MEG3在腫瘤中作用的研究進(jìn)展

李寶華，葛瑞勝，郭林頓，畢丹丹，陳曉宇，成 浩，張淑君※

(1.哈爾濱醫(yī)科大學(xué)附屬第四醫(yī)院病理科，哈爾濱 150001； 2.哈爾濱醫(yī)科大學(xué)， 哈爾濱 150001)

長(zhǎng)鏈非編碼RNA(long noncoding RNA，lncRNA)是一類不具有蛋白編碼功能的RNA，其編碼產(chǎn)物長(zhǎng)度>200個(gè)核苷酸[1]。人母系表達(dá)基因3(maternally expressed gene 3，MEG3)，屬于雙亮氨酸拉鏈激酶1-MEG3印記區(qū)，位于人類染色體14q32.2[2]，其編碼產(chǎn)物是一條長(zhǎng)約1.6 kb的lncRNA。

研究發(fā)現(xiàn)，MEG3表達(dá)于人的很多正常組織中，而檢測(cè)多種人類癌癥組織及細(xì)胞株發(fā)現(xiàn)MEG3表達(dá)下調(diào)，并且其低表達(dá)水平與腫瘤的發(fā)生、發(fā)展相關(guān)，而在各種腫瘤細(xì)胞系中異位表達(dá)MEG3可以表現(xiàn)出其具有抑制腫瘤細(xì)胞增殖、遷移、侵襲或促進(jìn)腫瘤細(xì)胞凋亡的作用，因此MEG3被認(rèn)為是一種潛在的腫瘤抑制因子[3-4]。MEG3的腫瘤抑制作用已經(jīng)在多項(xiàng)研究中取得進(jìn)展，研究發(fā)現(xiàn)MEG3的表達(dá)缺失或許與其基因啟動(dòng)子的高甲基化狀態(tài)有關(guān)，降低基因啟動(dòng)子甲基化水平可能恢復(fù)MEG3的表達(dá)[5-6]。MEG3可能通過(guò)轉(zhuǎn)錄水平和表觀遺傳水平等調(diào)控靶基因或某些功能性RNA的表達(dá)，或直接結(jié)合某些蛋白并促進(jìn)其降解，參與對(duì)p53途徑[7]、Rb途徑[8]、人第10號(hào)染色體缺失的磷酸酶及張力蛋白同源(phosphatase and tensin homolog deleted on chromosome ten，PTEN)/磷脂酰肌醇-3-激酶(phosphoinosi-tide 3-kinase，PI3K)/蛋白激酶B(protein kinase B，PKB/Akt)途徑等的調(diào)節(jié)，從而參與腫瘤抑制作用[9]。然而，MEG3在腫瘤中的具體作用尚未完善，現(xiàn)就MEG3在各種腫瘤中的作用及其部分機(jī)制予以綜述。

