酶抑制法檢測蔬菜農(nóng)藥殘留的效果探討

李夢潔

【摘 ? 要】 隨著我國科技水平的不斷提升，農(nóng)業(yè)技術(shù)也得到了相應(yīng)的發(fā)展，縮短了蔬菜的生長期，而我國環(huán)境污染不斷，蔬菜遭受到病蟲的毒害也較為嚴(yán)重，在解決此問題上多數(shù)是采用農(nóng)藥進(jìn)行殺滅害蟲，蔬菜在使用農(nóng)藥后可正常生長。但部分蔬菜在生長過程中還會存在農(nóng)藥殘留問題，并且人們對食品安全問題越來越重視，因此如何采用科學(xué)有效的方法檢測蔬菜農(nóng)藥的殘留問題尤為重要，不僅要提高蔬菜農(nóng)藥殘留的準(zhǔn)確性，還要保證蔬菜使用的安全性?；诖吮疚膶κ卟宿r(nóng)藥殘留檢測進(jìn)行分析，并對酶抑制發(fā)檢測蔬菜農(nóng)藥殘留的效果進(jìn)行討論和評價，為我區(qū)農(nóng)業(yè)技術(shù)發(fā)展提供可靠的參考依據(jù)。

【關(guān)鍵詞】 酶抑制法;檢測技術(shù);蔬菜;農(nóng)藥殘留

Study on the effect of enzyme inhibition method for the determination of pesticide residues in vegetables

Li Mengjie

（Agricultural Environmental Protection Monitoring Station of Agriculture Bureau of Simao ， Pu'er ? 665000）

[Abstract] ?With the development of science and technology in China， agricultural technology has been developed accordingly， and the growing period of vegetables has been shortened. In order to solve this problem， pesticides are mostly used to kill pests， and vegetables can grow normally after the use of pesticides. However， some vegetables will still have pesticide residues in the growth process， and people pay more and more attention to food safety. Therefore， how to use scientific and effective methods to detect pesticide residues in vegetables is particularly important.

[Keywords] ? enzyme inhibition method; detection technique; vegetable; pesticide residue

蔬菜在生長過程中由于會受到病蟲的毒害，會使用一定的農(nóng)藥殺害病蟲，但由于市場上的大部分生產(chǎn)者在使用農(nóng)藥上未按照相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)超量使用農(nóng)藥，甚至有些為了提高蔬菜的產(chǎn)量和美觀度存在使用違禁農(nóng)藥的情況[1]，嚴(yán)重危害著人們的身體健康和生命安全。為了保障人們的生命安全在使用農(nóng)藥時必須按照相關(guān)規(guī)定，同時要在檢測蔬菜農(nóng)藥殘留方面找到科學(xué)有效的技術(shù)，現(xiàn)階段我國檢測蔬菜農(nóng)藥殘留問題上主要是采用酶抑制法，酶抑制法具備效率高、時間短、操作簡便等優(yōu)點(diǎn)，被廣泛運(yùn)用在農(nóng)產(chǎn)品安全質(zhì)量檢測機(jī)構(gòu)中，不僅能準(zhǔn)確檢測到蔬菜農(nóng)藥殘留的情況，還能保證人們食用到安全的蔬菜產(chǎn)品，以此來保證我區(qū)人民群眾的健康和生命安全。

1 ?蔬菜農(nóng)藥殘留的問題

大部分農(nóng)產(chǎn)品在生產(chǎn)過程中使用農(nóng)藥之后會存留一定的農(nóng)藥，而農(nóng)藥不僅會在蔬菜產(chǎn)品中殘留，還會在水和土中殘留，這種現(xiàn)象也就是農(nóng)藥殘留。農(nóng)藥殘留多存在為葉類蔬菜，例如油菜、小白菜、韭菜等[2]。目前世界上涵蓋的農(nóng)藥品種豐富多樣，較為常見的農(nóng)藥類型有除草劑、生長調(diào)節(jié)劑以及殺蟲劑等，在使用中若是過量造成農(nóng)藥殘留將會對人體的身體健康造成嚴(yán)重?fù)p害，甚至可使人體的血液和大腦遭到損傷，危害著人們的生命安全。

