氣相色譜儀測定蔬菜有機(jī)磷類農(nóng)藥殘留時(shí)標(biāo)樣校正曲線對測定結(jié)果的影響

賈月波 郭浩

【摘要】 通過不同標(biāo)樣濃度下校正曲線對蔬菜有機(jī)磷進(jìn)行加標(biāo)回收試驗(yàn)，研究有機(jī)磷類農(nóng)藥單點(diǎn)、多點(diǎn)標(biāo)樣濃度下標(biāo)準(zhǔn)曲線的濃度值對農(nóng)藥殘留測定結(jié)果的影響，試圖尋找準(zhǔn)確性良好的有機(jī)磷類農(nóng)藥殘留檢測方法，為農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全提供有效、準(zhǔn)確依據(jù)。

【關(guān)鍵詞】 氣相色譜儀;校正曲線;有機(jī)磷;農(nóng)藥殘留

【DOI編碼】 10.3969/j.issn.1674-4977.2019.02.012

Abstract： Through the calibration curves under different sample concentration of vegetables organic phosphorus standard addition recovery test，the research of organic phosphorus pesticide single point，multi-point sample concentration under the standard curve of density on the result of determination of pesticide residues， trying to find a good accuracy of organic phosphorus pesticide residues detection method，provides the effective and accurate basis for the quality and safety of agricultural products.

Key words： gas chromatograph;calibration curve;organic phosphorus;pesticide residue

隨著經(jīng)濟(jì)技術(shù)的發(fā)展和法規(guī)政策的完善，農(nóng)藥的品種越來越多，農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全也越來越受到人們的重視，農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全、農(nóng)藥殘留、農(nóng)產(chǎn)品檢驗(yàn)等詞語也出現(xiàn)在人們的日常生活。因此，農(nóng)產(chǎn)品檢驗(yàn)檢測技術(shù)也隨之快速發(fā)展，而驗(yàn)證農(nóng)產(chǎn)品檢驗(yàn)檢測技術(shù)，加標(biāo)回收試驗(yàn)就成了最好的選擇。

在本次加標(biāo)回收試驗(yàn)中，通過檢驗(yàn)回收率值來探究蔬菜有機(jī)磷類農(nóng)藥殘留時(shí)標(biāo)樣校正曲線的選擇對測定結(jié)果是否有影響以及影響的大小，從而確定日常工作中蔬菜有機(jī)磷類農(nóng)藥殘留測定時(shí)標(biāo)準(zhǔn)曲線的選擇，確保農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量的安全，建立快速、靈敏、簡便、準(zhǔn)確的農(nóng)產(chǎn)品檢驗(yàn)檢測方法。

1 試驗(yàn)部分

1.1 執(zhí)行標(biāo)準(zhǔn)

試驗(yàn)根據(jù)NY/T 761-2008《蔬菜和水果中有機(jī)磷、有機(jī)氯、擬除蟲菊酯和氨基甲酸酯類農(nóng)藥多殘留的測定》標(biāo)準(zhǔn)執(zhí)行。

1.2 試驗(yàn)儀器

（1）安捷倫氣相色譜儀7890B;（2）火焰光度檢測器（FPD檢測器）;（3）色譜工作站（7890 Chemstation）;（4）IKA T-18型高速勻漿機(jī);（5）奧特賽恩斯MTN-5800A型氮吹濃縮裝置;（6）IKA漩渦混合器。

1.3 試驗(yàn)試劑

乙腈（色譜純），丙酮（色譜純），氯化鈉（分析純）。

1.4 樣品前處理

1.4.1 提取

準(zhǔn)確稱取25.0 g黃瓜試樣放入燒杯中，并加入50 mL乙腈溶液，放入勻漿機(jī)中高速勻漿2分鐘后倒入盛有5.0～7.0 g氯化鈉的100 mL具塞量筒中，收集濾液約50 mL，直到不再滴有濾液為止，蓋上蓋子，劇烈搖蕩1分鐘，并在室溫下靜置30分鐘，使水相和有機(jī)相充分分層。

1.4.2 凈化

充分靜置后，從100 mL具塞量筒中吸取有機(jī)溶液10 mL，放入150 ml燒杯中，將燒杯放在水浴加熱鍋中進(jìn)行加熱，水溫為80 ℃。杯內(nèi)緩緩?fù)ㄈ氲獨(dú)饬鳎舭l(fā)近干，加入2 mL丙酮溶液，蓋上鋁箔，備用。

