糖尿病血管并發(fā)癥微小RNA研究進(jìn)展

范澤楠，賀朝暉綜述，方 丹,3審校

（西南醫(yī)科大學(xué)：1臨床醫(yī)學(xué)系2015級(jí)；2藥物研究中心；3心血管藥理系，四川瀘州 646000）

糖尿病主要包括1型糖尿?。═1DM）、2型糖尿?。═2DM）、妊娠期糖尿病及其他特殊類(lèi)型。其中，尤以1型和2型DM對(duì)人體血管系統(tǒng)產(chǎn)生的影響較大，從而導(dǎo)致嚴(yán)重微血管并發(fā)癥，例如糖尿病視網(wǎng)膜病變(影響著1/3糖尿病患者)、腎臟相關(guān)疾病(糖尿病患者終末期腎病的患病率較非糖尿病患者高出10倍)和神經(jīng)病變(全球每30 s有1個(gè)糖尿病患者因此截肢)；以及導(dǎo)致糖尿病大血管并發(fā)癥如冠狀動(dòng)脈疾病、動(dòng)脈粥樣硬化、高血壓和中風(fēng)等[1-3]。此外，糖尿病腎病等微血管并發(fā)癥與心血管疾病的加速發(fā)展有著密切的關(guān)系。最新研究數(shù)據(jù)揭示，2017年用于糖尿病的醫(yī)療總支出達(dá)7270億美元，全球已有4.25億糖尿病患者；目前，中國(guó)有1.14億糖尿病患者，位列全球首位，該數(shù)目在2045年預(yù)計(jì)會(huì)增至1.19億[1]。我國(guó)的糖尿病現(xiàn)狀嚴(yán)峻至此，可見(jiàn)其防治至關(guān)重要。

研究表明，糖尿病患者血管并發(fā)癥發(fā)病率的增加與多種病理因素（如高血糖、高脂血癥、晚期糖基化終末產(chǎn)物、生長(zhǎng)因子、炎性細(xì)胞因子和趨化因子等）關(guān)系密切[4-5]。如果大多數(shù)糖尿病患者的血管并發(fā)癥不能盡早被給予治療，其生活質(zhì)量的提高將無(wú)從談起，甚至其生命也會(huì)受到相當(dāng)威脅。此外，“代謝記憶”現(xiàn)象也逐漸引起臨床研究關(guān)注，即在治療過(guò)程中，部分糖尿病患者盡管血糖得到了有效控制，但血管并發(fā)癥的發(fā)展卻仍在繼續(xù)[6]。因此，為了尋求更佳的治療方法，更深入探尋在糖尿病病理狀況下血管并發(fā)癥加速發(fā)展的分子調(diào)控機(jī)制及作用機(jī)理的重要性不必贅述。本文對(duì)糖尿病微血管并發(fā)癥病理過(guò)程中的miRNA研究進(jìn)展作出綜述，揭示其在基因表達(dá)調(diào)控網(wǎng)絡(luò)及對(duì)靶基因的精細(xì)調(diào)控機(jī)制中扮演的角色，展望其作為糖尿病微血管并發(fā)癥的臨床診斷和治療新靶點(diǎn)的廣闊臨床研究前景。