2 ?檢測蔬菜農(nóng)藥殘留的重要性

近幾年來由于環(huán)境污染的加劇，使病蟲害發(fā)生率不斷上升，農(nóng)藥的毒性和品種方面也逐漸加大，雖然使用農(nóng)藥能夠?qū)Σ∠x進(jìn)行殺害，為農(nóng)業(yè)創(chuàng)造可觀的收入，但是也會在很大程度上影響到生態(tài)系統(tǒng)的平衡，使生態(tài)環(huán)境惡化加重。蔬菜上的農(nóng)藥殘留人體食用后會直接存在體內(nèi)，長期食用含有農(nóng)藥殘留的蔬菜會對人體造成損害，嚴(yán)重可直接發(fā)生中毒和慢性中毒現(xiàn)象。我國在檢測農(nóng)藥上也制定了相應(yīng)的法律法規(guī)，嚴(yán)格控制農(nóng)藥殘留情況，在蔬菜生長中減少農(nóng)藥污染，以此來保障我國人民的生命安全和身體健康。

3 ?檢測蔬菜農(nóng)藥殘留的技術(shù)

檢測蔬菜農(nóng)藥殘留的技術(shù)目前較為常見的有光譜法、色譜法、酶抑制劑法以及快速檢測技術(shù)等。光譜法在樣品處理方面的要求比較低，對環(huán)境污染比較小，在檢測速度上也較快，但是檢測具有局限性，僅能夠檢測到有機(jī)磷農(nóng)藥一種，在靈敏度方面不足，因此不能夠作為蔬菜農(nóng)藥殘留技術(shù);色譜法可定量分析蔬菜農(nóng)藥的殘留，其靈敏度較高，但其投資成本高，檢測花費(fèi)的時間較長，并且在檢測技術(shù)較難，不能夠滿足基層使用;快速檢測技術(shù)的檢測依據(jù)是氧化還原反應(yīng)，當(dāng)檢測液與檢測物發(fā)生反應(yīng)后會變色，但在靈敏度上不夠，還會受到還原性物質(zhì)的現(xiàn)在，不能滿足農(nóng)藥殘留檢測;酶抑制法具有檢測快、成本低、靈敏度高、操作簡便等優(yōu)勢，可作為蔬菜農(nóng)藥殘留檢測的主要技術(shù)。思茅區(qū)農(nóng)業(yè)局農(nóng)業(yè)環(huán)境保護(hù)監(jiān)測站自2006年開展蔬菜農(nóng)藥殘留檢測以來，所采用的檢測方法都是酶抑制法。2014年思茅區(qū)創(chuàng)建衛(wèi)生城市，為確保農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全，所有農(nóng)貿(mào)市場都配備蔬菜農(nóng)殘檢測室。2017年思茅區(qū)創(chuàng)建省級農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全示范區(qū)，7個鄉(xiāng)鎮(zhèn)農(nóng)業(yè)工作站均配齊農(nóng)殘檢測室，并配備專業(yè)檢測人員開展蔬菜檢測，建立農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全追溯系統(tǒng)。

4 ?酶抑制法檢測蔬菜農(nóng)藥殘留

4.1 ?檢測原理

酶重要的生物神經(jīng)傳導(dǎo)為乙酰膽堿，其作用于神經(jīng)傳導(dǎo)，可使神經(jīng)沖動進(jìn)行正常傳導(dǎo)，而大部分的農(nóng)藥中都含有氨基酸酯和有機(jī)磷，能夠?qū)οx中樞神經(jīng)系統(tǒng)中的乙酰膽堿進(jìn)行抑制，通過積累大量的乙酰膽堿影響害蟲的神經(jīng)活動正常傳導(dǎo)，最終殺滅害蟲。酶抑制法主要是依照殺滅害蟲的原理來檢測蔬菜中的農(nóng)藥殘留，使樣品提取液和特異性抑制膽堿酯酶發(fā)生反應(yīng)，如果能夠抑制特異性抑制膽堿酯酶，則顯示檢測樣品中存在農(nóng)藥殘留現(xiàn)象。

