牛以水樣或糊狀腹瀉為主的疾病的診斷

朱福全

（黑龍江省勃利縣杏樹畜牧獸醫(yī)站，黑龍江 勃利 154500）

以水樣或糊狀腹瀉為主的牛傳染病包括牛產(chǎn)腸毒素性大腸桿菌病、副結(jié)核病、牛空腸彎曲菌腹瀉、牛輪狀病感染、牛冠狀病毒感染；寄生蟲病包括隱孢子蟲病、前后盤吸蟲病、莫尼茨絳蟲病和犢牛弓首蛔蟲??；普通病主要包括消化不、胃腸炎、淀粉樣變性和結(jié)腸炎等疾病。

1 傳染病和寄生蟲病的病原學(xué)診斷

1.1 牛產(chǎn)腸毒素性大腸桿菌病

采少量新鮮尸體的小腸前段腸黏膜或內(nèi)容物，常接種于伊紅美藍(lán)瓊脂培養(yǎng)基上，挑選有金屬光澤、紫色帶黑心菌落進(jìn)行生化反應(yīng)鑒定。用已知多價(jià)和單價(jià)O抗血清及單價(jià)黏附素抗血清鑒定分離菌的血清型，之后再做腸毒素測(cè)定，以確定致病性。

1.2 副結(jié)核病

小川氏培養(yǎng)基上需氧培養(yǎng)，生長(zhǎng)緩慢，常需6～8周或更長(zhǎng)時(shí)間才能生長(zhǎng)小菌落。常用抗酸染色鏡檢方法，取糞便中的黏液、血絲，加3倍量的0.5%NaOH液，混勻，55℃水浴乳化30 min，以4層紗布濾過(guò)，取濾液以1 000 r·min-1離心5 min，去沉渣后，再以3 000～4 000 r· min-1離心30 min，去上清，取沉淀物涂片，用抗酸染色鏡檢，本菌為紅色，常呈叢狀。這兩種方法中有一種為陽(yáng)性結(jié)果，可確診本病。

1.3 牛空腸彎曲菌腹瀉

取腹瀉糞便直接接種于改良Camp-BAP瓊脂培養(yǎng)基，在一個(gè)大氣壓的85%N2、10%CO2和5%O2的混合氣體環(huán)境條件下，37℃或25℃進(jìn)行分離培養(yǎng)，經(jīng)生化試驗(yàn)鑒定分離菌。

1.4 牛輪狀病毒感染

一般在腹瀉開始24 h內(nèi)采取小腸內(nèi)容物或糞便，經(jīng)高速和超速離心濃縮病毒后，進(jìn)行檢查，常用的方法有電鏡法、酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)等。還可將小腸或腸內(nèi)容物涂片，用已知牛輪狀病毒熒光抗體做直接熒光試驗(yàn)以及多重RTPCR鑒定病毒。必要時(shí)將病料接種于MA-104細(xì)胞進(jìn)行病毒分離培養(yǎng)。

1.5 牛冠狀病毒感染

用電子顯微鏡從腹瀉便中直接觀察病毒粒子，或用牛冠狀病毒熒光抗體從糞便中檢出本病毒。必要時(shí)將病料接種于BEK-1或HRT-8細(xì)胞進(jìn)行病毒分離培養(yǎng)，用已知牛冠狀病毒抗血清做病毒中和試驗(yàn)鑒定分離的病毒。

1.6 牛隱孢子蟲病

可采用飽和蔗糖溶液漂浮法收集糞便中的卵囊，再用1 000倍的油鏡檢查，可見到圓形或卵圓形的卵囊，內(nèi)含有4個(gè)裸露的子孢子和1個(gè)殘?bào)w。還可采用改良的酸性染色法，制成蟲體抹片，染色，鏡檢，隱孢子蟲卵囊被染成紅色，此法檢出率較高。還可采用間接免疫熒光法，隱孢子蟲卵囊以熒光抗體染色后顯示蘋果綠熒光，極易辨認(rèn)，敏感性高達(dá)100%，特異性97%，此法目前已成為國(guó)外診斷隱孢子蟲病最常用的方法之一。死后診斷時(shí)取病變部位或刮取消化道黏膜抹片染色，或采用病理切片，姬姆薩染色，或制成電鏡樣本，鑒定蟲體。對(duì)可疑病例可采用實(shí)驗(yàn)動(dòng)物感染加以確診。

