■龔澤修 李章奕 穆永勝 杜紅梅*
(1.婁底職業(yè)技術(shù)學院,湖南婁底 417000;2.湖南農(nóng)業(yè)大學商學院,湖南長沙 410128;3.湖南三和生物科技有限公司,湖南長沙 410125)
隨著現(xiàn)代養(yǎng)殖技術(shù)的高速發(fā)展,抗生素作為飼料添加劑已經(jīng)出現(xiàn)不同的弊端,動物生產(chǎn)過程中對不同細菌等產(chǎn)生的耐藥性、動物產(chǎn)品中的藥物殘留以及改變動物肉質(zhì)產(chǎn)品的質(zhì)量等問題的集中出現(xiàn),引起了人們的高度重視,無抗養(yǎng)殖逐漸成為健康養(yǎng)殖的代名詞。作為抗生素的替代產(chǎn)品,益生菌廣泛受到青睞[1]。益生菌是活菌,包括乳酸桿菌、芽孢桿菌、雙歧桿菌及其制劑等,它有益于宿主的健康生長,通過維持腸道的生態(tài)平衡來提高動物健康,已成為替代抗生素的理想綠色添加劑[2-3]。玉屏風散主要由黃芪、防風和白術(shù)三種中藥成分組成,對動物的免疫調(diào)節(jié)具有重要作用,可以提高動物免疫力,增強抗氧化力[4-5]。在動物試驗中,可提高動物的免疫功能和抗氧化力,對生長性能具有一定的促進作用[6]。因此,本試驗研發(fā)以益生菌和玉屏風散為主的飼料添加劑,旨在探討其對豬生長性能和血清免疫指標的影響。目前,益生菌對生長豬生長性能和免疫功能方面的研究較多,但是與玉屏風散共同作用方面的研究較少,本試驗在飼料中添加益生菌和玉屏風散,研究二者共同作用對生長豬生長性能和免疫功能的影響,為其科學利用提供依據(jù)。
益生菌和玉屏風散多糖均由湖南三和生物科技有限公司提供。益生菌主要成分為:枯草芽孢桿菌,活菌數(shù)≥2.5×109個/g;酵母菌,活菌數(shù)≥1.0×109個/g;嗜酸乳桿菌,活菌數(shù)≥2.5×109個/g。玉屏風散多糖中粗蛋白質(zhì)為17.70%、總還原糖為35.13%、水分為5.03%、粗脂肪為0.92%、粗灰分為9.36%、粗纖維為0.67%,純度約為80%。
采用單因素隨機試驗設(shè)計。選取96頭杜長大三元雜交生長豬,體重(13.12±1.32)kg,將試驗豬隨機分為4組,每組3個重復(fù),每個重復(fù)8頭豬。空白對照組(Ⅰ組)飼喂基礎(chǔ)日糧,益生菌組(Ⅱ組)飼喂基礎(chǔ)日糧+0.15%益生菌,玉屏風散多糖組(Ⅲ組)飼喂基礎(chǔ)日糧+0.04%玉屏風散多糖,綜合試驗組(Ⅳ組)飼喂基礎(chǔ)日糧+0.15%益生菌+0.04%玉屏風散多糖。試驗共計60 d,分兩階段進行,第一階段為1~30 d(生長豬體重10~20 kg),第二階段為31~60 d(生長豬體重20~50 kg)。
試驗飼糧為玉米-豆粕型,參考標準為NY/T 65—2004,詳情見表1,預(yù)試期3 d。試驗期間生長豬自由采食與飲水,免疫消毒等程序參照試驗豬場具體情況執(zhí)行。
試驗豬在兩個飼喂階段均進行生長性能測定,于試驗的第0、30、60 d分別進行空腹測定,并記錄試驗期間的飼料消耗情況。生長性能測定指標包括平均日增重(ADG)、平均日采食量(ADFI)以及料重比(F/G)。
分別在兩個試驗階段結(jié)束時對生長豬進行血清免疫指標測定。每個重復(fù)隨機選擇2頭,共計24頭生長豬,前腔靜脈采血5 ml,分離血清,-20℃保存。采用ELISA法(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)測定血清中免疫球蛋白含量(IgG),試劑盒購自上海酶聯(lián)生物公司。采用HITACHI7020自動分析儀測定血清中總蛋白(TP)、球蛋白(GLB)和白蛋白(ALB)三種指標,試劑盒購自上海酶聯(lián)生物公司。
表1 基礎(chǔ)日糧組成和營養(yǎng)水平(風干基礎(chǔ))
采用SAS 9.4統(tǒng)計軟件對試驗數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計,以鄧肯法對試驗數(shù)據(jù)進行差異性顯著分析,結(jié)果以“平均值±標準差”表示。
表2 對生長豬生長性能的影響
