5330例布魯菌病初篩檢測結(jié)果分析

栗紹剛，吳趙永，李靜宜，郭東星，辛德莉，李丹

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5330例布魯菌病初篩檢測結(jié)果分析

栗紹剛，吳趙永，李靜宜，郭東星，辛德莉，李丹

100051 北京，首都醫(yī)科大學(xué)附屬北京友誼醫(yī)院/北京熱帶醫(yī)學(xué)研究所/熱帶病防治北京市重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室

分析北京市熱帶醫(yī)學(xué)研究所 2013 – 2016 年布魯菌病血清學(xué)檢測結(jié)果，為該病的防治及預(yù)防提供實(shí)驗(yàn)室依據(jù)。

對疑似布魯菌病病例進(jìn)行血清學(xué)檢測，采用虎紅平板凝集試驗(yàn)檢測布魯菌特異性抗體；采用卡方檢驗(yàn)計(jì)數(shù)資料。

2013 – 2016 年北京熱帶醫(yī)學(xué)研究所熱帶病門診布魯菌病初篩患者共 5330 例，血清學(xué)陽性率為 8.48%，男性患者陽性率為 10.89%，女性為 4.93%，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；青中年陽性率居高，50~ 年齡組陽性率最高，為 13.51%，10~ 年齡組最低，為 2.79%，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；7 月份的陽性率最高，為 11.23%，11 月份的陽性率最低，為 6.11%。

北京周邊地區(qū)近四年布魯菌病血清陽性患者逐漸增多，陽性率居高不下，應(yīng)引起衛(wèi)生防控部門的重視，加大監(jiān)控和防治力度，有效降低北京周邊地區(qū)布魯菌人群傳染危害。

布魯桿菌??； 血清學(xué)檢驗(yàn)； 虎紅平板凝集試驗(yàn)

隨著“一帶一路”戰(zhàn)略作為國家頂層戰(zhàn)略的提出，與沿線國家的經(jīng)濟(jì)文化等交流活動(dòng)日益頻繁，人員感染傳染病的風(fēng)險(xiǎn)日益增加，相關(guān)疾病的初篩檢查的需求日益迫切，對疫情信息的總結(jié)也尤為重要。

布魯菌?。˙rucellosis，簡稱布病）是由布魯菌感染引起的人畜共患病。布魯菌病是一種全球性分布的傳染性疾病，根據(jù)世界衛(wèi)生組織（WHO）的報(bào)道，每年全世界范圍的新增病例超過 50 萬[1-3]。在我國，布魯菌病被列為乙類傳染病，多個(gè)?。ㄊ?、自治區(qū)）都有不同程度的布魯菌病的發(fā)生和流行[4]。我國布魯菌病疫情以 20 世紀(jì) 50 – 60 年代最為嚴(yán)重，70 – 80 年代下降，90 年代中后期疫情反彈，2000 年以后發(fā)病逐年增多，至 2008 年全國布魯菌病發(fā)病率超歷史水平，布魯菌病也成為國內(nèi)唯一疫情超歷史水平的傳統(tǒng)傳染病[5-7]。

傳統(tǒng)的布魯菌檢測方法是在固體培養(yǎng)基上分離病原，通過肉眼觀察菌落形態(tài)、染色特征等鑒別。最常用的是用血液進(jìn)行培養(yǎng)，此外骨髓、膿液、關(guān)節(jié)液、滑囊液均有報(bào)道可分離出布魯菌[5-6]。這種培養(yǎng)分離鑒定布魯菌的方法穩(wěn)定可靠，被稱為“金標(biāo)準(zhǔn)”。但是因?yàn)椴剪斁L比較慢，鑒定的周期比較長，一般需要 1 ~ 2 周，有時(shí)可達(dá) 40 多天，不能及時(shí)診斷是否被感染，而且布魯菌的感染風(fēng)險(xiǎn)以及對實(shí)驗(yàn)室條件要求高，需要在 P2 以上實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行，有很大的局限性，難以推廣。

目前，臨床上診斷布魯菌病最常用的是血清學(xué)檢測，通過檢測樣本中的抗體來診斷。但是，血清學(xué)檢測也存在特異性和敏感性不足的缺點(diǎn)，大多數(shù)作為初檢和普檢使用[7]。

