紅葉石楠組織培養(yǎng)繁育技術(shù)研究

陳陸琴 張謹(jǐn)華

（1.太原市園林植物研究中心，山西 太原 030041；2.晉中學(xué)院生物科學(xué)與技術(shù)學(xué)院，山西 晉中 030619）

1 引言

紅葉石楠為光葉石楠和石楠的雜交種，為常綠小喬木或叢生灌木，葉色鮮艷如火，亮麗持久。主要分布在亞洲東南部與東部和北美洲的亞熱帶與溫帶地區(qū)，在中國許多省份已廣泛引種栽培。紅葉石楠在溫暖潮濕的環(huán)境下生長(zhǎng)良好，有極強(qiáng)的耐陰和抗旱能力，但是不抗水濕；對(duì)土壤要求不嚴(yán)格，適宜生長(zhǎng)于各種土壤中，抗鹽堿性較好，尤喜砂質(zhì)土壤，但是在紅壤或黃壤中也可以正常生長(zhǎng)；對(duì)于氣候以及氣溫的要求比較寬松，能夠抵抗低溫的環(huán)境。

隨著近幾年太原市園林綠化的快速發(fā)展，大量彩色植物被引進(jìn)，而在太原可選用的彩色植物種類較少，常見的有金葉女貞、紫葉小檗等。紅葉石楠因其葉色可隨葉片新老程度呈現(xiàn)不同顏色，尤其是新葉紅色鮮明，在南方已被廣泛應(yīng)用，景觀效果好。紅葉石楠還具有生長(zhǎng)速度快、耐修剪等特點(diǎn)，符合現(xiàn)代園林需求，但由于其是雜交種，常規(guī)的有性繁殖受到限制，遠(yuǎn)遠(yuǎn)滿足不了園林綠化中大量應(yīng)用的需要。因此，在北方城市開展紅葉石楠組培快繁技術(shù)研究，對(duì)該樹種開發(fā)及園林應(yīng)用具有重要的意義。

2 材料與方法

2.1 試驗(yàn)材料

實(shí)驗(yàn)材料采自太原植物園珍稀植物引種馴化基地種植的紅葉石楠植株上。

2.2 試驗(yàn)方法

2.2.1 無菌外植體的獲得

晴天在生長(zhǎng)健壯、無病蟲害的植株上采集嫩莖段，剪成帶兩個(gè)芽的小段用洗衣粉浸泡20min，再用流水沖洗1.50h，然后轉(zhuǎn)移到超凈工作臺(tái)上，用濾紙吸干水分，放入體積分?jǐn)?shù)為70%～75%酒精中搖動(dòng)3次～5次，持續(xù)30s立即將外植體取出，在無菌水中清洗2次。然后放入質(zhì)量分?jǐn)?shù)0.10%的氯化汞溶液中5.0min～8.0min，取出后在無菌水中至少清洗5次，用無菌吸水紙吸干外植體表面水分，然后再接種到誘導(dǎo)不定芽培養(yǎng)基上，每瓶接種3個(gè)外植體。

2.2.2 培養(yǎng)基和培養(yǎng)條件

基本培養(yǎng)基：MS培養(yǎng)基，均加蔗糖25g/L，瓊脂6.0g/L，pH5.8～6.2。

培養(yǎng)條件：溫度控制在25℃±2℃，光照時(shí)間為每天12h，光照強(qiáng)度2 000lx。

2.2.3 不同激素配比對(duì)叢生芽誘導(dǎo)的影響

將獲得的無菌材料分別接種到6-BA和NAA兩種不同濃度配比的芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基上，30d之內(nèi)每天進(jìn)行觀察和統(tǒng)計(jì)。

2.2.4 不同激素對(duì)試管苗生根的影響

以高度約為2.0cm的試管苗為試驗(yàn)材料，基本培養(yǎng)基為1/2MS，瓊脂6g/L，蔗糖15g/L，探究不同濃度的IBA和NAA對(duì)試管苗生根的影響，30d之內(nèi)每天統(tǒng)計(jì)生根率。

2.2.5 移栽

選擇苗高3.0cm～5.0cm、根長(zhǎng)1.0cm且有5條以上根的試管苗進(jìn)行移栽。移栽前，先在煉苗室鍛煉5.0d，然后放到溫室打開瓶蓋煉苗2.0d。移栽時(shí)用鑷子將幼苗輕輕取出，把基部的培養(yǎng)基洗干凈，移入到不同基質(zhì)的穴盤中。常用基質(zhì)有①珍珠巖；②珍珠巖∶河沙∶泥炭土＝1∶1∶1；③珍珠巖∶泥炭土＝1∶1。將穴盤放入小拱棚，移栽7.0d內(nèi)進(jìn)行50%～70%遮陽，要保證溫度在25℃左右、濕度在85%左右。

