巴戟天寡糖提純工藝及藥理作用研究進(jìn)展

李鑫潔，李玲玲，魯 藝

北京中醫(yī)藥大學(xué) 中醫(yī)學(xué)院，北京 100029

巴戟天為茜草科植物巴戟天(MorindaofficinalisHow)的干燥根，在《神農(nóng)本草經(jīng)》中被列為上品，和益智仁、砂仁、檳榔統(tǒng)稱為著名的“四大南藥”。巴戟天可補(bǔ)腎陽(yáng)、祛風(fēng)濕、強(qiáng)筋骨，在古代臨床運(yùn)用于陽(yáng)痿遺精，宮冷不孕，月經(jīng)不調(diào)，少腹冷痛，風(fēng)濕痹痛，筋骨痿軟[1]?，F(xiàn)代化學(xué)研究表明，巴戟天中含有環(huán)烯醚萜類、無(wú)機(jī)酸類、糖類、蒽醌類等活性成分，臨床運(yùn)用于抑郁、甲狀腺功能異常、記憶力減退、生殖損傷、骨質(zhì)疏松等癥[2-6]。

巴戟天中含糖量較高，包括單糖、寡糖和多糖，其中寡糖也稱菊淀粉型低聚糖，有一定的細(xì)胞識(shí)別與防御功能[7]，具有一定研究和開(kāi)發(fā)價(jià)值。研究表明[8-12]，巴戟天寡糖具有抗應(yīng)激、抗抑郁、 促進(jìn)精子生成、清除活性氧、抗心肌缺血再灌注等作用。然而，寡糖分子含有大量羥基，化學(xué)性質(zhì)相似，且自身存在多分支、多種連接方式、衍生化、多樣立體化等復(fù)雜特點(diǎn)，使得寡糖混合物的分離與檢測(cè)成為一大難點(diǎn)。因此，優(yōu)化提取分離巴戟天寡糖成分工藝成為當(dāng)下研究界的熱點(diǎn)。本研究歸納總結(jié)近年來(lái)關(guān)于寡糖分離純化文獻(xiàn)中的方法，為尋求新型有效、高效快速的巴戟天寡糖分離方法奠定基礎(chǔ)，為從巴戟天寡糖角度探索其抗抑郁機(jī)制提供選擇。

1 寡糖提取工藝

提取分離巴戟天寡糖的報(bào)道并不很普遍。寡糖常為2～10個(gè)單糖通過(guò)糖苷鍵連接而成的低聚糖，多羥基，具有一定程度的親水性，以乙醇回流最常用，但存在溶媒介質(zhì)影響等不確定因素，導(dǎo)致提取物含量降低，影響臨床療效等；此外，還可以用超聲波提取、微波提取、生物提取等現(xiàn)代提取方法[13,14]，也可以利用生化科技及酵素反應(yīng)，以淀粉及雙糖(如蔗糖等)合成寡糖，其中超聲提取法已成為許多中藥成分分析過(guò)程中的重要手段。

周奮進(jìn)等[15]以95%乙醇溶液為提取液，液料比為8∶1，加熱回流提取3次，每次30 min，最終得到桂花寡糖提取率為90.29%，明顯比水提取桂花寡糖提取率高。信維平[16]用乙醇-甲醇和乙醇兩種溶劑提取，觀察其對(duì)提取率的影響，確定最佳提取條件，苯酚-硫酸法測(cè)得寡糖提取率達(dá)到3.6%。實(shí)驗(yàn)中常用寡糖提取方法為水提醇沉法，用80%乙醇提取使多糖沉淀，以減少多糖的干擾，有利于下一步純化。

微波提取是利用微波來(lái)提高萃取率的新技術(shù)，微波輔助提取的研究表明[17]，微波輻射誘導(dǎo)萃取技術(shù)在提取過(guò)程中藥材不凝聚、不糊化，克服了熱水提取易凝聚、易糊化的特點(diǎn)。王章存等[18]通過(guò)500W的微波不僅顯著提高了大豆寡糖含量，且更易脫鹽。邵錦挺[14]用類芽抱桿菌WL菌株進(jìn)行瓊膠酶發(fā)酵，確定瓊膠酶降解瓊膠得到寡糖的最佳工藝。提取方法比較見(jiàn)表1。