4.2 ?檢測條件

對樣品進(jìn)行檢測時需要將室內(nèi)溫度控制在24～30℃之間，室內(nèi)的濕度必須要≤80%。

4.3 ?檢測方式

在檢測時需要準(zhǔn)備的儀器有農(nóng)藥殘留快速檢測儀、玻璃儀器、電子天平、微型樣品混合器、蒸餾水機(jī)、移液槍以及電熱恒溫培養(yǎng)箱等，需要準(zhǔn)備的試劑為乙醇膽堿酯酶、緩沖劑以及顯色劑等;首先需要對底物、專用酶、顯色劑和緩沖液進(jìn)行配制，配制后將其保存在合適的環(huán)境下，然后混合檢測的蔬菜樣品，使用電子天平采取5g樣品，將其放在玻璃儀器里，同時將20ml的緩沖液加入其中進(jìn)行充分混合后倒出，停留3min～5min，使用移液槍將酶移到玻璃儀器內(nèi)，將其放入電熱恒溫培養(yǎng)箱中30min左右，然后采用光度計測定吸光度，蔬菜中農(nóng)藥的殘留范圍必須要保持在-10%～110%之間，若超過這個范圍，則代表操作不合格，需重新進(jìn)行檢測。

5 ?需要注意的方面

5.1 ?注意蔬菜的安全狀況

在進(jìn)行酶抑制法檢測的時候需要選擇安全的蔬菜。蔬菜的安全范圍在抑制率不超過40%，蔬菜較為安全的抑制率為40～50%;蔬菜存在安全隱患的抑制率為50～70%，蔬菜不安全的抑制率超過70%。對于抑制率超過50%的蔬菜，需進(jìn)行色譜法分析和檢測，以此來確定蔬菜中農(nóng)藥殘留的超標(biāo)現(xiàn)象。

5.2 ?抑制劑的選用

在蔬菜農(nóng)藥殘留檢測時，農(nóng)藥的濃度會與酶的活性產(chǎn)生關(guān)聯(lián)情況，農(nóng)藥殘留檢測結(jié)果的靈敏性和準(zhǔn)確度會受到酶活性的影響，大部分的乙酰膽堿酯酶濃度均在5～11mol·L-1，抑制時間為10～60min之間，在這個范圍內(nèi)則能夠抑制酶活性，但也存在部分的有機(jī)磷農(nóng)藥在抑制乙酰膽堿酯酶上的效果欠佳。

5.3 ?酶的固定化技術(shù)

在蔬菜農(nóng)藥殘留檢測過程中藥密切關(guān)注酶的固定化情況，酶的固定化技術(shù)主要有交聯(lián)法、吸附法和電聚合法等，而隨著我國科技水平的進(jìn)步，在酶的主要固定化技術(shù)上形成了吸附與交聯(lián)法聯(lián)合應(yīng)用的模式，在制備乙酰膽堿酯酶上，由于PH值會上升，以此來實(shí)現(xiàn)乙酰膽堿酯酶固定的目標(biāo)，不僅可減少酶分子之間的影響，還能夠降低酶活動的現(xiàn)象，促進(jìn)酶源的實(shí)用性。

6 ?結(jié)束語

蔬菜農(nóng)藥殘留檢測技術(shù)可保障蔬菜的生產(chǎn)質(zhì)量和安全，避免不合格的蔬菜在市場販賣，通過酶抑制法對其進(jìn)行檢測可及時發(fā)現(xiàn)蔬菜的安全問題，并且可分析問題后及時找到解決辦法，對我區(qū)農(nóng)產(chǎn)品生產(chǎn)上不斷調(diào)整與完善方案，促使蔬菜生產(chǎn)者能夠合理的運(yùn)用農(nóng)藥殺害病蟲，以此來保證我區(qū)人們的健康和生命安全，促進(jìn)我區(qū)農(nóng)產(chǎn)品事業(yè)的可持續(xù)健康發(fā)展。

參考文獻(xiàn)：

[1] 王艷樹， 馬濤， 王琴， et al. 酶抑制法檢測蔬菜中農(nóng)藥殘留? ? ?存在的不足及提高檢測準(zhǔn)確性的途徑[J]. 現(xiàn)代農(nóng)業(yè)科技，? ? ?2017（1）：104-105.

[2] 姜露，葉麟， 楊雪， 等. 不同前處理對植物酯酶抑制法檢? ? ?測蔬菜中有機(jī)磷及氨基甲酸酯類農(nóng)藥殘留的影響[J]. 食品? ? ?與發(fā)酵工業(yè)，2016，42（1）：200-204.