3 試驗(yàn)結(jié)果與分析

3.1 不同濃度激素對(duì)叢生芽誘導(dǎo)的影響

試驗(yàn)中，分別在培養(yǎng)基中添加不同濃度的6-BA和NAA，均可誘導(dǎo)芽分化，但芽的分化數(shù)量與生長(zhǎng)情況差異很大。當(dāng)NAA濃度為0.1mg/L時(shí)，6-BA濃度由0.50mg/L增加到1.50mg/L，不定芽分化率由82.30%增加到95.6%；當(dāng)6-BA濃度為1.50mg/L時(shí)，NAA濃度由0.05mg/L增加到0.20mg/L，不定芽分化率先高后低。實(shí)踐證明，當(dāng)二者配比大時(shí)不定芽分化率會(huì)增大，但是有部分幼苗出現(xiàn)了玻璃化，這類分化苗不能繼續(xù)使用。通過試驗(yàn)，紅葉石楠在MS+6-BA1.5mg/L+NAA0.1mg/L培養(yǎng)基中不定芽分化率和增殖效果較好，分化率達(dá)到95.60%，平均分化芽8.3個(gè)，平均芽高3.72cm，而且可以直接作為生根試管苗的材料應(yīng)用。

3.2 不同激素對(duì)試管苗生根的影響

培養(yǎng)基中添加不同濃度的NAA和IBA誘導(dǎo)生根，試驗(yàn)觀察到使用IBA誘導(dǎo)出的根細(xì)而長(zhǎng)，生根率隨IBA濃度的增加而升高；當(dāng)IBA濃度達(dá)1.0mg/L時(shí)，部分生根苗基部會(huì)產(chǎn)生少量愈傷組織，影響生根率。使用NAA誘導(dǎo)出的根粗而短，當(dāng)NAA的濃度由0.10mg/L增加到0.50mg/L時(shí)，生根率會(huì)提高，但在試管苗基部會(huì)有大量愈傷組織產(chǎn)生，呈松軟狀態(tài)。在愈傷組織部位產(chǎn)生的根比較脆，容易折斷，移栽時(shí)不能夠選用這樣的生根苗。通過試驗(yàn)，紅葉石楠在1/2MS+IBA0.50mg/L時(shí)生根率達(dá)到98%，沒有產(chǎn)生愈傷組織，平均生根5條～6條，平均根長(zhǎng)1.50cm。

3.3 試管苗的移栽

經(jīng)過煉苗以后，將生根苗從培養(yǎng)瓶中移出，洗去根部培養(yǎng)基，用1.0‰多菌靈溶液浸蘸根部，然后移栽到50穴的穴盤中放入塑料小拱棚，每隔5.0d噴1次多菌靈，7.0d以后可定時(shí)揭膜透氣，15d以后打開小拱棚塑料膜。試驗(yàn)所用的3種基質(zhì)對(duì)移栽成活率沒有明顯差異，成活率都能達(dá)到95%以上。但從后期生長(zhǎng)情況來看，在珍珠巖+河沙+泥炭土中小苗生長(zhǎng)快，而且壯實(shí)，當(dāng)出現(xiàn)3對(duì)～5對(duì)新葉時(shí)，就可以進(jìn)行定植，進(jìn)入大田養(yǎng)護(hù)管理。

4 結(jié)論與討論

在紅葉石楠組織培養(yǎng)過程中，由于莖段光滑比較容易消毒，使用0.10%氯化汞溶液浸泡6.0min效果良好，但也應(yīng)當(dāng)注意消毒時(shí)間。時(shí)間過長(zhǎng)，會(huì)使外植體受到損傷甚至死亡，時(shí)間不足則容易感染霉菌，影響無菌苗的獲得率。該研究發(fā)現(xiàn)，6BA與NAA二者相互配合使用，可以有效誘導(dǎo)不定芽的分化。因此，紅葉石楠誘導(dǎo)不定芽分化增殖最佳培養(yǎng)基為MS+6-BA1.5mg/L+NAA0.1mg/L，在此培養(yǎng)基中分化出的幼苗高度可達(dá)3.72cm，能直接用作生根試管苗材料。通過此方式縮短培養(yǎng)周期，能降低生產(chǎn)成本，可以滿足工廠化育苗需求。低鹽濃度的培養(yǎng)基有利于根的生長(zhǎng)，生長(zhǎng)素對(duì)根的生長(zhǎng)效應(yīng)較明顯。在生根試驗(yàn)中，選用1/2MS培養(yǎng)基作為基本培養(yǎng)基時(shí)，生根率會(huì)隨著IBA濃度改變而改變。紅葉石楠最佳生根培養(yǎng)基是1/2MS+IBA0.5mg/L，生根苗長(zhǎng)勢(shì)健壯。移栽于珍珠巖∶河沙∶泥炭土=1∶1∶1基質(zhì)中的紅葉石楠幼苗，成活率高達(dá)95%，植株長(zhǎng)勢(shì)旺盛。

通過多年的引種試驗(yàn)，太原地區(qū)從外地引進(jìn)的紅葉石楠制品苗木由于其適應(yīng)性差，不易成活。為解決這一問題，通過組培苗的生產(chǎn)，在溫室移栽成活后，4月移入大田，一年內(nèi)修剪3次，定期增施磷肥促進(jìn)植株根系發(fā)達(dá)，同時(shí)增強(qiáng)抗寒抗旱能力，冬季再用無紡布進(jìn)行包裹防護(hù)。這樣經(jīng)過3年的鍛煉馴化，即可用于園林綠化，而且能夠有效地解決紅葉石楠在太原地區(qū)的應(yīng)用。