1 微小RNA簡(jiǎn)介

微小RNAs(micro RNAs,miRNAs)是由約20～22個(gè)核苷酸組成的內(nèi)源性非編碼RNA，在生物體內(nèi)參與調(diào)節(jié)著眾多關(guān)鍵的細(xì)胞生物學(xué)功能，扮演著重要角色[7]。20世紀(jì)90年代初，研究者首次在秀麗隱桿線蟲(chóng)中發(fā)現(xiàn)了第一個(gè)miRNA，命名為miRNA-Lin-4[8]。據(jù)估計(jì)[9]，目前已經(jīng)發(fā)現(xiàn)的人類(lèi)miRNA超過(guò)1000種，它們參與調(diào)控了約60%的人類(lèi)蛋白編碼基因，影響靶蛋白功能。miRNA的生物學(xué)合成主要涉及在RNA聚合酶Ⅱ的作用下，細(xì)胞核基因組中miRNA基因轉(zhuǎn)錄合成初級(jí)RNA（pri-miRNA），在Drosha-DGCR8復(fù)合體的切割效應(yīng)下，初級(jí)miRNA在核內(nèi)形成約70 nt且具備莖環(huán)構(gòu)造的前體miRNA，隨即在RanGTP/Exprotin-5復(fù)合物的介導(dǎo)下由核入胞，被Dicer酶切割為雙鏈miRNA（miRNA★復(fù)合體）后又在RNA解旋酶的作用下分離，在AGO蛋白和RNA解旋酶的幫助下，成熟的miRNA單鏈以不對(duì)稱的方式組裝成RNA誘導(dǎo)的緘默復(fù)合物（RISC）中，并通過(guò)與目標(biāo)基因的3'-UTR區(qū)堿基互補(bǔ)配對(duì)來(lái)引導(dǎo)RISC復(fù)合物抑制目標(biāo)mRNA翻譯，動(dòng)物miRNA與目的mRNA堿基配對(duì)水平相對(duì)較低，其中多數(shù)是為了抑制翻譯[10-12]。

研究表明，在許多疾病生理、病理調(diào)節(jié)過(guò)程中都有miRNA的身影，一些miRNA在糖尿病及血管相關(guān)并發(fā)癥發(fā)生發(fā)展過(guò)程中扮演著重要調(diào)控角色，然而其具體分子調(diào)控機(jī)制遠(yuǎn)未研究清楚。因此，明確miRNA與糖尿病血管并發(fā)癥相關(guān)靶標(biāo)的作用及分子機(jī)制顯得尤其必要，這將為確定新型糖尿病血管并發(fā)癥生物標(biāo)志物及治療靶點(diǎn)提供一定的理論基礎(chǔ)及實(shí)踐依據(jù)[13-14]。

2miRNA與糖尿病血管并發(fā)癥

2.1 糖尿病性視網(wǎng)膜病變miRNA研究進(jìn)展

糖尿病視網(wǎng)膜病變（DR），糖尿病常見(jiàn)微血管并發(fā)癥之一，是患者致盲的可能原因[15]。部分研究已經(jīng)揭示了miRNA在糖尿病視網(wǎng)膜病變過(guò)程中所發(fā)揮的重要調(diào)節(jié)作用。例如，Ye等[16]報(bào)道，miR-1273g-3p在鏈脲佐菌素（STZ）誘導(dǎo)的糖尿病大鼠的視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞（RPE）中高度表達(dá)，推測(cè)其是通過(guò)調(diào)控自噬溶酶體通路參與DR的進(jìn)展，該研究初步揭示了DR治療的新靶點(diǎn)。Zhao等[17]研究發(fā)現(xiàn)，在高糖（HG）處理的人RPE細(xì)胞中，miR-219-5p水平顯著上調(diào)，并且肝臟受體同源物1(LRH-1)是其直接靶標(biāo)，HG處理后，靶標(biāo)LRH-1表達(dá)呈顯著下調(diào)趨勢(shì)，進(jìn)一步研究揭示miR-219-5p抑制劑可顯著抑制HG誘導(dǎo)的ARPE-19細(xì)胞凋亡，提高細(xì)胞存活率，并且LRH-1/Wnt/β-Catenin信號(hào)通路受到miR-219-5p抑制作用，但LRH 1抑制可消除miR-219-5p抑制劑對(duì)ARPE-19細(xì)胞的影響，綜合提示miR-219-5p能夠通過(guò)調(diào)節(jié)LRH-1/Wnt/β-Catenin信號(hào)通路進(jìn)而調(diào)控人RPE細(xì)胞凋亡，參與DR的發(fā)生發(fā)展。Zhang等[18]研究發(fā)現(xiàn)miR-495在HG處理的視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞（RGCs）中表達(dá)顯著上調(diào)，抑制miR-495表達(dá)可減少RGCs的凋亡。值得注意的是，miR-495對(duì)Notch1表達(dá)和Notch信號(hào)通路存在負(fù)性調(diào)控，而miR-495表達(dá)下調(diào)將可進(jìn)一步抑制PTEN表達(dá)，促進(jìn)Akt活化，敲除Notch1基因后，下調(diào)miR-495帶來(lái)的保護(hù)作用被抑制。故而研究者認(rèn)為，下調(diào)miR-495可以通過(guò)靶向Notch1調(diào)控PTEN/Akt信號(hào)，從而減輕HG誘導(dǎo)的RGCs凋亡，這為理解HG誘導(dǎo)的RGCs凋亡的發(fā)病機(jī)制提供了新的見(jiàn)解。

