急性腦梗死患者血清趨化素和網(wǎng)膜素-1水平的變化及意義*

徐品麗， 李文寶， 馮大勇， 姚恩生， 王宏

石河子大學(xué)醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科(新疆石河子 832000)

急性腦梗死(acute cerebral infarction，ACI)是神經(jīng)科的常見病和多發(fā)病，具有高致死率、致殘率，給個(gè)人生活、家庭經(jīng)濟(jì)及社會(huì)帶來了沉重的負(fù)擔(dān)。因此，對(duì)腦梗死的防治尤為重要。根據(jù)TOAST及中國缺血性卒中分型(CISS)標(biāo)準(zhǔn)[1]，在腦梗死的主要發(fā)病類型中大動(dòng)脈粥樣硬化型最為常見，故將動(dòng)脈粥樣硬化作為腦梗死的研究重點(diǎn)和防治靶點(diǎn)。研究表明[2-3]糖脂代謝異常、炎癥反應(yīng)等共同參與，可加速動(dòng)脈粥樣硬化的形成，促進(jìn)腦血管病的發(fā)生。脂肪組織作為一個(gè)代謝活躍的內(nèi)分泌器官，可分泌多種脂肪因子，如趨化素(Chemerin)、網(wǎng)膜素-1(Omentin-1)等，這些脂肪因子能通過影響機(jī)體的糖脂代謝、炎癥反應(yīng)等過程參與動(dòng)脈粥樣硬化的進(jìn)程[4-5]，影響腦卒中的發(fā)生。本研究通過對(duì)ACI患者發(fā)病48 h內(nèi)、第7天血清脂肪因子Chemerin、Omentin-1水平的測(cè)定，探討脂肪因子Chemerin、Omentin-1與ACI的關(guān)系及在腦梗死發(fā)病過程中可能發(fā)揮的作用。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2017年12月1日至2018年5月31日在我院神經(jīng)內(nèi)科住院的ACI患者109例為ACI組，并依照ADA糖尿病管理指南-2017標(biāo)準(zhǔn)[6]將ACI組分為ACI合并2型糖尿病(T2DM)組(A組)56例，其中男24例，女32例，年齡(64.79±12.08)歲；ACI不合并T2DM組(B組)53例，其中男27例，女26例，年齡(62.79±12.98)歲；選取同時(shí)期在我院進(jìn)行卒中篩查非ACI患者114例為N-ACI組。分為T2DM患者58例(C組)，其中男27例，女31例，年齡(63.67±11.48)歲；非糖尿病人群作為對(duì)照組(D組)56例，其中男27例，女29例，年齡(61.04±13.01)歲。4組間在性別、年齡方面比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。

1.2 入選標(biāo)準(zhǔn) (1)納入標(biāo)準(zhǔn)：ACI所有患者均在發(fā)病24 h內(nèi)，均符合2014年中國急性缺血性腦卒中診治指南[1]：①急性起??；②局灶神經(jīng)功能缺損(一側(cè)面部或肢體無力或麻木，語言障礙等)，少數(shù)為全面神經(jīng)功能缺損；③癥狀或體征持續(xù)時(shí)間不限(當(dāng)影像學(xué)顯示有責(zé)任缺血性病灶時(shí))，或持續(xù)24 h以上(當(dāng)缺乏影像學(xué)責(zé)任病灶時(shí))；④排除非血管性病因；⑤腦CT/MRI排除腦出血。T2DM符合ADA《2017年美國糖尿病診斷標(biāo)準(zhǔn)》[6]：已確診T2DM；或初次行OGTT實(shí)驗(yàn)：空腹血糖(FPG)≥7.0 mmol/L或餐后2 h血糖(2 h-PG)≥11.1 mmol/L；或HbA1C≥6.5%。(2)排除標(biāo)準(zhǔn)：①出血性腦卒中、心源性腦梗死；②合并嚴(yán)重肝腎功能不全、腫瘤；③合并有急慢性感染性疾病、自身免疫性疾病；④妊娠婦女，研究前2周內(nèi)服用過類固醇藥物、免疫抑制藥物等藥物者。本研究符合人體實(shí)驗(yàn)倫理化標(biāo)準(zhǔn)，患者及家屬均知情并簽署同意書。