1 MEG3結(jié)構(gòu)和功能

lncRNA是RNA聚合酶Ⅱ轉(zhuǎn)錄的副產(chǎn)物，起初被認(rèn)為是基因組轉(zhuǎn)錄的“垃圾序列”[10]，不具有生物學(xué)功能。然而在后續(xù)的研究中發(fā)現(xiàn)，lncRNA可以在轉(zhuǎn)錄、轉(zhuǎn)錄前和表觀遺傳等水平上調(diào)控基因的表達(dá)，參與各種生物學(xué)進(jìn)程。其中INK4基因座反義非編碼RNA(antisense non-coding RNA in the INK4 locus，ANRIL)[11]、HOX反義基因間RNA(HOX antisense intergenic RNA，HOTAIR)[12]、牛磺酸上調(diào)基因1(taurine up-regulated gene 1，TUG1)[13]等在腫瘤中呈高表達(dá)，并表現(xiàn)出促進(jìn)腫瘤發(fā)生、發(fā)展進(jìn)程的作用。而生長(zhǎng)停滯特異性轉(zhuǎn)錄本5(growth arrest-specific transcript 5，GAS5)[14]、MEG3等在腫瘤中的表達(dá)被弱化，對(duì)其過(guò)表達(dá)可觀察到抑制腫瘤細(xì)胞增殖、遷移、侵襲或促進(jìn)凋亡的抗腫瘤作用?；蚪M結(jié)構(gòu)分析發(fā)現(xiàn)，MEG3由10個(gè)外顯子組成，可通過(guò)選擇性剪接產(chǎn)生12種不同的基因亞型[15]。通過(guò)創(chuàng)建MEG3剪切體并進(jìn)行功能及結(jié)構(gòu)分析，發(fā)現(xiàn)RNA的折疊對(duì)MEG3激活p53的功能至關(guān)重要[16]。研究表明，MEG3具有很多抑癌基因的特性，與正常組織細(xì)胞相比MEG3在肺癌[17]、食管癌[18]、胃癌[19]、結(jié)直腸癌[20]、肝癌[21]、乳腺癌[22]、宮頸癌[23]、非功能性垂體腺瘤[24]等腫瘤組織中的表達(dá)均下調(diào)，并且MEG3低表達(dá)與腫瘤的發(fā)生和發(fā)展密切相關(guān)。多種機(jī)制與MEG3表達(dá)的喪失有關(guān)，包括基因缺失、啟動(dòng)子高甲基化和基因間差異甲基化區(qū)域的超甲基化。隨著對(duì)MEG3的深入研究發(fā)現(xiàn)，MEG3發(fā)揮抗腫瘤作用與影響調(diào)節(jié)Rb途徑、p53途徑、PTEN/PI3K/Akt途徑，及通過(guò)與微RNA的相互作用靶向某些抑癌基因等相關(guān)[9]。隨著對(duì)MEG3研究的深入，其有望成為腫瘤診斷、治療、判斷預(yù)后的新靶點(diǎn)。

2 MEG3與腫瘤的關(guān)系

2.1MEG3與肺癌 視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤基因(retinoblastoma gene，Rb)通路在許多人類癌癥中被破壞。Rb通過(guò)與E2F轉(zhuǎn)錄因子家族結(jié)合并抑制其活性來(lái)調(diào)節(jié)細(xì)胞周期進(jìn)程和增殖。Rb失活與細(xì)胞周期蛋白依賴性激酶(cyclin-dependent kinase，CDK)，特別是CDK4和CDK6的磷酸化有關(guān)。但其他機(jī)制也起到調(diào)節(jié)細(xì)胞周期進(jìn)程和細(xì)胞增殖的作用，包括某些微RNA和lncRNA的下游效應(yīng)子。Kruer等[8]通過(guò)用palbociclib(一種CDK4/6抑制劑)處理肺癌細(xì)胞系A(chǔ)549和人肺鱗癌細(xì)胞(human lung squamous carcinoma cell line，SK-MES-1)激活pRb，發(fā)現(xiàn)MEG3可能是Rb途徑的下游靶標(biāo)。palbociclib同時(shí)也降低了DNA甲基轉(zhuǎn)移酶1(DNA methyl-transferase 1，DNMT1)的表達(dá)， DNMT1的沉默導(dǎo)致兩種細(xì)胞類型中MEG3基因座的甲基化降低、MEG3的表達(dá)增加，表明DNMT1有助于MEG3的沉默。MEG3重新表達(dá)后，G1期細(xì)胞周期停滯，細(xì)胞凋亡增加。palbociclib或其他CDK4/6抑制劑或許可用于靶向治療，依賴于MEG3調(diào)節(jié)生長(zhǎng)途徑的多種腫瘤類型。