2.2 糖尿病腎病miRNA研究進(jìn)展

研究表明，miRNA可作為糖尿病腎病(DN)的治療標(biāo)志物及治療標(biāo)靶，腎小球系膜區(qū)和足細(xì)胞等處細(xì)胞外基質(zhì)(ECM)蛋白的堆積是DN的主要特征[19]。Chen等[20]研究發(fā)現(xiàn)，DN患者血清和腎組織、STZ誘導(dǎo)的DN大鼠腎組織和HG處理的足細(xì)胞中.miR-21表達(dá)上調(diào)，miR-21缺失可抑制STZ誘導(dǎo)的DN大鼠促炎因子（IL-1β、TNF-α）分泌，減輕腎臟損傷。TIMP3過(guò)表達(dá)可抑制HG誘導(dǎo)的炎癥反應(yīng)和足細(xì)胞凋亡。此外，TIMP3的上述抑制作用隨著miR-21的增加而減輕。miR-21通過(guò)靶向TIMP3抑制STZ誘導(dǎo)的DN大鼠和HG處理的足細(xì)胞的DN進(jìn)程，這可能提供了DN治療新的靶點(diǎn)。Zanchi等[21]研究發(fā)現(xiàn)，DN大鼠模型中miR-184水平相較于對(duì)照組顯著升高，而脂質(zhì)磷酸酶3（LPP3）水平下降。其抑制劑可明顯改善大鼠腎小管間質(zhì)纖維化及LPP3水平，認(rèn)為miR-184可能通過(guò)LPP3作為下游效應(yīng)因子，促進(jìn)腎小管間質(zhì)纖維化。Gholaminejad等[22]通過(guò)meta分析得出5個(gè)與DN顯著相關(guān)且持續(xù)失調(diào)的miRNA，其中包括三種上調(diào)miRNA(miR-21-5p，miR-146a-5p,miR-10a-5p)和兩種下調(diào)miRNA(miR-25-3p和miR-26a-5p)，未來(lái)的研究應(yīng)集中于發(fā)現(xiàn)它們對(duì)DN的潛在作用及其作為DN生物標(biāo)志物和治療介質(zhì)的臨床價(jià)值。近期，Jia等[23]研究認(rèn)為，含有miRNA的細(xì)胞外囊泡(EVs)是一種新型的細(xì)胞通訊方式，可能與DN期間腎臟纖維化不可避免的擴(kuò)大有關(guān)，腸促胰島素類(lèi)似物（Exendin-4）抑制EV miR-192從HG誘導(dǎo)的腎小管上皮細(xì)胞向正常細(xì)胞的轉(zhuǎn)移，從而抑制胰升糖素樣肽-1受體基因（GLP1R）下調(diào)，保護(hù)腎細(xì)胞。