將上述備用液完全轉(zhuǎn)移在15 ml刻度試管中，再用約3 ml丙酮分三次沖洗燒杯，并轉(zhuǎn)移至離心管，最后定容至5 ml，在旋渦混合器上混勻，分別移入兩個(gè)2 ml自動進(jìn)樣器瓶中，供測定。如果定容后的樣品過于混濁，應(yīng)用0.2 ?m濾膜過濾后再進(jìn)行測定。

1.5 氣相色譜測定條件

（1）安捷倫氣相色譜儀7890B，火焰光度檢測器（FPD）;（2）色譜柱：Agilent 125-1732 DB-17（30 m×530 ?m×1 ?m）;（3）載氣：氮?dú)猓兌取?9.999%）;（4）進(jìn)洋口溫度：150 ℃;（5）檢測器溫度：250 ℃;（6）柱溫條件：采用程序升溫，150 ℃保持2分鐘，每分鐘上升8 ℃，直到250 ℃，并保持12分鐘;（7）進(jìn)樣條件：不分流進(jìn)樣。

1.6 標(biāo)樣配置

用1000 ?g/mL的對硫磷農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)品加丙酮溶液配置成50 ?g/mL的對硫磷標(biāo)準(zhǔn)工作溶液，然后再依次配置成0.05 ?g/mL、0.1 ?g/mL、0.2 ?g/mL、0.4 ?g/mL、0.6 ?g/mL、0.8 ?g/mL、1 ?g/mL、2 ?g/mL、4 ?g/mL、5 ?g/mL的標(biāo)準(zhǔn)工作溶液。

1.7 標(biāo)準(zhǔn)曲線設(shè)置

1.7.1 單點(diǎn)標(biāo)準(zhǔn)曲線的設(shè)置

用0.05 ?g/mL、0.1 ?g/mL、0.2 ?g/mL、0.4 ?g/mL、0.6 ?g/mL、0.8 ?g/mL、1 ?g/mL、2 ?g/mL、4 ?g/mL、5 ?g/mL的標(biāo)準(zhǔn)工作溶液配制的標(biāo)樣，分別進(jìn)行單點(diǎn)標(biāo)準(zhǔn)曲線的設(shè)置，來對待測試樣進(jìn)行濃度值的檢測，分別記錄其加標(biāo)回收的濃度值，并計(jì)算出回收率。

1.7.2 多點(diǎn)標(biāo)準(zhǔn)曲線的設(shè)置

分別用與待測物質(zhì)添加水平相近的3點(diǎn)0.1 ?g/mL、0.2 ?g/mL、0.4 ?g/mL，5點(diǎn)0.05 ?g/mL、0.1 ?g/mL、0.2 ?g/mL、0.4 ?g/mL、0.6 ?g/mL，10點(diǎn)0.05 ?g/mL、0.1 ?g/mL、0.2 ?g/mL、0.4 ?g/mL、0.6 ?g/mL、0.8 ?g/mL、1 ?g/mL、2 ?g/mL、4 ?g/mL、5 ?g/mL的標(biāo)準(zhǔn)工作溶液配制的標(biāo)樣，進(jìn)行3點(diǎn)、5點(diǎn)、10點(diǎn)標(biāo)準(zhǔn)工作曲線的設(shè)置，來對測試樣進(jìn)行濃度值的檢測，分別記錄其加標(biāo)回收的濃度值，并計(jì)算出回收率。

1.8 回收率測定

取25 g黃瓜試樣3份，分別加入1000 ?g/mL對硫磷標(biāo)準(zhǔn)溶液配置成的5 ?g/mL標(biāo)準(zhǔn)溶液1.25 mL，使黃瓜的農(nóng)藥含量為0.25 mg/kg，重復(fù)3次，使之成為3份平行試樣，并按照上述的前處理、檢測方法進(jìn)行前處理和檢測，并測定回收率。

2 試驗(yàn)結(jié)果與討論

2.1 不同濃度下單點(diǎn)測定對硫磷的平均回收率

分別對3份平行試樣進(jìn)行單點(diǎn)標(biāo)準(zhǔn)曲線的回收率測定（見表1），可以看出其標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度值越接近試樣的添加水平，其回收率越接近真值，并且回收率會隨著與試樣添加水平的差距增大而越來越不穩(wěn)定。

2.2 不同濃度下3點(diǎn)測定對硫磷的平均回收率

標(biāo)準(zhǔn)曲線為：[Y=9755.19781X+3.02854]，相關(guān)性為1.0000，圖中X軸為含量（ng/?l），Y軸為峰面積。

選用與添加水平相近的3點(diǎn)標(biāo)準(zhǔn)工作溶液設(shè)置成標(biāo)準(zhǔn)工作曲線（見圖1），可以看出其回收率（見表2）比較準(zhǔn)確，線性相關(guān)性也較好。分別與其單點(diǎn)的標(biāo)準(zhǔn)工作溶液設(shè)置的標(biāo)準(zhǔn)工作曲線測定的回收率來比較，更為精密和準(zhǔn)確。