1.3 觀察指標(biāo) 所有入組對(duì)象均記錄性別、年齡、身高、體重、血壓及高血壓病史、吸煙史等一般資料，并計(jì)算體質(zhì)指數(shù)(BMI)=體重/身高2(kg/m2)；抽取清晨空腹靜脈血送檢：血脂包括三酰甘油(TG)、總膽固醇(TC)、低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C),FPG、HbA1C、同型半胱氨酸(Hcy)、超敏C反應(yīng)蛋白(hs-CRP)等指標(biāo)，由醫(yī)院檢驗(yàn)科全自動(dòng)生化儀分析測(cè)定；分別于患者發(fā)病48 h內(nèi)、第7天抽取受試者空腹靜脈血5 mL，離心獲得血清后采用上海酶聯(lián)生物科技有限公司的人Chemerin、人Omentin-1酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒，用雙抗體夾心法分別測(cè)定各組血清Chemerin、Omentin-1水平。所有操作嚴(yán)格按照試劑盒說明書進(jìn)行，其中人血清Chemerin檢測(cè)靈敏度為12.5 ng/mL，人血清Omentin-1檢測(cè)靈敏度為2 pg/mL。

2 結(jié)果

2.1 4組臨床資料的比較 4組間Hcy差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。4組間收縮壓(SBP)、舒張壓(DBP)、BMI、FPG、HbA1C、TC、TG、LDL-C、HDL-C、hs-CRP等指標(biāo)差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，其中ACI組(A、B組)患者在SBP、DBP、BMI、TC、TG、LDL-C、hs-CRP等指標(biāo)明顯高于N-ACI組(C、D組)，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。在ACI組當(dāng)中，A組患者在FPG、HbA1C、LDL-C、hs-CRP等指標(biāo)高于B組患者，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；在N-ACI組當(dāng)中，C組患者在BMI、FPG、HbA1C、TC、TG、LDL-C、hs-CRP等指標(biāo)高于D組患者，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。ACI各組患者當(dāng)中存在較高的吸煙率和高血壓病史率(P<0.01)。見表1。

項(xiàng)目A組(n=56)B組(n=53)C組(n=58)D組(n=56)F/2值P值SBP(mmHg)149.11±22.59155.79±22.46132.03±19.74?△131.01±16.38?△20.320<0.001DBP(mmHg)86.84±12.7890.13±10.7879.22±9.83?△79.7.3±8.88?△14.031<0.001Hcy(μmol/L)22.03±6.8422.08±6.4021.96±6.5020.41±6.580.8420.472BMI(kg/m2)26.24±2.7726.89±3.5825.97±3.68?24.43±3.66?△▲5.0240.001HbA1C(%)7.48±1.865.87±0.61?7.23±1.04△5.66±0.41?▲39.227<0.001FPG(mmol/L)7.88±1.655.59±1.33?7.37±2.19△4.74±0.49?▲24.042<0.001TG(mmol/L)1.96±0.501.82±0.501.47±0.37?△1.19±0.41?△▲34.584<0.001TC(mmol/L)4.28±0.644.09±0.543.77±0.43?△3.20±0.58?△▲40.518<0.001LDL-C(mmol/L)2.93±0.792.63±0.89?2.13±0.69?△1.99±0.68?△▲15.822<0.001HDL-C(mmol/L)1.16±0.351.11±0.191.34±0.43?△1.26±0.29△5.1550.002hs-CRP(mg/L)6.03±1.204.74±1.50?2.43±0.68?△2.06±0.43?△▲188.685<0.001吸煙[例(%)]35(62.5)34(64.2)13(22.4)12(21.4)39.157<0.001高血壓[例(%)]38(67.9)40(75.5)24(41.4)37(66.1)15.8040.001

*與A組比較P<0.05；△與B組比較P<0.05；▲與C組比較P<0.05

2.2 4組血清Chemerin、Omentin-1水平的比較 ACI各組患者血清Chemerin水平在發(fā)病48 h內(nèi)明顯高于N-ACI各組，Omentin-1水平明顯低于N-ACI各組，并且ACI各組患者發(fā)病第7天血清Chemerin、Omentin-1水平較前均明顯恢復(fù)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。ACI各組患者在發(fā)病48 h內(nèi)，A組血清Chemerin水平高于B組，Omentin-1水平低于B組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。在N-ACI各組患者當(dāng)中，C組血清Chemerin水平高于D組，Omentin-1水平低于D組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。A、B組患者發(fā)病第7天血清Chemerin水平仍高于C、D組，Omentin-1水平低于C、D組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。見表2。