2.3 糖尿病下肢缺血miRNA研究進(jìn)展

肢體缺血和血管內(nèi)皮功能障礙是糖尿病的另一個(gè)并發(fā)癥。Caporali等[24]發(fā)現(xiàn)在HG培養(yǎng)和缺血相關(guān)細(xì)胞饑餓條件下，內(nèi)皮細(xì)胞中miR-503表達(dá)水平上調(diào)。阻斷miR-503，內(nèi)皮細(xì)胞的體外功能可以得到提高。他們驗(yàn)證了CCNE1和cdc25a是miR-503的直接目標(biāo)，在HG的作用下，miR-503的水平有一定下調(diào)。在STZ糖尿病小鼠的缺血肢體肌肉中，其表達(dá)水平也有所上調(diào)。此外，將一種基于miR-503誘餌的腺病毒遞送到糖尿病小鼠的缺血肌肉中，可以糾正這些小鼠缺血后血管生成的損傷。值得注意的是，在人類(lèi)糖尿病患者獲得的肌肉樣本中，miR-503水平的水平與cdc25蛋白水平呈負(fù)相關(guān)，這提示miR-503可能是糖尿病并發(fā)肢體嚴(yán)重缺血患者的潛在希望。糖尿病周?chē)鷦?dòng)脈疾病(PAD)患者缺血后新生血管受損，Chen等[25]研究發(fā)現(xiàn)，在培養(yǎng)的糖尿病小鼠內(nèi)皮細(xì)胞中，miR-133a的拮抗作用導(dǎo)致活性氧水平降低，一氧化氮和cGMP水平升高，新生血管增多，而miR-133a過(guò)表達(dá)會(huì)損害血管生成，降低非糖尿病模型的GCH1、NO和cGMP水平，認(rèn)為糖尿病誘導(dǎo)的miR-133a上調(diào)是通過(guò)減少內(nèi)皮細(xì)胞NO合成而抑制PAD中的血管新生。

2.4 糖尿病性心臟病miRNA研究進(jìn)展

研究表明[26]，導(dǎo)致血管細(xì)胞多種炎癥及纖維化途徑的異常信號(hào)多由高血糖激活，而這將導(dǎo)致心血管并發(fā)癥（包括冠心病、中風(fēng)、高血壓和動(dòng)脈粥樣硬化）的增加。此外，糖尿病性心肌病作為糖尿病的并發(fā)癥之一，與心力衰竭關(guān)系密切。

Fomison等[27]對(duì)從糖尿病心臟分離的高糖和心臟祖細(xì)胞(CPCs)培養(yǎng)的成人心肌細(xì)胞的分析證實(shí)，促凋亡caspase-3/7活性顯著增加可能與miR-34a顯著上調(diào)和SIRT1下調(diào)有關(guān)。雖然治療性抑制miR-34a活性可以恢復(fù)心肌細(xì)胞和CPCs中SIRT1的表達(dá)，但p53表達(dá)在心肌細(xì)胞中進(jìn)一步上調(diào)，而在CPCs中則相反下調(diào)。miR-34a抑制在p53增加的情況下仍能顯著降低高糖誘導(dǎo)的心肌細(xì)胞凋亡，但這種效應(yīng)在CPCs中沒(méi)有被觀察到，其可能與miR-34a受到抑制后CPCs的增殖減少有關(guān)。因抑制miR-34a活性的作用隨細(xì)胞類(lèi)型不同而不同，故在引入其治療時(shí)需要消除非靶向效應(yīng)。AMP脫氨酶(AMPD)在腺嘌呤核苷酸代謝中起著至關(guān)重要的作用,Tatekoshi等[28]研究發(fā)現(xiàn)，在2型糖尿病OLETF模型大鼠心臟壓力超載條件下，ATP消耗和收縮功能障礙與AMPD活性上調(diào)有關(guān)，OLETF和LETO心肌中AMPD3的mRNA水平相似、泛素化程度相當(dāng)，與LETO相比，OLETF中57個(gè)miRNA下調(diào)，其中miR-301b與AMPD3 mRNA的3'UTR相互作用。在H9c2細(xì)胞中，miR-301b抑制劑及模擬物能分別顯著提高和降低AMPD3蛋白水平，miR-301b-AMPD3軸可能是干預(yù)糖尿病心臟內(nèi)能量代謝的一種新的治療靶點(diǎn)。