表1 天然寡糖提取方法比較

2 寡糖分離純化工藝

寡糖的提取液常常伴隨著其他化學(xué)物質(zhì)或副產(chǎn)物存在，因此，寡糖的分離純化工藝是獲取寡糖單體的關(guān)鍵步驟，目前，寡糖的分離方法有層析法、親水作用液相色譜法、電泳法等[19-22]。

2.1 活性炭柱層析法

色譜法利用組分在固定相和流動(dòng)相中平衡分配系數(shù)不同而使各成分分離開(kāi)，適用于糖類分離的色譜填充材料有：活性炭、鋁礬土、石英砂、離子交換樹(shù)脂等。

活性炭是一種非極性吸附劑，對(duì)中藥中某些苷類、糖類及氨基酸等具有一定分離效果，適于工廠大量制備型分離。馮峰等[23]運(yùn)用活性炭，硅膠等色譜及波譜法，從巴戟天屬中分離鑒定6個(gè)寡糖類化合物，分別為：耐斯糖 、1F-果呋喃糖基耐斯糖、蔗糖、β-D-果吡喃糖-(2→1)-β-D-果呋喃糖-(2→1)-β-D-果呋喃糖 、β-D-果吡喃糖-(2→1)-β-D-果呋喃糖-(2→1)-β-D-果呋喃糖-(2→1)-β-D-果呋喃糖 、β-D-果吡喃糖-(2→1)-β-D-果呋喃糖-(2→1)-β-D-果呋喃糖-(2→1)-β-D-果呋喃糖-(2→1)-β-D-果呋喃糖，后三個(gè)化合物首次從巴戟天屬中分離得到。

此外，邱建國(guó)等[24]分別以活性炭及陽(yáng)離子-陰離子樹(shù)脂-活性炭聯(lián)用兩種方法以分離地黃寡糖部分，表明單用活性炭時(shí)，甘露三醇為15%乙醇洗脫物中的主要成分；陽(yáng)離子交換樹(shù)脂-陰離子交換樹(shù)脂-活性炭聯(lián)用時(shí)，水蘇糖(天然四糖)為10%乙醇脫物中的主要成分。

張安強(qiáng)等[25]先利用水提醇沉法，除去猴頭菌子實(shí)體中的雜質(zhì)多糖得粗寡糖，再經(jīng)陰離子交換(DEAE-Sepharose FF)和丙烯酰胺凝膠進(jìn)行分離，得到鹽性寡糖HEOF-0.1，水溶性寡糖HEOF-W-B(由3個(gè)阿拉伯糖組成)及單糖HEOF-W-C。但此法耗時(shí)長(zhǎng)、分離效果不很明顯。

2.2 多孔石墨化碳液相色譜法(PGC)

多孔石墨化碳液相色譜固定相為多孔石墨化碳填料，流動(dòng)相可以為水、甲醇或乙腈。 Lívia Budai等[26]通過(guò)用PGC色譜與質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)對(duì)AGP進(jìn)行了分離及樣本分析，得到18種分子量不同的低聚糖，并且這些低聚糖的同分異構(gòu)體也被分離出，證明天然寡糖異構(gòu)體在PGC柱上分離良好，同時(shí)補(bǔ)充了傳統(tǒng)質(zhì)譜的不足之處。

Westphal等[27]研究了不同PH在PGC上保留行為，結(jié)果顯示，中性寡糖β-(1,4)-葡寡糖和β-(1,4)-木寡糖的比α位的寡糖保留時(shí)間更長(zhǎng)，表明寡糖的結(jié)構(gòu)越接近平面，與PGC結(jié)合位點(diǎn)越多，保留時(shí)間越長(zhǎng)；同時(shí)，酸性寡糖α-(1,4)-半乳糖醛酸寡糖與其甲基化做對(duì)比，發(fā)現(xiàn)甲基化后的保留時(shí)間明顯減少，證明離子強(qiáng)度在PGC中的影響。

2.3 高效陰離子交換色譜法(HPAEC)