項(xiàng)目時(shí)間A組(n=56)B組(n=53)C組(n=58)D組(n=56)F/t值P值Chemerin(ng/mL)48 h110.59±3.29103.35±5.51?82.38±8.67?△69.89±4.21?△▲577.54<0.0017 d102.10±3.67#92.72±4.26?#1.59<0.001Omentin-1(pg/mL)48 h16.10±3.2927.05±4.86?39.96±6.10?△53.16±4.47?△▲623.53<0.0017 d23.66±3.35#34.14±3.31?#0.013<0.001

*與A組比較P<0.05；△與B組比較P<0.05；▲與C組比較P<0.05；#與同組發(fā)病48 h內(nèi)比較P<0.01

2.3 Chemerin、Dmentin-1與腦梗死風(fēng)險(xiǎn)因素的相關(guān)性 血清Chemerin水平與糖脂代謝指標(biāo)BMI、HbA1C、FPG、TC、TG、LDL-C呈正相關(guān)(均P<0.01)，與HDL-L呈負(fù)相關(guān)(P<0.01)；與炎性指標(biāo)hs-CRP呈正相關(guān)(P<0.01)；血清Omentin-1水平與糖脂代謝指標(biāo)BMI、HbA1C、FPG、TC、TG、LDL-C呈負(fù)相關(guān)(均P<0.01)，與HDL-L呈正相關(guān)(P<0.05)；與炎性指標(biāo)hs-CRP呈負(fù)相關(guān)(P<0.01)。見表3。

2.4 影響腦梗死相關(guān)因素的logistic回歸分析 以有無ACI為因變量，以TG、TC、LDL、BMI、Chemerin、Omentin-1為自變量作logistic回歸分析，高TG、Chemerin是腦梗死發(fā)生的獨(dú)立危險(xiǎn)因素，高Omentin-1是腦梗死發(fā)生的保護(hù)性因素。見表4。

表3 各 組血清Chemerin、Omentin-1與糖脂代謝、炎癥指標(biāo)的相關(guān)性分析

表4 影響腦梗死相關(guān)因素logistic回歸分析

3 討論

近年來，關(guān)于脂肪因子與動(dòng)脈粥樣硬化之間關(guān)系的研究已成熱點(diǎn)。目前認(rèn)為動(dòng)脈粥樣硬化是一種慢性炎癥反應(yīng)過程，循環(huán)中促炎脂肪因子和抑炎脂肪因子平衡失調(diào)共同促進(jìn)動(dòng)脈粥樣硬化及相關(guān)疾病的發(fā)展。Chemerin是2007年確認(rèn)的一種新型脂肪因子，為G蛋白偶聯(lián)受體趨化因子樣受體1(ChemR23)的天然配體，在白色脂肪組織中大量表達(dá)[7]。Chemerin被認(rèn)為是一種參與早期炎癥反應(yīng)的趨化蛋白，可募集表達(dá)有ChemR23的單核源性巨噬細(xì)胞、漿細(xì)胞樣樹突狀細(xì)胞至炎癥損傷部位，通過Chemerin/ChemR23相互作用趨化巨噬細(xì)胞等免疫活性細(xì)胞，并使之活化釋放腫瘤壞死因子-α(TNF-α)、白細(xì)胞介素-6(IL-6)等炎性反應(yīng)因子，發(fā)揮促炎作用。PI3k、Akt和P38被確定為Chemerin能趨化巨噬細(xì)胞迅速黏附到細(xì)胞外基質(zhì)蛋白和黏附分子的的關(guān)鍵信號(hào)通路[8]。除此之外，研究發(fā)現(xiàn)[9]，Chemerin可促進(jìn)巨噬細(xì)胞對(duì)膽固醇的蓄積和巨噬細(xì)胞向泡沫細(xì)胞的轉(zhuǎn)化，從而促進(jìn)動(dòng)脈粥樣硬化的形成。Omentin是由美國馬里蘭大學(xué)Yang等[10]于2003年首先發(fā)現(xiàn)的特異性表達(dá)于網(wǎng)膜脂肪組織的脂肪因子，主要由網(wǎng)膜脂肪組織內(nèi)的血管基質(zhì)細(xì)胞合成，有兩個(gè)異構(gòu)體，其中Omentin-1是人體循環(huán)過程中主要的異構(gòu)體，也是研究的熱點(diǎn)。研究發(fā)現(xiàn)[11-12]，Omentin-1在血管炎性反應(yīng)中發(fā)揮抗炎作用，當(dāng)血管內(nèi)皮損傷時(shí)，Omentin-1可抑制TNF-α介導(dǎo)的平滑肌細(xì)胞產(chǎn)生的細(xì)胞間黏附分子(ICAM-1)和血管黏附分子(VCAM-1)的表達(dá)及單核巨噬細(xì)胞對(duì)平滑肌細(xì)胞的黏附作用，抑制巨噬細(xì)胞吞噬脂質(zhì)成分而向泡沫細(xì)胞的轉(zhuǎn)化，從而抑制動(dòng)脈粥樣硬化的發(fā)生。