3 糖尿病血管并發(fā)癥miRNA與遺傳學(xué)及表觀遺傳學(xué)之間的關(guān)聯(lián)

DN等并發(fā)癥似與遺傳易感性有關(guān)，包括特定臨床隊(duì)列中的全基因組相關(guān)研究(GWAS)在內(nèi)的許多嘗試已經(jīng)促成了一些候選基因和序列變異的識(shí)別[29]。然而，此類(lèi)基因和變異體的功能及病理作用的界定還尚未明確，因此遺傳易感性的具體參與似乎更復(fù)雜而或更小。研究[30]表明，表觀遺傳學(xué)對(duì)此也十分重要，因此，具有表觀作用機(jī)制的miRNA也應(yīng)被考慮進(jìn)來(lái)。值得一提的是，包括miRNA、表觀遺傳學(xué)和遺傳學(xué)在內(nèi)的多種因素之間可能存在新的相互作用機(jī)制。正如前述，染色質(zhì)中具有表觀遺傳功能的基因可能是直接靶向和下調(diào)的miRNA，染色質(zhì)的重塑和基因表達(dá)可能受到影響。在糖尿病小鼠的VSMC中，miR-125 b相對(duì)于對(duì)照組上調(diào)，并且也有可能靶向染色質(zhì)組蛋白h3k9甲基轉(zhuǎn)移酶suv39h1，增加糖尿病細(xì)胞炎癥基因的表達(dá)[31]。Sun等[32]報(bào)道，在T2DM患者血漿中，miR-375存在過(guò)表達(dá)，且其啟動(dòng)子低甲基化，這可能參與miR-375的表達(dá)調(diào)控，并參與T2DM的發(fā)病機(jī)制。因此，通過(guò)下調(diào)關(guān)鍵細(xì)胞抑制因子，miRNA可以作為促進(jìn)染色質(zhì)的表觀遺傳去抑制機(jī)制，導(dǎo)致與糖尿病并發(fā)癥的病理相關(guān)的基因的誘導(dǎo)。

盡管有報(bào)告稱有一些單核苷酸多態(tài)性(SNPs)與各種疾病的相關(guān)，但它們很少與疾病發(fā)病率直接相關(guān)。此外，迄今為止，大多數(shù)遺傳研究已經(jīng)評(píng)估了基因編碼區(qū)的SNPs。另一方面，Ning等[33]研究表明，SNPs可能在非編碼區(qū)域發(fā)揮重要作用，包括在啟動(dòng)子、增強(qiáng)子和miRNA種子區(qū)域。由于miRNA可以通過(guò)目標(biāo)基因的3'非翻譯區(qū)來(lái)影響基因表達(dá)，如果在miRNA處理位點(diǎn)周?chē)虺墒斓膍iRNA種子序列存在任何序列變異，miRNA的生物合成及其功能和目標(biāo)基因?qū)?huì)發(fā)生巨大變化，它可能會(huì)通過(guò)改變組織和細(xì)胞基因表達(dá)譜從而影響疾病的易感性。因此，miRNA種子序列的SNPs和變異值得被關(guān)注，因?yàn)樗赡芙o我們帶來(lái)更多的驚喜。