2.3 不同濃度下5點(diǎn)測定對硫磷的平均回收率

標(biāo)準(zhǔn)曲線為：[Y=9839.07049X-2.19747]，相關(guān)性為0.99997，圖中X軸為含量（ng/?l），Y軸為峰面積。

選用與待測試樣的添加水平相近的5點(diǎn)標(biāo)準(zhǔn)工作溶液設(shè)置成的標(biāo)準(zhǔn)曲線，從圖2中可以看出，其線性相關(guān)性較好，回收率（見表3）也在控制范圍。與單點(diǎn)和3點(diǎn)標(biāo)準(zhǔn)溶液設(shè)置成的標(biāo)準(zhǔn)工作曲線測定的回收率相比，較單點(diǎn)的標(biāo)準(zhǔn)工作曲線回收率更為穩(wěn)定，與3點(diǎn)的標(biāo)準(zhǔn)工作曲線回收率均在控制范圍，但5點(diǎn)的標(biāo)準(zhǔn)工作溶液設(shè)置成的標(biāo)準(zhǔn)工作曲線測定的回收率更為合理和準(zhǔn)確。

2.4 不同濃度下10點(diǎn)測定對硫磷的平均回收率

標(biāo)準(zhǔn)曲線為：[Y=10223.98161X-69.39712]，相關(guān)性為0.99995，公式圖中X軸為含量（ng/?l），Y軸為峰面積。

從圖3中可以看出，10點(diǎn)標(biāo)準(zhǔn)工作溶液設(shè)置成的標(biāo)準(zhǔn)工作曲線線性相關(guān)性和回收率（見表4）均在控制范圍內(nèi)，用10點(diǎn)標(biāo)準(zhǔn)工作曲線測定的待測物質(zhì)農(nóng)藥濃度值更為廣泛。在日常工作中，需要測定的待測樣品數(shù)量繁多，雖然10點(diǎn)標(biāo)準(zhǔn)工作溶液設(shè)置成的標(biāo)準(zhǔn)工作曲線線性相關(guān)性和回收率在控制范圍內(nèi)，但增加了工作量和繁瑣性，不利于提高工作效率。

3 結(jié)論

綜上所述，通過采用黃瓜樣品、對硫磷標(biāo)準(zhǔn)農(nóng)藥進(jìn)行了不同標(biāo)樣工作曲線濃度下對回收率測定值影響的試驗(yàn)，結(jié)果表明了回收率采用標(biāo)準(zhǔn)曲線的方式進(jìn)行測定時(shí)，待測試樣濃度含量值接近所添加的標(biāo)準(zhǔn)農(nóng)藥值，測定結(jié)果較為準(zhǔn)確。不采用標(biāo)準(zhǔn)曲線的方式進(jìn)行測定時(shí)，待測試樣濃度含量值會隨著所添加的標(biāo)準(zhǔn)農(nóng)藥含量值與試樣添加水平的差值越大，測定結(jié)果越不穩(wěn)定。而所選擇的標(biāo)準(zhǔn)曲線應(yīng)為包含試樣添加水平接近的至少3點(diǎn)以上，測定結(jié)果較為準(zhǔn)確。

在實(shí)際工作中，標(biāo)準(zhǔn)曲線受時(shí)間和測定環(huán)境等限制，不能長期使用，大批量的日常檢查過程中，每天均做一次的標(biāo)準(zhǔn)曲線工作量較大。若采用單點(diǎn)標(biāo)準(zhǔn)工作曲線的方式進(jìn)行檢測待測樣時(shí)，事先不知道待測試樣的實(shí)際農(nóng)藥含量值，所以濃度值的選擇較為困難。

因此，在日常工作中，可以先對待測試樣進(jìn)行粗測，標(biāo)準(zhǔn)農(nóng)藥選擇其結(jié)果濃度的一定范圍內(nèi)，而對疑似超標(biāo)的待測樣品進(jìn)行檢測時(shí)，可以進(jìn)行復(fù)測、接近超標(biāo)農(nóng)藥含量值的標(biāo)準(zhǔn)農(nóng)藥進(jìn)行檢測。若是較為精準(zhǔn)的測定待測樣品農(nóng)藥含量時(shí)，盡量選擇3點(diǎn)以上的標(biāo)準(zhǔn)曲線進(jìn)行農(nóng)藥含量值的測定，從而保證結(jié)果的準(zhǔn)確、可靠。

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