Gao等[13]研究提示Chemerin在局部動(dòng)脈粥樣斑塊中表達(dá)增強(qiáng)；德國學(xué)者Zylla等[14]在一項(xiàng)納入4 003名人群樣本的大型研究中發(fā)現(xiàn)Chemerin與動(dòng)脈粥樣硬化亞臨床指標(biāo)踝肱指數(shù)(ankle-brachial index，ABI)呈負(fù)相關(guān)。Kammerer等[15]在對(duì)178例高加索患者的研究中發(fā)現(xiàn)頸動(dòng)脈狹窄患者循環(huán)血液中Chemerin水平明顯增高，相關(guān)性分析表明，Chemerin與炎性指標(biāo)：CRP、TNF-α呈正相關(guān)。Yan等[16]通過對(duì)239例冠狀動(dòng)脈性疾病(coronary cardiopathy，CAD)患者和139例非CAD患者進(jìn)行對(duì)比后發(fā)現(xiàn)，CAD組患者的血清Chemerin濃度顯著高于非CAD組，并且在校正了年齡、性別及其他傳統(tǒng)冠心病危險(xiǎn)因素后仍然成立；以上研究表明Chemerin與動(dòng)脈粥樣硬化亞臨床指標(biāo)(踝肱指數(shù)ABI)、臨床指標(biāo)(動(dòng)脈粥樣斑塊、頸動(dòng)脈狹窄、CAD)等存在相關(guān)性，可能在動(dòng)脈粥樣硬化及相關(guān)疾病的發(fā)生過程中起促進(jìn)作用。Kadoglou等[17]發(fā)現(xiàn)血清Omentin-1水平在發(fā)生頸動(dòng)脈粥樣硬化斑塊患者中明顯降低。Shibata等[18]在78例經(jīng)冠狀動(dòng)脈造影確診急性冠脈綜合征(acute coronary syndrome，ACS)的男性患者中發(fā)現(xiàn)，血清Omentin-1水平較對(duì)照組顯著下降，且Omentin-1水平下降與ACS發(fā)生呈獨(dú)立正相關(guān)；以上研究表明Omentin-1與頸動(dòng)脈狹窄、ACS等動(dòng)脈粥樣硬化指標(biāo)存在相關(guān)性，可能在動(dòng)脈粥樣硬化相關(guān)疾病的發(fā)生過程中發(fā)揮保護(hù)作用。然而目前關(guān)于脂肪因子Chemerin、Omentin-1與缺血性腦血管病的研究尚少，且在腦梗死急性期Chemerin、Omentin-1水平如何變化尚未見有報(bào)道。

本研究結(jié)果顯示：ACI各組患者在發(fā)病48 h內(nèi)，血清Chemerin水平明顯高于N-ACI組，而血清Omentin-1水平明顯低于N-ACI組，與Zhao等[19]發(fā)現(xiàn)急性缺血性卒中(AIS)患者血清Chemerin水平明顯高于非AIS患者，Yue等[20]對(duì)239例缺血性腦卒中(IS)患者的研究發(fā)現(xiàn)血清Omentin-1水平與缺血性腦卒中呈負(fù)相關(guān)等研究結(jié)果一致；表明在腦梗死急性期存在血清Chemerin水平升高、Omentin-1水平降低，檢測(cè)兩者血清濃度有望成為ACI發(fā)生的有效預(yù)測(cè)指標(biāo)。