Yan-Hua等[17]檢測(cè)40對(duì)癌及癌旁組織，再次證明MEG3在肺癌組織中表達(dá)下調(diào)。異位表達(dá)MEG3發(fā)現(xiàn)其具有抑制腫瘤細(xì)胞增殖、誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡的功能，并能抑制腫瘤細(xì)胞的遷移，發(fā)現(xiàn)MEG3可以負(fù)調(diào)控myc基因的表達(dá)，并且該調(diào)節(jié)可能補(bǔ)充MEG3在肺癌細(xì)胞中的腫瘤抑制作用。

綜上所述，肺癌中MEG3的表達(dá)水平降低，并可能與基因啟動(dòng)子的甲基化水平呈負(fù)相關(guān)，通過(guò)激活Rb途徑可能恢復(fù)MEG3的表達(dá)。MEG3的過(guò)表達(dá)可以調(diào)控某些靶基因的表達(dá)，如負(fù)調(diào)控MYC的表達(dá)，并且抑制細(xì)胞增殖、誘使細(xì)胞周期停滯、誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡，從而表現(xiàn)出抗腫瘤的生物學(xué)行為。

2.2MEG3與消化系統(tǒng)腫瘤 Dong 等[18]對(duì)143例食管鱗狀細(xì)胞癌患者的臨床標(biāo)本研究分析發(fā)現(xiàn)，MEG3的甲基化狀態(tài)與TNM分期、浸潤(rùn)深度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移和遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移或復(fù)發(fā)有關(guān)，MEG3的高甲基化可能是沉默其表達(dá)的機(jī)制之一。MEG3可通過(guò)競(jìng)爭(zhēng)性結(jié)合miR-9而充當(dāng)內(nèi)源競(jìng)爭(zhēng)性 RNA(competing endogenous RNA，ceRNA)以調(diào)節(jié)上皮鈣黏蛋白和叉頭框蛋白O1(forkhead box O1，F(xiàn)OXO1)的表達(dá)，可能是MEG3一種新的抗腫瘤作用機(jī)制。Xu 等[19]發(fā)現(xiàn)，在胃癌組織及細(xì)胞系中MEG3表達(dá)下調(diào)，而miR-21的表達(dá)上調(diào)。過(guò)表達(dá)MEG3顯著抑制細(xì)胞的侵襲和遷移能力，且遷移和侵襲相關(guān)的基質(zhì)金屬蛋白酶(matrix metalloprotainase，MMP)家族中的MMP-3、MMP-9和血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子的表達(dá)水平降低。MEG3可能通過(guò)負(fù)調(diào)控miR-21的表達(dá)抑制上皮-間充質(zhì)轉(zhuǎn)化，從而抑制胃癌細(xì)胞的侵襲和遷移。

Peng等[25]通過(guò)使用實(shí)時(shí)定量聚合酶鏈反應(yīng)(quantitative real-time polymerase chain reaction，qRT-PCR)分析50對(duì)臨床胃癌樣品，發(fā)現(xiàn)較低的MEG3水平與胃癌的臨床分期相關(guān)。MEG3可能作為ceRNA競(jìng)爭(zhēng)性結(jié)合miR-181家族，上調(diào)B細(xì)胞淋巴瘤2(B-cell leukemia 2，Bcl-2)，抑制胃癌細(xì)胞增殖、遷移和侵襲以及促進(jìn)胃癌中的細(xì)胞凋亡而充當(dāng)腫瘤抑制劑。Yan等[6]檢測(cè)52對(duì)胃癌組織及鄰近正常組織發(fā)現(xiàn)MEG3低表達(dá)與基因甲基化相關(guān)，miR-148a可以負(fù)向調(diào)控參與甲基化修飾的主要酶之一DNMT1的表達(dá)，從而激活MEG3的表達(dá)，抑制腫瘤細(xì)胞增殖。