除了遺傳易感性之外，其他因素，特別是環(huán)境和表觀遺傳學(xué)，可能提供“染色質(zhì)二次打擊”，存在將有關(guān)于疾病的SNPs轉(zhuǎn)化為導(dǎo)致疾病SNPs的功能。Miao等[34]的研究中，將1型糖尿病患者的血液?jiǎn)魏思?xì)胞的組蛋白修飾情況與正常志愿者做出一定的比較，發(fā)現(xiàn)兩個(gè)MHC位點(diǎn)基因dr B1和dq B1的增強(qiáng)子區(qū)域的組蛋白乙?；酱嬖陲@著差異，這與1型糖尿病高度相關(guān)。Sapienza等[35]研究比較了糖尿病患者和非糖尿病腎病患者唾液樣本中的DNA甲基化。一些差異甲基化候選基因曾被報(bào)道過(guò)與腎臟疾病相關(guān)。目前正在進(jìn)行一些努力，以評(píng)估存檔的基因組DNA中的表觀遺傳變化(如DNA甲基化)，以及各種并發(fā)癥的糖尿病患者的大型臨床組群的組織和血液細(xì)胞RNA中的miRNA分布情況。大多數(shù)情況下，因這些患者的遺傳數(shù)據(jù)已能被獲得，故而在整個(gè)測(cè)序過(guò)程、實(shí)驗(yàn)證明以及由先進(jìn)的基因組學(xué)、轉(zhuǎn)錄組學(xué)、外遺傳基因組學(xué)和計(jì)算方法輔助的電子/系統(tǒng)生物學(xué)方法的數(shù)據(jù)集上的數(shù)據(jù)集的整合，無(wú)疑將會(huì)產(chǎn)生重要的新信息。這些新的方法將極大提高對(duì)未知領(lǐng)域的探索，加速發(fā)現(xiàn)臨床急需的治療糖尿病并發(fā)癥的新療法。

4 miRNA作為糖尿病血管并發(fā)癥新型生物標(biāo)記物

近年來(lái)，細(xì)胞、組織和體液中的miRNA檢測(cè)技術(shù)得到了一定發(fā)展，包括敏感的定量PCR、微陣列以及高通量的深度測(cè)序。因此，開(kāi)發(fā)miRNA作為人類(lèi)疾病和組織損傷的敏感生物標(biāo)志物潛力巨大。由于miRNA是相對(duì)穩(wěn)定和容易量化的，并且是以血漿和尿液的非侵入方式，這可能滿足了對(duì)糖尿病并發(fā)癥的早期檢測(cè)的生物標(biāo)記的關(guān)鍵需求，能夠可以極大地促進(jìn)長(zhǎng)期的臨床管理。報(bào)道[36-38]表明，血液中循環(huán)的miRNA可以是癌癥、組織損傷等敏感的生物標(biāo)志物。Fomison等[27]研究發(fā)現(xiàn)，相較于非糖尿病對(duì)照組，miR-34a水平在無(wú)癥狀2型糖尿病患者早期循環(huán)中顯著升高，且其同時(shí)在2型糖尿病患者心臟中顯著上調(diào)，這極有可能與心肌細(xì)胞的凋亡相關(guān)，從而作為糖尿病心臟病的基礎(chǔ)，故而miR-34a作為糖尿病心臟病的早期診斷的價(jià)值值得探索。Alkafaji等[39]報(bào)道，在微白蛋白尿和大白蛋白尿的DN患者中，血液miR-377水平與患者腎功能呈負(fù)相關(guān)，而與白蛋白尿的嚴(yán)重程度存在一定的正相關(guān)，而血液miR-192水平與白蛋白尿嚴(yán)重程度呈負(fù)相關(guān)，與腎功能呈正相關(guān)，基于血液的miR-377和miR-192可能作為早期檢測(cè)DN的潛在生物標(biāo)志物。DN患者尿液中miRNA譜也發(fā)生改變[40]。Mazzeo等[41]通過(guò)研究發(fā)現(xiàn)，miR-150-5p、miR-21-3p和 miR-30b-5p可能是糖尿病視網(wǎng)膜病變發(fā)病的潛在生物標(biāo)志物。

這些miRNA作為檢測(cè)相關(guān)糖尿病并發(fā)癥的早期階段的生物標(biāo)志物的價(jià)值不可限量。與腎、血管和血細(xì)胞相關(guān)的miRNA可以在血清和尿液樣本中被檢測(cè)，這得益于各種運(yùn)輸機(jī)制。當(dāng)然，應(yīng)當(dāng)注意到循環(huán)miRNA并不總是與組織水平相關(guān)。然而，體液中循環(huán)miRNA的評(píng)價(jià)作為糖尿病并發(fā)癥的診斷生物標(biāo)志物的未來(lái)仍然可期。

