豬圓環(huán)病毒3型研究進(jìn)展分析

楊敬迪

（安丘市畜牧局，山東安丘 262100）

1 病原

2016年，美國堪薩斯州立大學(xué)科研職員操縱宏基因組測(cè)序技術(shù)，從患有皮炎腎病綜合征（PDNS）和繁殖障礙的母豬及其流產(chǎn)胎兒體內(nèi)初次判定出 PCV3。由于是新發(fā)現(xiàn)的病原體，PCV3對(duì)各種豬的致病性，對(duì)于豬圓環(huán)病毒相關(guān)疾?。≒CVAD）的作用，及其現(xiàn)有商品化 PCV2的各種疫苗對(duì)它免疫效力等，等待下一步探究。

2 分類地位

pcv3在分類上屬圓環(huán)病毒。2016之前，豬圓環(huán)病毒（PCV）全世界認(rèn)可的只有PCV1和PCV2基因型。PCV2是多系統(tǒng)衰竭綜合征（PMWS）主要引起斷奶仔豬，這是PDNS密切相關(guān)，豬呼吸道疾病綜合征（PRDC）、繁殖障礙、增生性壞死性肺炎（PNP）、腸炎，都是此類疾病。通過對(duì) PCV3全基因組及部分基因組序列進(jìn)化分析，發(fā)現(xiàn)我國 PCV3包括3a和3b兩個(gè)亞群，在這種情況下，3a和美國pcv3參考應(yīng)變中的一個(gè)分支，有著非常密切的同源演化。

3 病原學(xué)特征

3.1 形態(tài)特征及理化特性

豬圓環(huán)病毒是最小的動(dòng)物病毒之一。豬圓環(huán)病毒3型是一種環(huán)狀DNA病毒，病毒顆粒無外膜，直徑17～20 nm。豬環(huán)對(duì)環(huán)境有較強(qiáng)的屏障作用，可在酸性條件下（pH=3）長(zhǎng)時(shí)間存活。無血凝，耐熱性好。PCV對(duì)有機(jī)溶劑如氯仿、碘或酒精敏感，但對(duì)苯酚，氫氧化鈉和氧化劑更敏感。由于pcv3 pcv2病毒屬于同一個(gè)家族，物理化學(xué)性質(zhì)相似，同樣的方法可以用消毒劑來消毒處理環(huán)境和運(yùn)輸工具。

3.2 基因組結(jié)構(gòu)及功能

pcv3基因組總長(zhǎng)度為2000 bp，包括5個(gè)主要的開放閱讀框（ORF），分別編碼Rep蛋白，一種蛋白，和一個(gè)特定的ORF3蛋白對(duì)PCV同源。Cap protein是PCV的主要結(jié)構(gòu)蛋白，可誘導(dǎo)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物產(chǎn)生特異性免疫應(yīng)答。PCV2和pcv3 Cap蛋白的同源性僅為30，而他們之間的交錯(cuò)免疫保護(hù)的可能性較低。在湛洋的2個(gè)研究表明，在結(jié)構(gòu)和抗原性pcv3 PCV2和蓋之間有顯著性差異。因此，沒有交叉免疫保護(hù)和pcv3 PCV2之間。

3.3 培養(yǎng)特性

目前，豬腎細(xì)胞（PK-15，SK）和豬睪丸細(xì)胞（ST）是常用的PCV2的分離和培養(yǎng)基。據(jù)推測(cè)，pcv3可以在細(xì)胞增殖。

4 流行病學(xué)與致病性

雌雄不同、年齡不一和各種不同的育種豬可以感染pcv3，但懷孕母豬和初產(chǎn)豬更易感染。pcv3可引起母豬沒有吃癥狀，皮膚泛起多灶性丘疹、雀斑和淺表性皮炎，輸送能力下降，妊娠母豬繁殖障礙，如流產(chǎn)、出生缺胳膊少腿、出生死亡、木乃伊、弱仔。即使那些病情嚴(yán)重的人也會(huì)死于急性死亡。?；疾∽胸i多出現(xiàn)器官系統(tǒng)的功能性混亂。PCV3能夠感染不同大豬的腦（包括死胎大腦），肺（同上）、淋巴結(jié)、扁桃體、精液和血清檢測(cè)。一系列結(jié)果表明 PCV3存在于豬的不同組織中，且存在垂直傳播風(fēng)險(xiǎn)。

5 檢測(cè)技術(shù)研究進(jìn)展

5.1 分離培養(yǎng)

病毒分離和診斷是診斷流行性疾病最準(zhǔn)確的方法。由于成年感染動(dòng)物缺乏臨床癥狀，病毒難以掌握，影響了病毒的分離，因此病毒通常是從流產(chǎn)胎兒或死胎的組織樣本中分離出來的。

5.2 分子生物學(xué)檢測(cè)技術(shù)

5.2.1 PCR

國內(nèi)專家專為pcv3cap基因的藥引，建立了迅速、敏捷、一對(duì)一的PCR檢測(cè)方法。通過使用這種方法，168名可能得病的從河北豬場(chǎng)進(jìn)行了檢測(cè)，得病樣品9份進(jìn)行檢測(cè)，表明河北有pcv3感染豬。徐朋麗等也建立了一個(gè)pcv3 PCR檢測(cè)方法，對(duì)pcv3最低檢出量為61.9份/L，利用該法對(duì)河南省112份臨床樣品進(jìn)行檢測(cè)，發(fā)現(xiàn) PCV3陽性率為33.9（38/112），表明 PCV3在河南已有流行。賀會(huì)利等PCR技術(shù)在廣西某豬場(chǎng)仔豬腹瀉pcv3從樣品檢測(cè)，并pcv3也被檢測(cè)到。PCR方法提供了用于監(jiān)控豬場(chǎng)和在中國pcv3防治pcv3盛行的技術(shù)支持。

5.2.2 熒光定量 PCR

Palinski等利用實(shí)時(shí)熒光定量 PCRpcv3從流產(chǎn)母豬生下來的小豬的檢測(cè)，pcv3抗原和淋巴結(jié)在豬的皮膚佳能發(fā)現(xiàn)，腎臟和肺，表明pcv3在美國非常普遍，有可能是母豬不生小豬的主要得病原因。熒光定量PCR方法的建立，使pcv3更快速、簡(jiǎn)便、經(jīng)濟(jì)和實(shí)用的檢測(cè)，為PCV3感染的早期判斷提供了有力的手段支持。

6 小結(jié)

目前對(duì)于 PCV3的研究尚處于剛開始的階段，需要盡快展開相關(guān)檢驗(yàn)技術(shù)研究，快速、一對(duì)一pcv3病原學(xué)和血清學(xué)檢測(cè)方法有助于pcv3菌株的分離和測(cè)定，為開展疫苗研發(fā)以及動(dòng)物回歸試驗(yàn)奠定了基石，從而保護(hù)我國生豬產(chǎn)業(yè)健康發(fā)展。預(yù)防和控制pcv3，必須堅(jiān)持"早發(fā)現(xiàn)、早報(bào)告、早隔離的原則，早期診斷、早期抑制"。要強(qiáng)化物體安全，提高有關(guān)調(diào)查人的防范意識(shí)，嚴(yán)格執(zhí)行消毒程序，對(duì)殺蚊拍蠅要重視，保護(hù)環(huán)境，保持衛(wèi)生，定期滅鼠。