近年發(fā)現(xiàn)的一種凋亡蛋白，聚集素Clusterin經(jīng)常在多種類型的癌癥中過(guò)表達(dá)，包括前列腺癌、乳腺癌、肺癌和結(jié)直腸癌[26]。據(jù)報(bào)道，Clusterin通過(guò)激活核因子κB和Bcl-2信號(hào)通路，抑制腫瘤壞死因子-α誘導(dǎo)的乳腺癌細(xì)胞凋亡[27]。它還通過(guò)激活肝細(xì)胞癌中的真核翻譯起始因子3I(eukaryotic translation initiation factor 3I,EIF3I)/Akt/MMP-13信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路來(lái)刺激細(xì)胞的遷移和轉(zhuǎn)移[28]。Zhu等[20]發(fā)現(xiàn)，MEG3在結(jié)直腸癌中明顯下調(diào)。原位雜交技術(shù)評(píng)估371個(gè)結(jié)直腸癌患者樣品的MEG3表達(dá)，發(fā)現(xiàn)MEG3低表達(dá)是結(jié)直腸癌患者總生存率差的獨(dú)立預(yù)后因素。通過(guò)基因差異表達(dá)細(xì)胞系的建立和動(dòng)物模型實(shí)驗(yàn)，發(fā)現(xiàn)MEG3在體外和體內(nèi)抑制結(jié)直腸癌細(xì)胞遷移和轉(zhuǎn)移，并可能是通過(guò)下調(diào)Clusterin表達(dá)水平及其與Clusterin蛋白的直接結(jié)合引起的。

肌肉丙酮酸激酶同工酶2(pyruvate kinase isozyme type M2，PKM2)催化糖酵解的最后一步，在癌細(xì)胞的生長(zhǎng)、存活和代謝重編程中起關(guān)鍵作用。Zheng等[21]發(fā)現(xiàn),MEG3促進(jìn)miR-122的表達(dá)和成熟，而miR-122靶向PKM2 信使RNA(messenger RNA，mRNA)的3′非翻譯區(qū)抑制PKM2的表達(dá)，MEG3通過(guò)PKM2減少和肝癌細(xì)胞中PTEN的增加來(lái)抑制β聯(lián)蛋白活性，而起到腫瘤抑制劑的作用，可能為肝癌的治療提供潛在的治療靶點(diǎn)。

Zhu 等[4]在肝癌中發(fā)現(xiàn)，MEG3增強(qiáng)p53的穩(wěn)定性和轉(zhuǎn)錄活性，并且對(duì)p53轉(zhuǎn)錄活性的激活依賴于其結(jié)構(gòu)的完整性。MEG3還能與p53的中心序列特異性DNA結(jié)合結(jié)構(gòu)域結(jié)合，使p53的靶基因上調(diào)。并提出一種新的假設(shè)，MEG3和p53結(jié)合形成化合物被募集到特定靶基因，然后MEG3解離，并且p53開(kāi)始激活靶基因，發(fā)揮腫瘤抑制作用。

在消化系統(tǒng)腫瘤中MEG3的表達(dá)水平下調(diào)，并可能與基因甲基化相關(guān)。 MEG3可能直接靶向某些基因調(diào)控其表達(dá)，也可能作為內(nèi)源競(jìng)爭(zhēng)性RNA與某些microRNA結(jié)合，從而調(diào)節(jié)靶基因的表達(dá)。在消化系統(tǒng)腫瘤中MEG3的過(guò)表達(dá)通過(guò)抑制細(xì)胞的增殖、侵襲和遷移能力，以及抑制上皮-間充質(zhì)轉(zhuǎn)化，表現(xiàn)出腫瘤抑制的能力。