高效陰離子交換色譜一般與脈沖安培檢測(cè)器(PAD)聯(lián)用，其固定相為陰離子交換樹(shù)脂，是寡糖分離與檢測(cè)的有效手段。仰鐵錘等[8]采用HPAEC-PAD技術(shù)，以耐斯糖 、1F-果呋喃糖基耐斯糖、蔗果三糖作為指標(biāo)，對(duì)巴戟天寡糖類成分進(jìn)行分離檢測(cè)，并確定以Hemilton RCX-10陰離子交換樹(shù)脂為色譜柱、流速0.8 mL/min、柱溫30 ℃為最佳色譜條件。同時(shí)發(fā)現(xiàn)鹽制巴戟天的含糖量相對(duì)較高，而巴戟天莖葉中幾乎不含糖。

2.4 高速逆流色譜法(HSCCC)

高速逆流色譜法是一種連續(xù)高效液-液色譜分離技術(shù)，能基本回收全部樣本，很適合天然產(chǎn)物活性成分的分離。HSCCC與傳統(tǒng)色譜法相比[28,29]，具有樣品無(wú)損失、無(wú)污染等優(yōu)點(diǎn)，被廣泛應(yīng)用于成分分離、生物化學(xué)、化妝品等領(lǐng)域，在天然產(chǎn)物領(lǐng)域中已被認(rèn)為是一種有效的新型分離技術(shù)。步知思[30]利用大孔樹(shù)脂-高速逆流色譜聯(lián)用分離純化地黃中毛蕊花糖苷，發(fā)現(xiàn)通過(guò)大孔樹(shù)脂-高速逆流色譜聯(lián)用，并以乙酸乙酯-正丁醇-水(1∶4∶5)組成的兩相溶劑體系進(jìn)行洗脫，麥角甾苷的純度高達(dá)96%。

2.5 毛細(xì)管電泳法(CE)

絕大多數(shù)糖類化合物極性較大，大都不帶電荷，一般無(wú)法用毛細(xì)管電泳法。然而，可使糖類化合物衍生化的方法使之帶上電荷或熒光基團(tuán)得以分離[31]。由于毛細(xì)管內(nèi)徑的限制，檢測(cè)信號(hào)是CE系統(tǒng)最突出的問(wèn)題。紫外可見(jiàn)法(UV)是CE常用的檢測(cè)方法，但是受到儀器、單波長(zhǎng)等因素的限制。目前應(yīng)用最廣泛的是二極管陣列檢測(cè)器(PDA)。常規(guī)的檢測(cè)器還有靈敏度很高的激光光熱(LIP)和熒光(FL)檢測(cè)器。MAOW等[32]采用CE耦合激光誘導(dǎo)熒光分離檢測(cè)了肝素與寡糖。

2.6 中壓液相色譜聯(lián)用技術(shù)

中壓液相色譜聯(lián)用技術(shù)屬于快速色譜法之一。研究表明[33,34]，通過(guò)與折射率檢測(cè)器(RID)的耦合，快速色譜可以進(jìn)一步用于分離植物功能性低分子量碳水化合物。

Xu L[35]等利用中壓液相色譜耦合蒸發(fā)光散射檢測(cè)器(ELSD)和二極管陣列檢測(cè)器(PDA)，以氨丙基鍵合硅膠為色譜柱的填充材料，從蓮子中分離制備出五種寡糖。此方法無(wú)需提取等復(fù)雜的前期處理工藝，同時(shí)也減弱了極性化合物的過(guò)度吸附，為從天然藥用植物中大量獲取高純度低聚糖的制備提供了新的思路和方法。

2.7 親水作用液相色譜技術(shù)(HILIC)

親水作用液相色譜也稱為“反反相”色譜。華東科技大學(xué)[36]利用親水作用液相色譜技術(shù)分離靈芝中的棉子糖家族寡糖，分離得到水蘇糖、毛蕊花糖和棉子糖。表明通過(guò)親水相互作用液相色譜分離、純化和定量寡糖是有可能的。Xingchen Zhai等[37]研制了一種基于硅膠的3-氨基苯硼酸親水作用液相色譜固定相，通過(guò)調(diào)整流動(dòng)相中水分的比例，設(shè)計(jì)描述吸附和表面吸附的模型，用堿基和核苷來(lái)評(píng)價(jià)保留特性，并探討保留機(jī)理，在殼寡糖分離中表現(xiàn)出了良好的分離效果，并優(yōu)化了色譜柱條件，得到較好的指紋圖譜。結(jié)果表明，該保留機(jī)理是分配作用和表面吸附作用相結(jié)合的結(jié)果，而氫鍵似乎是影響保留行為的主要因素。