hs-CRP是一種典型的急相反應(yīng)蛋白，在組織損傷時(shí)可迅速升高，是人體應(yīng)激性炎癥反應(yīng)最敏感的指標(biāo)之一。本研究顯示：在ACI各組患者發(fā)病48 h內(nèi)血清hs-CRP水平較N-ACI各組患者明顯升高，與王愛民等[21]研究結(jié)果一致，表明在腦梗死急性期存在應(yīng)激性炎癥反應(yīng)；進(jìn)一步相關(guān)性研究顯示：血清Chemerin水平與hs-CRP呈正相關(guān)，血清Omentin-1水平與hs-CRP呈負(fù)相關(guān)，間接表明脂肪因子Chemerin在腦梗死急性期的應(yīng)激反應(yīng)中發(fā)揮促炎破壞作用，脂肪因子Omentin-1在腦梗死急性期的應(yīng)激反應(yīng)中發(fā)揮抗炎保護(hù)作用，促炎脂肪因子和抑炎脂肪因子平衡失調(diào)共同促進(jìn)ACI的發(fā)生。本研究還發(fā)現(xiàn)，ACI各組患者在發(fā)病第7天時(shí)血清Chemerin、Omentin-1水平較前均明顯恢復(fù)，進(jìn)一步表明脂肪因子Chemerin、Omentin-1可能參與了腦梗死急性期的應(yīng)激性反應(yīng)，隨著病程的發(fā)展，應(yīng)激反應(yīng)消退，各項(xiàng)指標(biāo)逐漸恢復(fù)至急性腦血管事件之前狀態(tài)。

動(dòng)物模型表明Chemerin可通過增加胰島素抵抗、加劇糖耐量受損進(jìn)而影響機(jī)體血糖水平[22-23]；Omentin-1可改善胰島素敏感性，促進(jìn)人脂肪組織中胰島素依賴的葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)從而影響機(jī)體血糖水平[10]。本研究顯示：在ACI和N-ACI各亞組中，合并有T2DM組患者，血清Chemerin水平高于不合并T2DM組患者(即A組>B組，C組>D組)，血清Omentin-1水平低于不合并T2DM組患者(即A組C組)、Omentin-1水平降低(即A組

多元logistic回歸分析表明高Chemerin為ACI發(fā)生的獨(dú)立危險(xiǎn)因素，高Omentin-1為ACI發(fā)生的保護(hù)性因素。破壞性因素增多和保護(hù)性因素減少共同作用，機(jī)體平衡狀態(tài)打破，促使ACI的發(fā)生。循環(huán)血液中每增加1個(gè)單位的Chemerin，ACI的發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)即增加1.480倍，每增加1個(gè)單位的Omentin-1，ACI的發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)即降低0.535倍，由此我們是否可以通過抑制破壞性因素的生成或加速破壞性因素的清除、促進(jìn)保護(hù)性因素的生成或外源補(bǔ)充保護(hù)性因素類似物從而就腦梗死的防治提供新的生物學(xué)靶點(diǎn)。

綜上所述，本研究提示在ACI患者中存在炎癥狀態(tài)以及血清脂肪因子Chemerin、Omentin-1濃度平衡失調(diào)，高Chemerin血癥和低Omentin-1血癥共同作用促進(jìn)ACI的發(fā)生，并且可能參與了腦梗死急性期的應(yīng)激性反應(yīng)，是動(dòng)脈粥樣硬化性腦梗死的危險(xiǎn)因素。因此降低循環(huán)中Chemerin水平、增加Omentin-1水平可能成為治療腦梗死的方法，檢測(cè)兩者的血液濃度有望成為預(yù)測(cè)ACI發(fā)生的重要生物學(xué)指標(biāo)。

本研究只能得到血清脂肪因子Chemerin、Omentin-1與ACI的相關(guān)性，不能證實(shí)ACI、動(dòng)脈粥樣硬化和脂肪因子Chemerin、Omentin-1的因果關(guān)系，尚未就血清Chemerin、Omentin-1水平與腦梗死的嚴(yán)重程度及預(yù)后等方面進(jìn)行研究。此外本研究樣本量較小，并且只檢測(cè)了ACI發(fā)病48 h內(nèi)和第7天的血清Chemerin、Omentin-1水平，接下來需進(jìn)一步擴(kuò)大樣本量及多時(shí)間段動(dòng)態(tài)觀察腦梗死急性期、亞急性期和恢復(fù)期的血清Chemerin、Omentin-1水平，以更好了解其在ACI發(fā)生、發(fā)展中可能的作用。