2.3MEG3與女性生殖系統(tǒng)腫瘤 Zhang等[22]發(fā)現(xiàn)，MEG3在乳腺癌組織中的表達(dá)明顯下調(diào)，并且MEG3水平與分化程度、TNM分期和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移顯著相關(guān)。Kaplan-Meier分析發(fā)現(xiàn)MEG3表達(dá)低的患者的總生存率和無(wú)進(jìn)展生存期差，而多變量Cox分析顯示，MEG3低表達(dá)可以作為乳腺癌患者5年總生存率和5年無(wú)進(jìn)展生存期的獨(dú)立不良預(yù)后因素。 Xiu 等[29]研究發(fā)現(xiàn)，MEG3的表達(dá)與上皮性卵巢癌(epithelial ovarian cancer，EOC)的腫瘤發(fā)生和進(jìn)展相關(guān)，MEG3 mRNA在EOC組織中低表達(dá)。MEG3表達(dá)的上調(diào)顯著抑制EOC細(xì)胞增殖，并可導(dǎo)致G2期阻滯和早期細(xì)胞凋亡增加，誘導(dǎo)細(xì)胞自噬。免疫組織化學(xué)分析顯示，MEG3過(guò)表達(dá)后自噬相關(guān)基因3和微管相關(guān)蛋白輕鏈3表達(dá)顯著升高，核糖核蛋白免疫共沉淀測(cè)定證實(shí)了MEG3和自噬相關(guān)基因3之間的功能性相互作用。從而表明MEG3的表達(dá)上調(diào)可能通過(guò)與自噬相關(guān)基因3的相互作用觸發(fā)自噬，從而抑制EOC的腫瘤發(fā)生和進(jìn)展。 MEG3可能作為EOC的潛在生物學(xué)標(biāo)志物。Zhang等[23]發(fā)現(xiàn)，宮頸癌組織中MEG3的表達(dá)顯著降低。Kaplan-Meier分析顯示，MEG3低表達(dá)組患者的無(wú)復(fù)發(fā)和總生存期明顯短于MEG3高表達(dá)組。多變量分析證實(shí)，MEG3是無(wú)復(fù)發(fā)存活的獨(dú)立預(yù)后標(biāo)志物。甲基化特異性PCR評(píng)估MEG3啟動(dòng)子的甲基化狀態(tài)發(fā)現(xiàn)宮頸癌與啟動(dòng)子高甲基化之間存在正相關(guān)，MEG3重新表達(dá)可以抑制宮頸癌細(xì)胞的增殖，MEG3甲基化是宮頸癌的危險(xiǎn)因素。MEG3甲基化是高危型人乳頭瘤病毒感染和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的危險(xiǎn)因素。Zhang 等[30]發(fā)現(xiàn)MEG3在宮頸癌組織中下調(diào)，MEG3低表達(dá)水平與腫瘤大小、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、高危型人乳頭瘤病毒感染和國(guó)際婦產(chǎn)科協(xié)會(huì)分期呈正相關(guān)，表明MEG3的下調(diào)可能與宮頸癌的發(fā)展有關(guān)。MEG3的過(guò)表達(dá)抑制細(xì)胞增殖，誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡，p53和胱天蛋白酶(caspase) 3的表達(dá)顯著增加。同時(shí)Pearson相關(guān)分析表明，miR-21-5p的表達(dá)與宮頸癌組織中的MEG3水平呈負(fù)相關(guān)，過(guò)往研究觀察到miR-21是宮頸癌中的一種oncomiR，基因轉(zhuǎn)染和敲除實(shí)驗(yàn)結(jié)果證明miR-21-5p與MEG3呈負(fù)相關(guān)，并且 miR-21-5p可以挽救MEG3對(duì)細(xì)胞增殖和凋亡的影響，miR-21-5p抑制至少部分地促成由MEG3誘導(dǎo)的p53積累。

以上所述，在女性生殖系統(tǒng)腫瘤中，MEG3的表達(dá)水平較正常組織降低，且與甲基化水平相關(guān)，過(guò)表達(dá)MEG3表現(xiàn)對(duì)腫瘤細(xì)胞抑制增殖，誘導(dǎo)凋亡及自噬的作用。統(tǒng)計(jì)分析發(fā)現(xiàn)MEG3低表達(dá)可能作為乳腺癌不良預(yù)后因素，可能成為EOC的潛在標(biāo)志物，MEG3甲基化可能是宮頸癌人乳頭瘤病毒感染和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的危險(xiǎn)因素。