從表2中可以看到,在第一階段,在末重、平均日增重上Ⅱ~Ⅳ組顯著高于Ⅰ組(對照組)、而料重比顯著下降(P<0.05),在初重和平均日采食量上差異不顯著(P>0.05)。在第二階段,在末重上Ⅱ~Ⅳ組顯著高于Ⅰ組、而料重比顯著下降(P<0.05),在平均日增重和平均日采食量上差異不顯著(P>0.05)。在整個試驗周期內(nèi),與Ⅰ組(對照組)相比,Ⅱ~Ⅳ組平均日增重顯著提高(P<0.05),料重比顯著降低(P<0.05),平均日采食量差異不顯著(P>0.05)。
從表3中可以看到,在第一階段中,Ⅱ~Ⅳ組免疫球蛋白G含量分別比Ⅰ組提高了7.67%(P>0.05)、10.04%(P>0.05)和19.53%(P<0.05),Ⅱ~Ⅳ組免疫球蛋白A含量分別比Ⅰ組提高了 16.22%(P>0.05)、18.02%(P>0.05)和36.94%(P<0.05);在第二階段中,Ⅱ~Ⅳ組免疫球蛋白G含量分別比Ⅰ組提高了11.63%(P>0.05)、14.42%(P>0.05)和26.48%(P<0.05),Ⅱ~Ⅳ組免疫球蛋白A含量分別比Ⅰ組提高了10.92%(P>0.05)、9.24%(P>0.05)和25.21%(P<0.05)。在兩個試驗階段,Ⅱ~Ⅳ組的總蛋白均高于Ⅰ組,但差異不顯著(P>0.05)。
作為抗生素的替代產(chǎn)品,益生菌廣泛用于飼料添加劑中,它有益于宿主的健康生長,通過維持腸道的生態(tài)平衡來提高動物健康,進一步提升動物的生長性能[7],前人已經(jīng)通過實驗證明了乳酸桿菌等益生菌用在豬飼料添加劑中可顯著提高豬的平均日增重[8-9];玉屏風散多糖可加強動物的免疫功能、提高機體的抗氧化力,對生長性能具有促進作用,鄧緣等[6]在對玉屏風散多糖在仔豬生長性能的影響試驗中發(fā)現(xiàn)日糧中添加玉屏風散多糖可提高仔豬的生長速度和平均日增重,降低料重比。本試驗兩階段試驗結(jié)果表明,在第一階段,益生菌和玉屏風散多糖在平均日增重指標影響上優(yōu)于第二階段,本結(jié)果與 Giang等[10]、周盟等[11]、劉輝等[3]和鄧緣等[6]試驗結(jié)果相似。仔豬在斷奶之后,其免疫系統(tǒng)和消化系統(tǒng)發(fā)育仍未成熟,容易受環(huán)境和飼料等外界應(yīng)激的影響,在飼料中添加益生菌,能夠幫助仔豬建立平衡的腸道菌群,提高其腸胃吸收功能;在飼料中添加玉屏風散多糖,能夠幫助仔豬提高免疫能力,抵抗外界不良因素,與益生菌一起促進仔豬生長。隨著仔豬的生長,腸胃菌群和免疫能力的完善,益生菌和玉屏風散多糖對仔豬生長性能的提高逐漸降低,這與本試驗結(jié)果相似。
表3 對生長豬血清免疫指標的影響
仔豬血清免疫指標的波動直接影響著仔豬的生長發(fā)育和免疫能力,能夠反映仔豬的健康情況,其中血清中免疫球蛋白G、免疫球蛋白A與總蛋白(白蛋白和球蛋白)在動物機體免疫功能上起著重要作用。益生菌與玉屏風散多糖均能夠提高動物機體的免疫功能。楊久仙等[12]通過在日糧中添加益生菌發(fā)現(xiàn)可以顯著提高仔豬免疫球蛋白G水平,王四新等[13]發(fā)現(xiàn)豬源發(fā)酵乳酸桿菌可以提升保育豬免疫球蛋白G和免疫球蛋白A水平,由此可見,益生菌能夠提高豬血清中免疫球蛋白G和免疫球蛋白A水平來提升豬的免疫能力,該結(jié)果與本試驗結(jié)果相似。早在2011年,湯瀅等[14]通過現(xiàn)代藥理研究證明,玉屏風散多糖能夠通過提升動物機體中免疫球蛋白G和免疫球蛋白A含量來增強動物免疫功能;胡雄貴等[4]通過試驗再次證明玉屏風散多糖能夠提升仔豬的免疫能力,這與本試驗結(jié)果相似,玉屏風散多糖能夠通過提升血清中免疫球蛋白G含量來提高仔豬的免疫能力。同時本試驗旨在探討益生菌與玉屏風散多糖合用對仔豬血清免疫指標的影響,試驗結(jié)果表明二者合用比分別添加能顯著提升仔豬血清中免疫球蛋白G和免疫球蛋白A的含量,增強仔豬機體免疫能力,促進健康生長。
在仔豬基礎(chǔ)日糧中分別添加0.15%益生菌和0.04%玉屏風散多糖均能夠提高仔豬機體免疫能力和生長性能,且同時添加0.15%益生菌與0.04%玉屏風散多糖能夠顯著提高血清中IgG和IgA水平,促進機體吸收營養(yǎng)物質(zhì),提高仔豬生長性能。