虎紅平板凝集試驗(yàn)（RBPT）是將具有優(yōu)良抗原性的布魯菌菌株通過分離、培養(yǎng)、滅活后收集菌體并且染色，將其懸浮于乳酸緩沖液中，滅活帶色的布魯菌抗原與待檢血清混合，如果待檢血清中存在布魯菌抗體，則發(fā)生肉眼可見的凝集反應(yīng)。此方法簡便易行、成本低廉，適用于布魯菌病的大面積檢疫篩查。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 對象 2013 年 1 月 – 2016 年 12 月北京熱帶醫(yī)學(xué)研究所熱帶病門診收治的可疑布魯菌病患者 5330 例，分離血清進(jìn)行血清學(xué)檢測。

1.1.2 試劑 布魯菌抗體檢測試劑盒（虎紅平板凝集法）購自遼寧迪浩生物科技有限公司。

1.2 方法

采用平板凝集實(shí)驗(yàn)（虎紅試驗(yàn)）檢測布魯菌特異性抗體。在玻璃片分格外標(biāo)記待檢血清樣本編號，以臨床確診布魯菌病患者血清為陽性對照，以健康人血清為陰性對照，然后在相應(yīng)格子內(nèi)加入 0.03 ml 樣本、陽性或陰性對照，每個(gè)格子中再加入虎紅平板凝集抗原 0.03 ml，搖勻，在 5 min 內(nèi)判定結(jié)果。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

計(jì)數(shù)資料比較采用卡方檢驗(yàn)，以< 0.05 為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

血清虎紅實(shí)驗(yàn)初篩 5330 例，陽性 452 例，陽性率為 8.48%。

2.1 性別分布

5330 例初篩的患者中，男性 3178 人，血清學(xué)陽性 346 份，陽性率 10.89%；女性 2152 人，陽性 106 份，陽性率為 4.93%，男性明顯高于女性，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2= 58.76，< 0.001）。

2.2 年齡分布

5330 例患者中有 9 例缺失年齡資料，在可統(tǒng)計(jì)的 5321 例患者中以青中年為主，以50~ 年齡組陽性率最高，為 13.51%，10~ 年齡組最低，為2.79%（表 1），差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2= 113.92，< 0.001）。

2.3 時(shí)間分布

5330 例初篩病例中血清陽性的時(shí)間分布（表 2）不具有明顯的差異性，全年中有 2 個(gè)月陽性率超過了 10%。7 月份的陽性率最高，為 11.23%，5 月份和 8 月份次之，分別為 10.41% 和 9.73%，11 月份的陽性率最低，為 6.11%，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2= 15.684，= 0.153）。

2.4 2013 – 2016 年篩查陽性率走勢

5330 例初篩病例年度陽性率分別為：2013 年 10.67%，2014 年 10.84%，2015 年7.95%，2016 年5.78%（圖 1），差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2= 30.86，< 0.001）。