2.4MEG3與神經(jīng)內(nèi)分泌系統(tǒng)腫瘤 甲基化在非功能性垂體腺瘤(nonfunctional pituitary adenoma，NFA)中沉默MEG3基因中起作用，而組蛋白脫乙?；彩鞘筃FA中的MEG3失活的表觀遺傳機(jī)制之一。Chunharojrith等[24]發(fā)現(xiàn)MEG3能夠明顯抑制腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)，誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞G1期停滯，MEG3對(duì)腫瘤的抑制需要功能性p53，p53的失活完全消除了MEG3對(duì)腫瘤的抑制，表明在NFA中MEG3可能通過(guò)p53通路發(fā)揮抑癌作用。

Li等[7]發(fā)現(xiàn)在膠質(zhì)瘤中，DNMT1的敲減能抑制神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞的生長(zhǎng)，并誘導(dǎo)膠質(zhì)瘤細(xì)胞的凋亡，逆轉(zhuǎn)MEG3啟動(dòng)子的甲基化，隨后恢復(fù)MEG3的表達(dá)。DNMT1介導(dǎo)的MEG3啟動(dòng)子甲基化沉默可能激活鼠雙微體2的表達(dá)。鼠雙微體2可以結(jié)合p53基因的啟動(dòng)子，抑制其轉(zhuǎn)錄，也可以通過(guò)泛素化作用降解p53蛋白，從而導(dǎo)致p53途徑的失活，參與腫瘤形成。MEG3的表達(dá)可以通過(guò)表觀遺傳修飾來(lái)恢復(fù)，這可能表明其具有神經(jīng)膠質(zhì)瘤的治療潛力。

胰腺神經(jīng)內(nèi)分泌腫瘤是由胰島細(xì)胞引起的罕見(jiàn)腫瘤。Zhang等[31]發(fā)現(xiàn)，異位表達(dá)MEG3后細(xì)胞周期相關(guān)蛋白(包括增殖細(xì)胞核抗原、周期蛋白 E1、周期蛋D1、CDK1和CDK4)均下調(diào)，包括Bax、caspase-3和caspase-9在內(nèi)的促凋亡蛋白則顯著上調(diào)，而抗凋亡蛋白Bcl-2被下調(diào)，且MEG3顯著減少細(xì)胞的遷移和侵襲。實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，miR-183是MEG3的直接靶標(biāo)。此外，人神經(jīng)系統(tǒng)特異表達(dá)基因腦蛋白I3(brain protein I3，BRI3)受miR-183的正調(diào)控，BRI3可能通過(guò)激活BON1細(xì)胞中p38/胞外信號(hào)調(diào)節(jié)激酶/Akt和Wnt/β聯(lián)蛋白信號(hào)通路而發(fā)揮腫瘤促進(jìn)作用。故而推測(cè)MEG3/miR-183/BRI3軸可能是胰腺神經(jīng)內(nèi)分泌腫瘤的關(guān)鍵因素。

Gao等[32]發(fā)現(xiàn)，MEG3啟動(dòng)子的高甲基化與視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤顯著相關(guān)。經(jīng)過(guò)DNA去甲基化試劑地西他濱(5-Aza-2′eoxycytidine，5-Aza-CdR)處理的細(xì)胞，MEG3表達(dá)顯著升高，并能顯著降低細(xì)胞增殖、增加早期凋亡細(xì)胞的數(shù)量。而敲除MEG3能夠逆轉(zhuǎn)5-Aza-CdR對(duì)MEG3重新表達(dá)的影響。這些結(jié)果表明，5-Aza-CdR在視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤中的腫瘤抑制作用部分歸因于MEG3重新表達(dá)，其可能存在的途徑如下：5-Aza-CdR→MEG3的啟動(dòng)子去甲基化→MEG3的上調(diào)→Wnt/β聯(lián)蛋白途徑的失活→視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤細(xì)胞的生長(zhǎng)抑制，為視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤中MEG3的機(jī)制提供了新的視角，并提示MEG3甲基化狀態(tài)的評(píng)估可能是確定視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤患者預(yù)后有用的生物學(xué)標(biāo)志物。