1.7 牛前后盤吸蟲病

對(duì)成蟲引起的疾病可采用反復(fù)水洗沉淀法進(jìn)行糞便檢查，檢出大量蟲卵即可確診。對(duì)童蟲引起的疾病，在生前診斷要結(jié)合臨床癥狀、分析流行病學(xué)資料做出判斷，必要時(shí)可進(jìn)行尸體剖檢，根據(jù)其病變和檢出的大量童蟲而確診。

1.8 牛莫尼茨絳蟲病

在患牛糞便中檢到黃白色孕卵節(jié)片，形似煮熟的米粒，將孕節(jié)侮涂片檢查時(shí)，可見到灰白色、特征性的蟲卵即可確診。未發(fā)現(xiàn)節(jié)片時(shí)，用飽和鹽水浮集法檢查糞便，可發(fā)現(xiàn)蟲卵。如果患牛癥狀明顯，但未檢出蟲體或蟲卵，可能是蟲體尚未成熟，此時(shí)可采用診斷性驅(qū)蟲方法。死后剖檢，在小腸內(nèi)可見到大量蟲體和相應(yīng)的病變。

1.9 犢牛弓首蛔蟲病

采用飽和鹽水漂浮法進(jìn)行蟲卵檢查，檢出大量的蟲卵即可確診。死后剖檢在小腸找到犢牛弓首蛔蟲或在血管、肺臟找到移行期幼蟲也可確診。

2 普通病的實(shí)驗(yàn)室檢查

2.1 消化不良

血液學(xué)變化不明顯，但可見低血鈣，代謝酸中毒。

2.2 胃腸炎

血、尿檢驗(yàn)結(jié)果明顯有變。發(fā)病初期，白細(xì)胞總數(shù)增多，中性粒細(xì)胞比例增大，核型左移，出現(xiàn)多量桿狀和幼稚型（增生性左移）；發(fā)病后期，白細(xì)胞總數(shù)明顯減少。由于機(jī)體長(zhǎng)時(shí)間脫水和循環(huán)系統(tǒng)衰竭，而出現(xiàn)相對(duì)性紅細(xì)胞增多癥指征，包括血液濃稠，血沉減慢，紅細(xì)胞壓積容量增高（＞40%）。尿蛋白質(zhì)含量增多，腎上皮細(xì)胞以至各種管型也有改變。

2.3 酮病

尿液、乳汁和血中酮體含量增高，尿呈酸性。血糖降低，堿貯下降，多數(shù)血脂升高。臨床病理檢查，血酮水平＞20 mg·dL-1，血糖含量＜50 mg·dL-1，并且呈現(xiàn)明顯癥狀的，稱為臨床酮病。血酮水平為10～20 mg·dL-1，但無(wú)明顯臨床癥狀的，稱為亞臨床酮病。原發(fā)性酮病時(shí)，血糖為20～40 mg·dL-1（正常是50 mg·dL-1），血酮10～100 mg·dL-1（正常為10 mg·dL-1）。繼發(fā)性酮病時(shí)，血糖常＞40 mg·dL-1，血酮很少超過(guò)50 mg·dL-1。尿酮差異很大，正常可達(dá)70 mg· dL-1，酮病時(shí)，約達(dá)80～1 300 mg· dL-1。乳酮較穩(wěn)定，酮病時(shí)平均值達(dá)40 mg·dL-1正常為3 mg·dL-1）。目前，國(guó)內(nèi)多采用酮粉法，國(guó)外多采用試紙法定性檢測(cè)牛乳中酮體陽(yáng)性，作為監(jiān)測(cè)泌乳早期牛群亞臨床酮病的依據(jù)。