3 討論

布魯菌病是目前世界上流行最廣、危害最大的人畜共患傳染病之一，全年均可發(fā)病，但以家畜生產(chǎn)季節(jié)為多見。布魯菌病在我國被定為乙類傳染病，20 世紀(jì) 50 – 60 年代得到了基本的控制，但在 90 年代后病例逐漸增多，發(fā)病情況呈持續(xù)增加的趨勢[8]。進(jìn)入 2000 年之后，北京周邊地區(qū)布魯菌病的疫情也逐漸得到了各級政府的重視。熱帶醫(yī)學(xué)研究所是北方地區(qū)唯一的以熱帶病為中心的集臨床、檢驗(yàn)及研究為一體的研究所。本文對 2013 – 2016 年間熱帶病門診接診需要進(jìn)行布魯菌病初篩的患者檢測結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。5330 例就診人員男性明顯高于女性，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2= 58.76，< 0.001），這與從事畜牧、喂養(yǎng)或屠宰等活動(dòng)男性多于女性有關(guān)。血清學(xué)陽性患者多發(fā)生在青中年組，尤以 50~ 年齡組陽性率最高，與青壯年男性從事畜牧、屠宰、皮毛加工、剪毛和肉制品加工等重體力勞動(dòng)有關(guān)。血清學(xué)陽性率全年 12 個(gè)月中有 2 個(gè)月超過了 10%，分別為 5 月和 7 月，與布魯菌病在冬季發(fā)病率較低的流行趨勢相符?？v觀 2013 – 2016 年布魯菌病初篩陽性率，呈逐年下降的趨勢，這應(yīng)該與政府、疾控和醫(yī)療部門的重視，防控意識越來越強(qiáng)有關(guān)。同時(shí)，隨著醫(yī)務(wù)人員對布魯菌病防控意識的增強(qiáng)，也使檢測人數(shù)有大幅度的增長，這也一定程度降低了陽性率。北京周邊地區(qū)并不是典型的畜牧業(yè)地區(qū)，但是最近幾年在北京周邊地區(qū)發(fā)展畜牧業(yè)的地區(qū)越來越多，主要以養(yǎng)牛、養(yǎng)羊?yàn)橹?。另外，很多人為了追求生活品質(zhì)，在郊區(qū)自己養(yǎng)羊，產(chǎn)羊奶供家人飲用。大部分養(yǎng)殖戶對布魯菌病了解不夠，對牲畜的免疫預(yù)防不夠重視，這些情況都增加了人與動(dòng)物之間的布魯菌傳染，造成北京周邊地區(qū)布魯菌病近幾年發(fā)病率一直居高不下的局面。針對北京周邊地區(qū)人布魯菌病疫情，各級政府應(yīng)高度重視預(yù)防控制工作，加大經(jīng)費(fèi)投入，重點(diǎn)做好以下幾方面工作：①做好布魯菌病的宣傳科普工作，提高群眾對該病的認(rèn)識，養(yǎng)成良好的衛(wèi)生習(xí)慣，提高自我防護(hù)意識；制作圖文并茂的布魯菌病宣傳小冊子，力爭各個(gè)年齡層都能理解，分發(fā)到戶，覆蓋需要宣教的人群。②對有可能接觸牛、羊等動(dòng)物或者生肉的人群除加強(qiáng)教育外，還應(yīng)該進(jìn)行必要的監(jiān)控，對高危人群進(jìn)行登記并進(jìn)行健康管理，定期進(jìn)行布魯菌病的初篩，做到早發(fā)現(xiàn)、早治療。③通過對布魯菌病原體、傳染源、傳播途徑等進(jìn)行系統(tǒng)的研究，連續(xù)的監(jiān)控，做到有針對性的防控。不僅對高危人群，還要對轄區(qū)內(nèi)的牛、羊等定期進(jìn)行布魯菌檢測，力爭在感染源頭進(jìn)行干預(yù)。

表 1 血清學(xué)陽性患者的年齡分布

表 2 血清學(xué)陽性的時(shí)間分布

圖 1 2013 – 2016 年全年檢測人數(shù)及陽性率對比圖

Figure 1 Comparation of annual sample numbers and positive rate from 2013 – 2016

2015 年，國務(wù)院授權(quán)國家發(fā)改委、外交部和商務(wù)部發(fā)布《推動(dòng)共建絲綢之路經(jīng)濟(jì)帶和21 世紀(jì)海上絲綢之路的愿景與行動(dòng)》，至此“一帶一路”正式成為國家戰(zhàn)略和國家一號工程。隨著“一帶一路”的建設(shè)和發(fā)展，一些新發(fā)傳染病也有傳播的可能，其中布魯菌病是多個(gè)國家的高發(fā)傳染病，在今后的工作中要更加關(guān)注發(fā)病人員的流動(dòng)情況。

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Analysis of primary detection for brucellosis in 5330 serum samples

LI Shao-gang, WU Zhao-yong, LI Jing-yi, GUO Dong-xing, XIN De-li, LI Dan

Beijing Friendship Hospital, Capital Medical University, Beijing Tropical Medicine Research Institute, Beijing Key Laboratory for Research on Prevention and Treatment of Tropical Diseases, Beijing 100051, China

To analyze the serological results for screening of brucellosis infection in clinical samples fromBeijing Tropical Medicine Institution (BTMI) during 2013-2016, in order to provide laboratory basis for the control and prevention of Brucellosis.

Serological detection (RBPT) of suspected brucellosis infection cases in the outpatients department in BTMI was conducted and the results were analyzed.

A total of 5330 suspected cases of brucellosis were detected and 452 positives were found, with the positive rate being 8.48%. Among the collected samples, the serological positive rate for men and women was 10.89% and 4.93%, respectively. Further age-related analysis suggested the highest serologic positive rate (13.51%) appeared in the year of 50~ group, and the lowest one (2.79%) appeared in the year of 10~ group. Significant seasonal peak was observed in July (11.23%), and valley observed in November (6.11%).

Brucellosis infection in Beijing is relatively high in the past four years. Effective measures should be taken to control the prevalence of brucellosis.

Brucellosis; Serology test; Rose-bengal plate agglutination test

LI Dan, Email: muzid_ld@sina.cn

北京友誼醫(yī)院科研啟動(dòng)基金（yyqdkt2015-19）

李丹，Email：muzid_ld@sina.cn

2018-08-06

10.3969/j.issn.1673-713X.2019.01.008