總結(jié)以上內(nèi)容發(fā)現(xiàn)，NFA中MEG3失活不僅僅由于甲基化，組蛋白脫乙?；彩钦{(diào)節(jié)MEG3表達(dá)的表觀遺傳機(jī)制之一，MEG3的異位表達(dá)可下調(diào)細(xì)胞周期相關(guān)蛋白并上調(diào)凋亡相關(guān)蛋白，抑制腫瘤細(xì)胞遷移和侵襲。去甲基化藥物地西他濱能恢復(fù)MEG3的表達(dá)并抑制細(xì)胞增殖、誘導(dǎo)早期凋亡，且地西他濱的作用依賴于MEG3的存在，提示地西他濱可能為治療與MEG3表達(dá)缺失相關(guān)的腫瘤提供新的思路。

2.5MEG3與其他腫瘤 Tian等[33]發(fā)現(xiàn)骨肉瘤組織中的lncRNA MEG3表達(dá)顯著降低。lncRNA MEG3低表達(dá)與晚期臨床分期和遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移密切相關(guān)，然而，lncRNA MEG3表達(dá)與其他臨床特征(如性別、年齡、腫瘤大小和解剖位置)無(wú)關(guān)，表明lncRNA MEG3可能參與骨肉瘤的發(fā)生和轉(zhuǎn)移。單變量分析顯示，lncRNA MEG3表達(dá)、臨床分期和遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移與骨肉瘤患者的總體存活率顯著相關(guān)，MEG3水平可能作為骨肉瘤患者預(yù)后不良的生物學(xué)標(biāo)志物。Yang等[9]分析了33例睪丸生殖細(xì)胞腫瘤(testicular germ cell tumor，TGCT)樣本中MEG3、miR-1297和PTEN的水平，發(fā)現(xiàn)MEG3水平顯著降低，而miR-1297水平在TGCT中無(wú)變化，TGCT中PTEN蛋白而非mRNA水平顯著降低。RNA免疫沉淀測(cè)試表明，miR-1297可與PTEN mRNA的3′非翻譯區(qū)結(jié)合，而miR-1297也可與MEG3結(jié)合，在TGCT中MEG3可能作為內(nèi)源競(jìng)爭(zhēng)性RNA與miR-1297結(jié)合，通過(guò)對(duì)PTEN/Akt通路的影響發(fā)揮腫瘤抑制作用。Luo 等[3]通過(guò)qRT-PCR檢測(cè)21例前列腺癌患者的MEG3表達(dá)水平，發(fā)現(xiàn)MEG3表達(dá)水平在前列腺癌組織中顯著下降。與缺乏MEG3表達(dá)的細(xì)胞系HepG2細(xì)胞相比，兩種雄激素依賴性前列腺癌細(xì)胞PC3和DU145表達(dá)更高水平的MEG3。 MEG3抑制PC3和DU145細(xì)胞的增殖、誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡、誘導(dǎo)Bax蛋白表達(dá)、抑制Bcl-2和周期蛋白 D1表達(dá)、激活caspase-3。MEG3誘導(dǎo)的PC3和DU145細(xì)胞凋亡與Bcl-2蛋白的下調(diào)和Bax蛋白的上調(diào)有關(guān)。然而，Bcl-2和Bax mRNA的表達(dá)卻無(wú)顯著變化，故可推測(cè)MEG3是在轉(zhuǎn)錄后的修飾中起作用。MEG3在前列腺癌組織中顯著下調(diào)，并在前列腺癌的發(fā)生和發(fā)展中發(fā)揮腫瘤抑制功能，為這種惡性腫瘤提供了一種潛在的有吸引力的治療方法。Jia等[34]評(píng)估76對(duì)舌鱗狀細(xì)胞癌(tongue squamous cell carcinoma，TSCC)和相鄰組織學(xué)正常組織中miR-26a和MEG3的表達(dá)水平，發(fā)現(xiàn)腫瘤組織中miR-26a和MEG3的平均表達(dá)水平顯著降低，兩者表達(dá)水平呈正相關(guān)，且與總體存活率預(yù)后不良相關(guān)。熒光素酶分析顯示，miR-26a可與DNMT3B的mRNA 3′非翻譯區(qū)結(jié)合，miR-26a過(guò)表達(dá)的TSCC細(xì)胞中DNMT3B蛋白的表達(dá)顯著降低。在SCC-15和CAL27細(xì)胞中增加外源miR-26a過(guò)表達(dá)或DNMT3B敲減時(shí)，內(nèi)源性MEG3的表達(dá)增加。miR-26a或MEG3在TSCC細(xì)胞中的過(guò)表達(dá)抑制細(xì)胞增殖和細(xì)胞周期進(jìn)程并促進(jìn)細(xì)胞凋亡，表明這些因子在TSCC發(fā)病機(jī)制中起重要的抗腫瘤作用。miR-26a和MEG3可能作為TSCC患者臨床預(yù)后的獨(dú)立生物學(xué)標(biāo)志物。