2.8 膜分離技術(shù)

膜分離技術(shù)一般分為微濾、超濾和納濾3種類型?？梢赃x用超濾法除去蛋白質(zhì)等大分子物質(zhì)，同時(shí)利用納濾膜除去半乳糖等小分子糖類，從而獲得高純度的功能寡糖混合物。Karina Altmann等[38]在分離牛乳寡糖中發(fā)現(xiàn)，300 Da的納濾膜可以有效除去小分子物質(zhì)，從而使獲得的寡糖的含量比原來(lái)高100倍。但是想要分離大小相近的寡糖單體，還需多孔濾膜技術(shù)的進(jìn)一步發(fā)展。分離方法比較見(jiàn)表2。

表2 天然寡糖分離方法比較

續(xù)表2(Continued Tab.2)

方法Method機(jī)理Mechanisation適用范圍Scope of application 優(yōu)點(diǎn)Merits缺點(diǎn)Drawbacks常用檢測(cè)器Common detector實(shí)例Example膜分離技術(shù)Membrane separa-tion technique分子量大小 Molecular weight不同分子量寡糖Different molecu-lar weight oligo-saccharides獲得不同分子量段寡糖、操作簡(jiǎn)單Oligosaccharides with different mo-lecular weights were obtained and the operation was simple膜孔選擇困難、易堵塞、不易區(qū)分分子量相近寡糖 The membrane pore is difficult to select, easy to block and difficult to distinguish oli-gosaccharides with similar mo-lecular weight質(zhì)譜Mass spectrum牛乳寡糖Milk oligosaccha-rides

3 寡糖成分檢測(cè)方法

巴戟天寡糖成分是巴戟天藥材發(fā)揮其生理作用的主要生物活性成分，其成分的結(jié)構(gòu)分析和含量測(cè)定的準(zhǔn)確分析能更好的對(duì)巴戟天及其相關(guān)藥材進(jìn)行質(zhì)量評(píng)價(jià)，同時(shí)對(duì)其藥動(dòng)學(xué)和藥效學(xué)的研究都有很大的影響?；A(chǔ)的檢測(cè)方法一般有甲基化分析、Smith降解、核磁共振波譜 (1H,13C NMR)、快原子轟擊質(zhì)譜 (FA-BMS) 等方法，其中的物理方法大多都以聯(lián)用的形式，使分析更簡(jiǎn)便、準(zhǔn)確、高效。

3.1 化學(xué)衍生化法

由于巴戟天低聚糖類成分在紫外-可見(jiàn)光范圍內(nèi)無(wú)吸收峰及熒光，因此通常采用衍生化后再測(cè)定紫外吸收的方法進(jìn)行檢測(cè)或直接采用薄層色譜法進(jìn)行檢測(cè)。林芳花等[39]用鹽酸先使巴戟天寡糖成分水解為果糖，再生成羥甲基糠醛，采用紫外-可見(jiàn)分光光度法，在280 nm處測(cè)得不同批次巴戟天藥材中低聚糖質(zhì)量分?jǐn)?shù)在 34.27%～40.48%。但此方法破壞原寡糖成分結(jié)構(gòu)，不適于寡糖成分結(jié)構(gòu)解析，且對(duì)鹽酸的濃度、量、溫度等條件要求較高。

3.2 聯(lián)用法

郝慶秀等[22]利用超高效液相色譜串聯(lián)四級(jí)桿飛行時(shí)間質(zhì)譜 (UPLC-Q-TOF-MS～E) 的方法，對(duì)巴戟天低聚糖成分進(jìn)行在線快速分析鑒定。以水-乙腈為流動(dòng)相，梯度洗脫，ESI 正、負(fù)離子模式下采集數(shù)據(jù)，根據(jù)其精確相對(duì)分子質(zhì)量、質(zhì)譜裂解碎片、色譜保留時(shí)間、以及已知同類化合物的碎片特征，對(duì)未知成分進(jìn)行結(jié)構(gòu)推測(cè)。該實(shí)驗(yàn)鑒定了19個(gè)巴戟天低聚糖成分，為巴戟天藥材的創(chuàng)新性開(kāi)發(fā)利用研究提供了科學(xué)依據(jù)。

