液基細(xì)胞學(xué)聯(lián)合HPV分型在宮頸癌早期篩查中的意義

喻朝霞，潘陶強(qiáng)，黃啟梅，張?jiān)茦s，張 潤(rùn)，鄧士杰

（安徽省安慶市第一人民醫(yī)院病理科，安徽 安慶 246000）

我國(guó)是宮頸癌的高發(fā)地區(qū)，發(fā)病率僅次于乳腺癌，嚴(yán)重威脅著婦女的健康和生命。宮頸癌是唯一可早期發(fā)現(xiàn)并實(shí)施預(yù)防的惡性腫瘤，主要病因是高危型人乳頭瘤病毒（HPV）的持續(xù)感染。因此，降低已婚女性的HPV的感染可通過(guò)HPV檢測(cè)進(jìn)行。目前液基細(xì)胞學(xué)檢查（TCT）是宮頸細(xì)胞學(xué)的主要篩查方法[1]，但需要依靠醫(yī)生的主觀判斷來(lái)確認(rèn)結(jié)果，且宮頸癌細(xì)胞發(fā)生浸潤(rùn)性改變現(xiàn)象較晚，無(wú)法在宮頸癌早期診斷中進(jìn)行應(yīng)用。因HPV-DNA檢測(cè)能夠診斷早期宮頸宿主細(xì)胞感染HPV，本研究采用液基細(xì)胞學(xué)技術(shù)（TCT）聯(lián)合HPV分型進(jìn)行宮頸病變篩查，旨在探討TCT聯(lián)合HPV分型檢測(cè)對(duì)早期宮頸癌篩查的意義。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2014年5月～2018年5月本院收治的宮頸癌的患者4000例，性生活史超過(guò)2年，年齡20～64歲，平均（33.2±10.6）歲，無(wú)妊娠，無(wú)其他婦科疾病，無(wú)宮頸手術(shù)史，處于非月經(jīng)期；均同意進(jìn)行TCT和HPV檢測(cè)。

1.2 方法

采集標(biāo)本前24小時(shí)內(nèi)禁止性生活；標(biāo)本采集前3天內(nèi)禁止陰道沖洗或使用陰道用藥。所有病例均使用一次性取樣器，將專用毛刷置入宮頸口，在鱗狀上皮以及宮頸內(nèi)鱗柱交界處采集細(xì)胞，連續(xù)刷3～5圈后取標(biāo)本，將宮頸分泌物裝入專用的細(xì)胞保存液收集管中，并做好標(biāo)記。

1.2.1 TCT檢測(cè)

于宮頸口及頸管部用宮頸刷收集脫落上皮細(xì)胞，并置于ThinPrep保存液中，送至我院病理科進(jìn)行細(xì)胞學(xué)檢查。檢查結(jié)果分為：含有無(wú)明確診斷意義的非典型鱗狀上皮細(xì)胞（ASC-US）、低度鱗狀上皮內(nèi)病變（LSIL）、高度鱗狀上皮內(nèi)病變（HSIL）和鱗狀細(xì)胞癌（SCC）。

1.2.2 HPV檢測(cè)試劑

DNA提?。簩⒈４嬗谑占苤械膶m頸分泌物放入1.5 mL離心管中，加入裂解液150 μL，充分震蕩混勻，在100℃金屬浴中加熱10 min，13000 rpm離心10 min，取中間層DNA溶液待用。采用HPV基因分型（23型）檢測(cè)試劑盒，將提取的DNA采用聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（PCR）擴(kuò)增，在已固定核酸探針的低密度基因芯片上進(jìn)行雜交、孵育、顯色，根據(jù)膜條上藍(lán)色斑點(diǎn)顯現(xiàn)的位置讀取該位置標(biāo)注的基因型信息，對(duì)HPV感染進(jìn)行分型（23型）。HPV基因分型（23型）檢測(cè)試劑盒，其中包括5種低危型HPV：81、43、42、11、6和18種高危型HPV：83、82、73、68、66、59、58、56、53、52、51、45、39、35、33、31、18、16。

1.2.3 病理學(xué)檢測(cè)

將TCT和HPV-DNA其中兩種檢測(cè)均為陽(yáng)性或一種檢測(cè)為陽(yáng)性者進(jìn)行陰道鏡取活檢查，病理組織結(jié)果分為宮頸癌和宮頸上皮內(nèi)瘤變（CIN）、炎癥或正常，其中CIN-Ⅰ相當(dāng)于TCT診斷中的LSIL，CIN-Ⅱ和CIN-Ⅲ相當(dāng)于TCT診斷中的HSIL。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

上述數(shù)據(jù)應(yīng)用SPSS 20.0軟件分析，計(jì)量資料與計(jì)數(shù)資料分別以()及%表示，組間比較分別采用t及x2檢驗(yàn)，以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1 TCT檢測(cè)