綜上所述，MEG3在骨肉瘤中表達(dá)降低，且可能作為骨肉瘤預(yù)后不良的生物標(biāo)志。TGCT中MEG3水平顯著降低，MEG3可能作為內(nèi)源競(jìng)爭(zhēng)性RNA 影響PTEN/Akt通路并發(fā)揮腫瘤抑制作用。MEG3在前列腺癌組織中顯著下調(diào)并可能在轉(zhuǎn)錄后水平起作用。在TSCC中miR-26a和MEG3的表達(dá)水平呈正相關(guān)，且其表達(dá)降低與不良預(yù)后相關(guān)，兩者過(guò)表達(dá)抑制細(xì)胞增殖和細(xì)胞周期進(jìn)程并促進(jìn)細(xì)胞凋亡?？傊?，現(xiàn)研究表明MEG3在各系統(tǒng)腫瘤中表達(dá)下調(diào)，甲基化和表觀遺傳調(diào)控參與MEG3的沉默。

3 小 結(jié)

MEG3在多種腫瘤組織及細(xì)胞系中表達(dá)減低，且與其基因啟動(dòng)子處于高甲基化狀態(tài)顯著相關(guān)，MEG3的低表達(dá)與某些腫瘤TNM分期或預(yù)后不良相關(guān)，展現(xiàn)出其作為腫瘤診斷及判斷預(yù)后標(biāo)志物的潛力。MEG3低表達(dá)可能促進(jìn)腫瘤細(xì)胞增殖、遷移、侵襲的能力并可能抑制細(xì)胞凋亡，從而參與腫瘤發(fā)生、發(fā)展的生物學(xué)進(jìn)程，而過(guò)表達(dá)MEG3可能通過(guò)轉(zhuǎn)錄調(diào)控或表觀遺傳學(xué)調(diào)控影響并調(diào)節(jié)Rb途徑、p53途徑、PTEN/PI3K/Akt途徑、Wnt/β聯(lián)蛋白信號(hào)通路，及與microRNA相互作用并靶向某些抑癌基因發(fā)揮腫瘤抑制作用。目前研究結(jié)果表明，MEG3有望成為腫瘤治療的新靶標(biāo)，并且近些年關(guān)于MEG3與某些microRNA相互作用的研究成為研究MEG3抗腫瘤作用機(jī)制的新熱點(diǎn)，MEG3作為ceRNA在腫瘤抑制中發(fā)揮作用似乎出現(xiàn)更多的證據(jù)。然而，目前對(duì)于MEG3依然處于研究階段，其在腫瘤中的具體作用機(jī)制尚期待更多的探索和挖掘。