鄧少東等[40]利用親水作用色譜-蒸發(fā)光散射檢測(cè)器聯(lián)用法同時(shí)測(cè)定巴戟天中蔗糖，蔗果三糖，耐斯糖，1F-果呋喃糖基耐斯糖，巴戟甲素這5種低 聚 糖 的 含 量，采 用 Waters XBridgeTMAmide(4.6 mm × 150 mm，3.5 μm) 親水性作用色譜柱，以乙腈(A)-0.2% 三乙胺溶液(B) 為流動(dòng)相，梯度洗脫，流速 0.8 mL/min，柱溫 40 ℃，以 ELSD 檢測(cè)，結(jié)果顯示 5 種低聚糖線性關(guān)系良好，并測(cè)定了 13 批次的藥材，各組分質(zhì)量分?jǐn)?shù)均在 0.57%～10.1%。

梁達(dá)清等[41]利用HPLC/ESI-MS法檢測(cè)10批來(lái)源地不同的巴戟天寡糖成分，分析發(fā)現(xiàn)不同產(chǎn)地、不同炮制方法對(duì)寡糖成分含量均有影響，其中含量最高達(dá)18.90%，含量最低至2.72%。此外，此實(shí)驗(yàn)首次在巴戟天寡糖中發(fā)現(xiàn)了二聚糖和三聚糖，為巴戟天藥材的研究和開(kāi)發(fā)提供了依據(jù)。

液質(zhì)聯(lián)用法不僅可以測(cè)定巴戟天成分含量，評(píng)價(jià)巴戟天質(zhì)量，還能對(duì)不同品種巴戟天進(jìn)行差別鑒定，丁平等[42]利用HPLC電化學(xué)法對(duì)巴戟天低聚糖類成分的指紋圖分析，可用于鑒別巴戟天及其常見(jiàn)混偽品。

4 寡糖成分藥理作用

現(xiàn)代研究表明巴戟天在神經(jīng)系統(tǒng)、免疫系統(tǒng)、內(nèi)分泌系統(tǒng)及心血管系統(tǒng)都有貢獻(xiàn)，其中巴戟天寡糖成分在神經(jīng)系統(tǒng)中的貢獻(xiàn)尤為突出[43-45]，且與傳統(tǒng)功效相對(duì)應(yīng)，是目前科研者們所關(guān)心的熱點(diǎn)之一。

4.1 抗抑郁

崔承彬等[46]等首次從巴戟天中提取出寡糖成分，分離出的寡糖類成分能在不影響小鼠自發(fā)活動(dòng)的劑量下，顯著縮短小鼠懸尾實(shí)驗(yàn)的不動(dòng)時(shí)間，初步判定巴戟天寡糖具有一定的抗抑郁作用，這為學(xué)者研究抗抑郁藥物打開(kāi)了新世界的大門。

徐德峰等[9]應(yīng)用慢性不可預(yù)見(jiàn)應(yīng)激法，建立雄性SD大鼠抑郁模型，以巴戟天寡糖和氟西汀作對(duì)照品，通過(guò)糖水偏愛(ài)測(cè)試和強(qiáng)迫游泳實(shí)驗(yàn)觀察大鼠行為變化，發(fā)現(xiàn)巴戟天寡糖能增強(qiáng)大鼠對(duì)糖水的偏愛(ài)，并顯著減少大鼠強(qiáng)迫游泳不動(dòng)時(shí)間，表明巴戟天寡糖具有抗抑郁作用。同時(shí)，用蛋白免疫印跡法檢測(cè)后，發(fā)現(xiàn)巴戟天寡糖高劑量組能顯著增加模型大鼠海馬區(qū)BDNF、Synapsin1的表達(dá)，推測(cè)其作用機(jī)制可能是調(diào)節(jié)腦源性神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子通路及突觸可塑性。

根據(jù)《生命科學(xué)周刊》新聞作者關(guān)于北京大學(xué)的研究報(bào)道[47]，實(shí)驗(yàn)先以大鼠蔗糖偏好實(shí)驗(yàn)和強(qiáng)迫游泳實(shí)驗(yàn)證明巴戟天寡糖能有效改善慢性應(yīng)激引起的抑郁樣行為。再以LY294002(PI3K抑制劑)為抑制劑注射于內(nèi)側(cè)前額葉皮層，用Western blot法檢測(cè)磷酸化Ser9-糖原合成激酶3β-連環(huán)蛋白、BDNF及突觸蛋白在內(nèi)側(cè)前額皮層和眶額皮質(zhì)的表達(dá)。依舊通過(guò)觀察強(qiáng)迫游泳實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)巴戟天寡糖抗抑郁作用不明顯，表明巴戟天寡糖抗抑郁作用機(jī)制可能與位于內(nèi)側(cè)前額葉皮層的BDNF-GSK-3β-連環(huán)蛋白有關(guān)。

