保健食品中非法添加降糖藥物的測定方法

路亞靜

基本情況

保健食品現(xiàn)狀。近年來，“綠色食品”理念的提倡和發(fā)展，越來越多的人開始重視身體健康和飲食安全，一些以調(diào)節(jié)血壓、血糖平衡為銷售理念的“保健食品”隨著人們健康意識的提高而越來越暢銷，由于保健品市場火爆，市場競爭力大，一些商家為了提高服用效果和銷售口碑，向保健食品中非法添加藥物類成分，以此獲得消費者的青睞。這種做法既不符合法律規(guī)定，又對消費者身體造成損害，對保健食品中非法成分的測定成為阻止違規(guī)保健食品流向市場的關(guān)鍵。

保健食品中非法添加降糖藥物情況。根據(jù)目前的保健食品測定研究，常見的非法添加的降糖藥物主要有磺酰脲類、胰島素增敏劑、促胰島素分泌劑和雙胍類藥物，以格列本脲、二甲雙胍等居多，由于價格低廉且見效迅速，服用添加此類藥物的保健食品后，服用者血糖情況在短期內(nèi)得到有效控制，但長期服用，極易導(dǎo)致藥物依賴，在服用者不知情的情況下不當(dāng)容易出現(xiàn)中毒現(xiàn)象。如今市場流通的保健食品種類繁多，為了防止降糖藥物成分被檢測出又不斷更新添加種類和配方，為非法添加的檢測工作增加了難度。

檢測方法

檢測方法的選擇。在此研究前，作者查閱了大量的檢測技術(shù)的文獻，與中成藥物相比，保健食品非法添加的檢測較為容易，保健食品制作工藝細致，產(chǎn)品基質(zhì)較為穩(wěn)定，其雜質(zhì)的含量較小，對檢測結(jié)果的干擾也小，這更利于檢測方法的選擇，不同檢測方法造成的數(shù)據(jù)偏差也相對較小。文獻中最為常用的方法是色譜法，多以薄層色譜（TLC）和高效液相色譜（HPLC）為主。HPLC以液體為流動相，在高壓的作用下，液體快速流經(jīng)色譜柱，受到的阻力比固態(tài)流動相小得多，檢測速度得到提升，具有高效、準(zhǔn)確的特點，且可以重復(fù)使用，樣本不容易破壞，又克服了薄層色譜的假陽性問題，既可以定性分析，又可以定量測定，在實際檢測時十分常用。近年來，高效液相色譜與質(zhì)譜聯(lián)用，衍生出HPLC- MS法，該方法具有HPLC的高分離能力，又具有質(zhì)譜的靈敏性，采用離子檢測器代替了二極管陣列檢測器，克服了分離不徹底的問題，使得色譜法測定的結(jié)果更加準(zhǔn)確，但該方法對檢測者的操作要求較高，且檢測儀器價格不菲，并沒有十分普及。

樣本提取。除了檢測方法，樣本的處理和保存也對檢測結(jié)果有一定的影響。樣本的提取是檢測程序中關(guān)鍵的一個步驟，實驗室常用液液萃取、超聲萃取、固相萃取，由于液液萃取耗時長、消耗大，超聲萃取普適性低，降糖類添加藥物的測定最為常用的提取方法是固相萃取法。固相萃取利用選擇性吸附的原理，減少了液液萃取的溶劑消耗，提高了回收率，更加適合少量添加降糖藥物的保健食品的檢測。

測定方法。根據(jù)作者的檢測經(jīng)歷，對非法添加降糖藥物的測定主要采用固相萃取聯(lián)合HPLC檢測法。市面上比較常見的非法添加降糖藥物有格列吡嗪、格列本脲、格列齊特、格列喹酮、瑞格列奈、二甲雙胍、苯乙雙胍等。由于不明確保健食品的添加成分，在檢測時需要進行多項成分的色譜分析，如何在減少進樣的前提下盡量多的檢測藥物成分的種類，是目前探討保健食品添加劑檢測的重點。作者以以上7種藥物為例進行分析，7種目標(biāo)成分的離子化能力不同，根據(jù)其強弱分組進樣，利用陽離子固相萃取凈化。二甲雙胍和苯乙雙胍的水溶性較強，凈化實驗中，使用不同體積比的甲醇-鹽酸（0.1mol/L）溶液對7種藥物樣本進行凈化，二甲雙胍和苯乙雙胍不能洗脫出來，而甲醇-鹽酸體積比在50：50時，格列吡嗪已有少量流出，為了達到更好的凈化效果，對樣品的凈化應(yīng)選用體積比40：60的甲醇-鹽酸（0.1mol/ L）溶液。磺酰脲類藥物在堿性溶液中的溶解度較大，選用甲醇-氨水溶液作為非雙胍類藥物的洗脫液，在不同體積比的洗脫實驗中，60：40的甲醇-氨水（5%）溶液可將二甲雙胍部分洗脫，而在體積比20：80的比例下，磺酰脲類藥物就已經(jīng)開始洗脫，在50：50的體積比下，磺酰脲類藥物可完全洗脫，因而，選用50：50體積分?jǐn)?shù)的甲醇-氨水（5%）溶液對格列齊特、格列喹酮、格列本脲、割裂吡嗪、瑞格列奈進行洗脫。雙胍類藥物本身是堿性，不宜使用甲醇-氨水溶液作為洗脫液，應(yīng)使用強堿性溶液作為洗脫液，研究表明，在0.35mol/ L的氫氧化鈉溶液中，雙胍類藥物洗脫效果較好，因而，選擇60：40比例的甲醇-氫氧化鈉（0.35mol/L）作為雙胍類藥物的洗脫液。

討論

對于保健食品降糖藥物的測定，主要做好兩方面的問題，一是測定方法的選擇，二是樣本的凈化和處理，選用HPLC即能確保測定結(jié)果的準(zhǔn)確性，避免假陽性，又有價格優(yōu)勢，而在HPLC中，如何選擇最佳成分的凈化和洗脫液，也是測定的關(guān)鍵。因常見的降糖藥在酸堿度和水溶性上差異較大，經(jīng)過長期的經(jīng)驗積累和實驗，在同一色譜條件下，對樣本進行不同洗脫液分次測定最能夠保證測定結(jié)果。