5 展 望

預(yù)防或延緩并發(fā)癥的進(jìn)展是糖尿病臨床管理的主要目標(biāo)，miRNA靶向與常規(guī)藥物結(jié)合治療可能是當(dāng)前臨床診治的一個(gè)新途徑。miRNA整個(gè)信號(hào)通路因?yàn)槠鋸?fù)雜但精密的調(diào)節(jié)機(jī)制而在多種病理過(guò)程中都有希望成為很有效的治療藥物(miRNA類(lèi)似物)或治療靶點(diǎn)(antimiRs)。同時(shí)，RNA分子輸送技術(shù)的日益提升使得基于miRNA的疾病治療方案的現(xiàn)實(shí)性也隨之攀升。

近年來(lái)，RNAi基因治療技術(shù)日新月異，這使臨床有可能使用RNA分子遞送特定的miRNA基因藥物來(lái)治療糖尿病及其血管并發(fā)癥，深入了解糖尿病血管并發(fā)癥病理過(guò)程分子機(jī)制可以為相關(guān)miRNA藥物研發(fā)打下基礎(chǔ)。此外，miRNA相關(guān)藥物的研發(fā)也離不開(kāi)對(duì)糖尿病患者樣本深入且系統(tǒng)的分析，并通過(guò)體內(nèi)和體外模型闡明了目標(biāo)miRNA與糖尿病血管并發(fā)癥之間的生物學(xué)關(guān)系和發(fā)病機(jī)制。目前，可供檢索的公共數(shù)據(jù)庫(kù)繁多，可以查詢不同糖尿病患者正常組織與血管病變組織的基因組學(xué)及蛋白質(zhì)組學(xué)的相關(guān)數(shù)據(jù)。通過(guò)數(shù)據(jù)庫(kù)分析與分子實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證相結(jié)合，可以鑒定出一些臨床上有希望的miRNA候選。下一個(gè)主要挑戰(zhàn)包括對(duì)體內(nèi)使用的miRNA類(lèi)似物及抗miRS進(jìn)行化學(xué)修飾以增加其穩(wěn)定性，以及藥物遞送系統(tǒng)的選擇和優(yōu)化。

2018年8月，美國(guó)食品和藥物管理局批準(zhǔn)了首款用于治療成人遺傳性轉(zhuǎn)甲狀腺素蛋白淀粉變性的小干擾RNA藥物。Alnylam公司的產(chǎn)品patisiran（商品名Onpattro）RNA獲FDA批準(zhǔn)上市，這成為小干擾RNA藥物發(fā)展的里程碑，它標(biāo)志著RNA干擾技術(shù)在臨床治療中的驗(yàn)證。本研究相信，小核酸藥物黃金時(shí)代已經(jīng)到來(lái)，有關(guān)專家預(yù)測(cè)，2025年全球市場(chǎng)規(guī)模將遠(yuǎn)遠(yuǎn)超過(guò)100億美元。近年來(lái)，RNAi藥物的研發(fā)遭遇瓶頸，副作用便是其最大的障礙。然而，隨著目前RNAi技術(shù)的進(jìn)步、藥物遞送系統(tǒng)的突破、新產(chǎn)品的獲批，RNAi藥物將最終迎來(lái)曙光。

6 結(jié)論

RNAi藥物將在未來(lái)迎來(lái)快速發(fā)展，這將是一個(gè)迅猛前進(jìn)的領(lǐng)域。目前，一些miRNA基因藥物的臨床試驗(yàn)獲得迅猛發(fā)展，這從另一個(gè)方向揭示了靶向miRNA的治療是未來(lái)的希望。隨著更多地了解miRNA在體外和體內(nèi)精細(xì)具體負(fù)責(zé)的分子調(diào)控機(jī)制，研究將能夠更好地利用它們作為非侵入性生物標(biāo)記物，乃至研發(fā)更好的基于miRNA基因治療糖尿病及其血管并發(fā)癥的體內(nèi)遞送方法。