kg，VE含量141.3 g/kg，總黃酮含量4.13%，綠原酸含量2.38%，礦質(zhì)元素含量豐富，其中Ca、K等尤為豐富，并具有十分典型的高鉀低鈉特點(diǎn)。由此可見(jiàn)，元寶楓茶飲具有較高的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值及醫(yī)療保健作用。

3.3飼料添加劑近年來(lái)，國(guó)內(nèi)外養(yǎng)殖領(lǐng)域?qū)τ梦⑸锇l(fā)酵植物飼料飼養(yǎng)家禽進(jìn)行了一些研究，這些研究成果使得家禽飼料中抗生素的使用明顯減少，也使得元寶楓葉的營(yíng)養(yǎng)成分在飼料添加方面得以被開(kāi)發(fā)利用，可在充分利用元寶楓葉優(yōu)良蛋白質(zhì)資源的同時(shí)，利用其中特有的黃酮、綠原酸和多糖等天然活性物質(zhì)，通過(guò)葉中有效活性成分作用提高家禽自身免疫能力，從而達(dá)到改善家禽肉類(lèi)品質(zhì)的目的。張旭暉等[38]研究了元寶楓葉發(fā)酵前后對(duì)育肥豬生產(chǎn)性能、肉品質(zhì)和腸道菌群的影響，結(jié)果顯示試驗(yàn)組與對(duì)照組相比，未發(fā)酵元寶楓葉組和發(fā)酵元寶楓葉組育肥豬的平均日增重和肌肉的紅度值顯著增加，肌肉的剪切力顯著降低；發(fā)酵元寶楓葉組的紅度值較未發(fā)酵元寶楓葉組顯著增加，與對(duì)照組和未發(fā)酵元寶楓葉組相比，發(fā)酵元寶楓葉組育肥豬直腸內(nèi)容物中大腸桿菌數(shù)量顯著降低，乳酸桿菌數(shù)量顯著增加，說(shuō)明飼糧中添加發(fā)酵元寶楓葉能在一定程度上改善育肥豬的生產(chǎn)性能、肉品質(zhì)和腸道健康。趙素君等[39]通過(guò)在肉雞飼料中添加元寶楓黃酮，確定添加不同水平(0、5、10、20、40 mg/kg)的元寶楓黃酮對(duì)肉雞免疫機(jī)能的影響，結(jié)果表明添加適當(dāng)劑量的元寶楓葉黃酮能夠極顯著提高胸腺指數(shù)、T淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化率、法氏囊指數(shù)等，但對(duì)脾臟的發(fā)育影響不大，對(duì)3周齡和5周齡血清新城疫抗體水平有顯著影響。這些結(jié)果表明，黃酮類(lèi)化合物能提高飼料轉(zhuǎn)化率，促進(jìn)畜禽生長(zhǎng)，提高畜禽機(jī)體免疫力，畜禽飼料中添加元寶楓黃酮可提高肉雞的細(xì)胞免疫和體液免疫功能。謝晶等[40]比較了元寶楓黃酮、大豆黃酮和金霉素對(duì)肉雞生長(zhǎng)性能和免疫機(jī)能的影響，研究發(fā)現(xiàn)元寶楓黃酮的T淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化率顯著高于對(duì)照組、金霉素組和大豆黃酮組，說(shuō)明元寶楓葉黃酮對(duì)肉雞細(xì)胞免疫的促進(jìn)作用明顯。

總的來(lái)說(shuō)，元寶楓葉作為飼料添加劑可以讓葉中生物活性物質(zhì)發(fā)揮出作用，適量添加能夠更有效地提高畜禽機(jī)體免疫力，而發(fā)酵元寶楓葉較未發(fā)酵元寶楓葉用于飼料添加更能夠發(fā)揮葉中生物活性物質(zhì)的作用。目前大多數(shù)研究?jī)H僅對(duì)元寶楓葉黃酮、葉整體作為飼料添加劑進(jìn)行了研究，對(duì)于活性物質(zhì)或葉添加量的研究還不明確，對(duì)于葉中其他生物活性物質(zhì)用做飼料添加還鮮見(jiàn)報(bào)道，由此可見(jiàn)，元寶楓葉作為飼料添加劑還需要更加深入的研究，也預(yù)示著元寶楓葉作為飼料添加劑還有著廣闊的市場(chǎng)。

4 小結(jié)與展望

綜合以上內(nèi)容，元寶楓葉在食品、醫(yī)療、飼料加工方面有著廣闊的應(yīng)用前景。目前對(duì)元寶楓葉的生物活性物質(zhì)研究還不深入，且許多研究結(jié)果也存在分歧，比如元寶楓葉中黃酮、綠原酸含量最高月份不同，有的表現(xiàn)為黃酮含量8月最高,綠原酸含量6月最高，有的則表現(xiàn)為綠原酸、黃酮含量均為11月最高，這些研究結(jié)果的差異說(shuō)明元寶楓葉生物活性物質(zhì)不僅受到水分條件、月份、季節(jié)及光照條件的影響，還受到林齡、立地條件、生長(zhǎng)區(qū)等因素的影響，不同的區(qū)域應(yīng)當(dāng)根據(jù)當(dāng)?shù)刈匀粭l件制定合理的生產(chǎn)方案，科學(xué)獲得元寶楓葉最佳收獲時(shí)機(jī)，從而保證生產(chǎn)需要?，F(xiàn)階段大多數(shù)研究主要圍繞葉中主要活性物質(zhì)綠原酸和黃酮展開(kāi)，對(duì)葉中其他有效活性成分開(kāi)發(fā)利用程度很小，而且葉中黃酮主要是應(yīng)用在醫(yī)療、飼料加工方面，并未獲得食品添加許可。目前，元寶楓產(chǎn)業(yè)與“精準(zhǔn)扶貧”緊密結(jié)合，在國(guó)家的大力扶持下，成為一項(xiàng)全新的生態(tài)產(chǎn)業(yè)扶貧工程，產(chǎn)生了良好的經(jīng)濟(jì)效益和社會(huì)影響，應(yīng)當(dāng)利用現(xiàn)有市場(chǎng)優(yōu)勢(shì)加大力度推廣元寶楓葉作為飼料添加劑，提高畜禽肉類(lèi)食用安全等級(jí)，同時(shí)注重元寶楓優(yōu)質(zhì)葉用品系篩選，從提高元寶楓葉質(zhì)量的角度展開(kāi)研究，更加高效地獲取元寶楓葉中有效活性物質(zhì)，為醫(yī)療、食品、保健品等方面提供更優(yōu)質(zhì)天然的原料。由此可見(jiàn)，元寶楓產(chǎn)業(yè)“栽培試驗(yàn)—選育優(yōu)種—產(chǎn)品開(kāi)發(fā)”的鏈?zhǔn)桨l(fā)展已是大勢(shì)所趨。