陳云志等[48]通過(guò)文獻(xiàn)分析，認(rèn)為巴戟天寡糖抗抑郁作用可能與維生素D缺乏影響維生素D軸有關(guān)。研究表明[49,50]，給抑郁模型小鼠單用維生素D或維生素D聯(lián)用丙咪嗪后，小鼠腦組織的BDNF表達(dá)顯著提高；維生素D也干預(yù)抑郁小鼠腦中5-HT及多巴胺(DA)的表達(dá)。因此，巴戟天寡糖可能通過(guò)維生素D發(fā)揮抗抑郁作用。

此外，Qiu ZK等[5]使用連續(xù)單一應(yīng)激組(SPS)模型進(jìn)行評(píng)估，結(jié)果顯示巴戟天菊糖型寡糖可逆轉(zhuǎn)SPS處理大鼠的行為缺陷，即減少情境恐懼范式中凍結(jié)時(shí)間，同時(shí)又不影響其開(kāi)放領(lǐng)域正?；顒?dòng)，其還能增加前額葉皮質(zhì)、海馬及杏仁核中別孕烷醇酮含量，表明巴戟天菊糖型寡糖的抗創(chuàng)傷后應(yīng)激障礙(PTSD)與別孕烯醇酮合成有關(guān)。

4.2 增強(qiáng)記憶力與抗衰老

陳地林等[43]采用SD大鼠雙側(cè)海馬區(qū)注射 Aβ25-35各10 μg制備擬癡呆模型，以安理申(0.125 mg/kg/d)為陽(yáng)性藥組，結(jié)果顯示與模型組比較，各給藥組大腦組織中SOD、CAT、GSH-Px活力均增加，MDA含量降低(P<0.01)。此外，各給藥組乙酰膽堿水平升高，乙酰膽堿酯酶水平降低且腦能量代謝水平Na +/K+-ATPase活性升高。提示巴戟天寡糖可通過(guò)提高抗氧化能力、激活腦能量代謝、改善膽堿能系統(tǒng)損傷等作用以改善Aβ25-35致大鼠癡呆癥狀。同時(shí)，水迷宮測(cè)試結(jié)果顯示，模型組定位航行潛伏期明顯長(zhǎng)于空白組，其定位航行總路程明顯高于空白組，而各給藥組潛伏期明顯縮短。推測(cè)巴戟天寡糖可以明顯提高Aβ25-35致擬癡呆大鼠學(xué)習(xí)記憶能力。

4.3 改善生殖功能

丁平等[12]采用以環(huán)磷酰胺(CTX)損傷引起雄性小鼠精子減少的模型，以甲睪酮組為陽(yáng)性藥組，巴戟天水提液組、巴戟天80%乙醇提取液組及巴戟天寡糖結(jié)晶組分別為給藥對(duì)照組進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，給藥完畢后檢測(cè)精子數(shù)、精子活動(dòng)率及精子畸形率，發(fā)現(xiàn)與空白組比，模型組小鼠精子數(shù)降低25.8%(P<0.05)，精子總活動(dòng)率降低33.7%(P<0.01)，提示造模成功。三種給藥組與模型組相比，精子數(shù)及活動(dòng)率均升高，其強(qiáng)弱順序?yàn)榘完旖Y(jié)晶、巴戟天80%乙醇提取液、巴戟天水提液，推測(cè)巴戟天寡糖可能為促進(jìn)精子生成的基礎(chǔ)物質(zhì)。同時(shí)，三組給藥組與模型組相比，精子畸形率無(wú)顯著差異，可初步判定巴戟天寡糖提取物無(wú)毒副作用。

趙君等[51]采用“勞倦過(guò)度，房事不節(jié)”方法建立陽(yáng)虛小鼠模型，給藥6周后，發(fā)現(xiàn)高劑量治療后FSH、LH、T、GnRH均明顯升高(P<0.01)，推測(cè)巴戟天寡糖可能是通過(guò)調(diào)節(jié)垂體-下丘腦-性腺軸而改善生殖功能。