TCT檢測(cè)中正常或炎癥者、ASCUS、LSIL、HSIL及SCC患者HPV感染率分別為26.03%（880/3380）、59.43%（189/318）、82.35%（140/170）、85.11%（80/94）、100.00%（38/38）。

2.2 病理學(xué)檢測(cè)結(jié)果分析

病理檢測(cè)正?；蜓装Y者、CIN-Ⅰ、CIN-Ⅱ與CIN-Ⅲ及SCC中，高危型HPV感染率分別為19.62%（650/3312）、79.33%（426/537）、89.38%（101/113）、100.00%（38/38）。

2.3 3種檢查方法結(jié)果比較

HPV靈敏度為81.00%（1215/1500），特異度為95.48%（2387/2500），陽(yáng)性預(yù)測(cè)值為91.49%(（1215/1328），陰性預(yù)測(cè)值為89.33%（2387/2672）；TCT靈敏度為65.73%（986/1500），特異度為86.36%（2159/2500），陽(yáng)性預(yù)測(cè)值為74.30%（986/1327），陰性預(yù)測(cè)值為80.77%（2159/2673）；2者聯(lián)合靈敏度為86.53%（1298/1500），特異度為95.72%（2393/2500），陽(yáng)性預(yù)測(cè)值為92.38%（1298/1405），陰性預(yù)測(cè)值為92.22%（2393/2595）；TCT聯(lián)合HPV-DNA分型檢測(cè)的靈敏度、特異度、陽(yáng)性預(yù)測(cè)值、陰性預(yù)測(cè)值均顯著高于單獨(dú)應(yīng)用TCT，靈敏度、陰性預(yù)測(cè)值顯著高于單獨(dú)HPV-DNA分型檢測(cè)（P＜0.01）。

3 討 論

據(jù)統(tǒng)計(jì)數(shù)據(jù)顯示，我國(guó)每年的宮頸癌新發(fā)病例約占全世界發(fā)病總數(shù)的25%～33%，實(shí)施疾病防治與控制疾病惡變顯得至關(guān)重要[2]，宮頸癌的發(fā)病是一個(gè)緩慢進(jìn)展的過(guò)程，大量基礎(chǔ)與臨床研究已證實(shí)[3]，宮頸癌病變是一個(gè)單向的病理生理學(xué)發(fā)展過(guò)程，早期干預(yù)治療能夠抑制癌變組織發(fā)展演變?yōu)閷m頸癌的可能。普通宮頸癌患者由癌前病變發(fā)展至宮頸癌通常會(huì)經(jīng)歷10～20年，若在病變過(guò)程中得到規(guī)范的、合理的早期篩查，根據(jù)篩查結(jié)果進(jìn)行對(duì)癥治療，通常能逆轉(zhuǎn)疾病的發(fā)展[4]，因此早期診斷是預(yù)防宮頸癌發(fā)生的重要環(huán)節(jié)。目前臨床常見(jiàn)的檢查手段有液基細(xì)胞學(xué)，HPV檢測(cè)，陰道鏡檢查以及宮頸組織活檢。宮頸刮片涂片準(zhǔn)確性可達(dá)到97%～100%，但有研究指出其敏感性僅為29%～56%[5]，因此臨床檢查中經(jīng)常會(huì)出現(xiàn)假陰性，導(dǎo)致漏診誤診。病理學(xué)檢測(cè)的另一大問(wèn)題是存在檢查盲區(qū)，主觀性較強(qiáng)[6]。針對(duì)巴氏涂片的缺點(diǎn)及不足，研究者對(duì)制片技術(shù)進(jìn)行了一定的改良修正發(fā)明了TCT檢測(cè)，21世紀(jì)初被廣泛推廣于臨床使用。對(duì)取材器進(jìn)行保留，使標(biāo)本保留最大程度的完整性，同時(shí)將標(biāo)本完全置于保存液中，避免制片過(guò)程對(duì)標(biāo)本的損害。本研究所選取的4000例患者中，TCT檢測(cè)結(jié)果，隨著宮頸癌的病變HPV陽(yáng)性檢出率升高；TCT聯(lián)合HPV-DNA分型檢測(cè)的靈敏度、特異度、陽(yáng)性預(yù)測(cè)值、陰性預(yù)測(cè)值均顯著高于單獨(dú)應(yīng)用TCT，靈敏度、陰性預(yù)測(cè)值顯著高于單獨(dú)HPV-DNA分型檢測(cè)。

綜上所述，TCT聯(lián)合HPV-DNA檢測(cè)結(jié)果準(zhǔn)確度均優(yōu)于單獨(dú)應(yīng)用其中一種方法的檢測(cè)率，因此值得在臨床上推廣應(yīng)用。