4.4 抗炎

程亮星等[52]以大鼠子宮缺血再灌注損傷為炎癥模型，巴戟天寡糖液給藥，以酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定法檢測(cè)。結(jié)果顯示，3組梯度給藥組TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-8水平均降低，且有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.05)，給藥組各兩組之間也均有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.05)。提示巴戟天寡糖能夠減輕子宮缺血再灌注損傷后的炎癥反應(yīng)，可保護(hù)子宮，減少其缺血再灌注的損傷。

4.5 促進(jìn)血管生成

馮國(guó)清等[53]在采用雞胚絨毛尿囊膜(CAM)模型及大鼠急性心肌梗死(AMI)模型，麝香保心丸為陽(yáng)性藥的實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)，巴戟天寡糖含藥血清組和堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因字(bFGF)組中小血管以載體為中心呈輻射狀生長(zhǎng)顯著，且與AMI模型組相比，巴戟天寡糖中、大劑量組能顯著增加微血管密度(MVD)及血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(VEGF)、bFGF光密度值，但作用弱于麝香保心丸組。提示巴戟天寡糖不僅可以促進(jìn)CAM的血管生成，還可促進(jìn)AMI后大鼠缺血心肌的血管生成，改善缺血心肌局部的側(cè)支循環(huán)，其機(jī)制可能與調(diào)節(jié)AMI后缺血心肌VEGF、bFGF蛋白的表達(dá)有關(guān)。楊景柯等[54]也通過(guò)實(shí)驗(yàn)證明了巴戟天寡糖可促進(jìn)CAM血管生成。

5 總結(jié)與展望

近些年抑郁癥患者人數(shù)增長(zhǎng)比率較大，越來(lái)越年輕化，研究發(fā)現(xiàn)抑郁癥不僅和心理因素、壓力過(guò)大有關(guān)，還與腦區(qū)前額葉和邊緣系統(tǒng)的特異性異常、神經(jīng)通路受損、單胺代謝、腦源性神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子(BDNF)、下丘腦-垂體-腎上腺軸和去甲腎上腺素功能障礙及分子水平有關(guān)，但發(fā)病機(jī)理仍不很明確，大多機(jī)理證明只是初步確定，其發(fā)病機(jī)制是否是通路受損，代謝異常等復(fù)合作用的結(jié)果，還需進(jìn)一步研究證實(shí)。

在臨床上，劉飛虎等[55]對(duì) 42 例腎虛型抑郁癥患者進(jìn)行巴戟天寡糖膠囊抗抑郁臨床觀察，發(fā)現(xiàn)巴戟天寡糖膠囊對(duì)輕、中度抑郁癥有較好的療效?？讘c梅等[56]自2007年3月至2008年1月采用隨機(jī)、雙盲雙模擬、安慰劑對(duì)照等研究方法，對(duì)巴戟天寡糖膠囊在臨床上治療抑郁癥的安全性和有效性作評(píng)價(jià)。中醫(yī)腎虛證量表結(jié)果顯示，巴戟天寡糖膠囊有效率高于對(duì)照組，且在治療劑量下，巴戟天寡糖膠囊的不良反應(yīng)比對(duì)照物鹽酸氟西汀輕，安全性好，為巴戟天寡糖膠囊推廣至臨床治療抑郁癥提供依據(jù)。

高純度巴戟天寡糖成分能為更好的深入研究巴戟天寡糖抗抑郁作用機(jī)制打下基礎(chǔ)，HPAEC、HILIC等現(xiàn)代技術(shù)逐漸發(fā)展起來(lái)，既保留了傳統(tǒng)分離技術(shù)的優(yōu)點(diǎn)又改善其不足之處，但仍存在對(duì)于化學(xué)成分相似的物質(zhì)無(wú)法精分且檢測(cè)困難這幾大難題，除了對(duì)工藝條件的優(yōu)化，采取各種聯(lián)用技術(shù)等方法，還需探索更多有益、綠色、高效的分離純化方法，以便優(yōu)化巴戟天藥材低聚糖的分離、分析和鑒定條件，為探究寡糖藥理機(jī)制奠定基礎(chǔ)，發(fā)揮巴戟天的最大利用價(jià)值。