遂寧地區(qū)表觀健康人群低血紅蛋白密度參考區(qū)間的建立

肖光軍，劉艷婷，楊 娜，席 源，范 嬋，涂建華，李祥坤

(四川省遂寧市中心醫(yī)院檢驗(yàn)科，四川 遂寧 629000)

目前臨床用于機(jī)體鐵缺乏(ID)篩查及相關(guān)貧血類(lèi)型鑒別的指標(biāo)較多，多涉及鐵代謝、紅細(xì)胞、網(wǎng)織紅細(xì)胞等相關(guān)參數(shù)，其在臨床運(yùn)用時(shí)存在一定的局限性[1]。因此，美國(guó)Beckman Coulter公司提出了一個(gè)由平均紅細(xì)胞血紅蛋白濃度(MCHC)經(jīng)過(guò)數(shù)學(xué)公式計(jì)算得到的新的紅細(xì)胞參數(shù)—低血紅蛋白密度(LHD)[1-4]，有研究表明它在缺鐵性貧血(IDA) 和其他伴有缺鐵的貧血中升高，對(duì)IDA診斷的敏感度優(yōu)于以往的MCHC，可以作為反映鐵代謝狀態(tài)的良好指標(biāo)[1-6]。但目前LHD的相關(guān)研究較少，不同文獻(xiàn)報(bào)道的健康人群參考區(qū)間不同，且與采用衛(wèi)生行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)《WS/T 405-2012血細(xì)胞分析參考區(qū)間》[7]中MCHC的參考區(qū)間直接轉(zhuǎn)換所得的LHD參考區(qū)間有較大差異，影響其在臨床的運(yùn)用，故本研究檢測(cè)遂寧地區(qū)表觀健康人群外周血中的MCHC水平，嘗試建立本地區(qū)該人群中LHD的參考區(qū)間。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2016年1—12月在本院體檢的9950例20～89歲的表觀健康者，均來(lái)自遂寧地區(qū)，其中男6095例，年齡20～89歲；女3855例，年齡20～88歲。將所有對(duì)象按性別分組后，再根據(jù)年齡分為6個(gè)亞組：20～29歲組、30～39歲組、40～49歲組、50～59歲組、60～69歲組、≥70歲組，男性各組依次為1216例、1237例、1514例、1162例、589例及377例，女性各組依次為1011例、1072例、917例、514例、230例及111例。根據(jù)參考區(qū)間的分組情況，每組另收集2017年10月2—6日健康體檢者各20例對(duì)建立的參考區(qū)間進(jìn)行驗(yàn)證[7]。

1.2 納入及排除標(biāo)準(zhǔn) 納入標(biāo)準(zhǔn)：(1)肝功、腎功、血脂、血糖、血清鐵均正常；(2)女性無(wú)月經(jīng)量過(guò)大，且未處于妊娠期或哺乳期；(3)近半年內(nèi)無(wú)獻(xiàn)血史、輸血史及手術(shù)治療史；(4)無(wú)其他慢性疾病史及家族史[7-8]。排除標(biāo)準(zhǔn)：采用2001年WHO和聯(lián)合國(guó)兒童基金會(huì)制定的貧血診斷標(biāo)準(zhǔn)排除貧血，即排除血紅蛋白<130 g/L的14歲以上男性體檢者和血紅蛋白<120 g/L的14歲以上女性(非孕婦)體檢者。

1.3 儀器與試劑 全血細(xì)胞計(jì)數(shù)(CBC)使用Sysmex XN2000全自動(dòng)血細(xì)胞分析儀及其配套校準(zhǔn)品、試劑進(jìn)行檢測(cè)；肝功、腎功、血脂、血糖及血清鐵均使用日立7600全自動(dòng)生化分析儀檢測(cè)，除血清鐵檢測(cè)試劑及其配套校準(zhǔn)品由日本和光提供外，其余試劑及配套校準(zhǔn)品均由四川邁克提供。所有檢測(cè)項(xiàng)目均參加了2016年衛(wèi)計(jì)委臨檢中心舉辦的室間質(zhì)量評(píng)價(jià)活動(dòng)(EQA)，且偏倚均小于1/2總允許誤差(TEa)，說(shuō)明實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)正確度驗(yàn)證通過(guò)；樣本檢測(cè)前儀器性能良好，室內(nèi)質(zhì)控均在控。

1.4 方法

1.4.1 樣本采集與檢測(cè) 使用EDTA-K2真空抗凝采血管采集所有對(duì)象清晨空腹靜脈血2 ml，輕輕顛倒混勻6～8次，并于采血后2 h內(nèi)完成全血細(xì)胞計(jì)數(shù)的檢測(cè)，收集數(shù)據(jù)。因遂寧地區(qū)屬四川盆地中部丘陵低山地區(qū)，海拔為400～600 m，按衛(wèi)生行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)《WS/T 441-2013人群貧血篩查方法》[9]的要求本地區(qū)血紅蛋白檢測(cè)結(jié)果不需要外部校正。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

1.5.1 離群值檢驗(yàn) 采用Dixon檢驗(yàn)的方法剔除離群值，即以極大值與極小值之間的差值為R，以極大或極小值與相鄰值之間的絕對(duì)差值為D，如果D/R≥1/3時(shí)，該值應(yīng)作為離群值被剔除[10-11]。

2 結(jié) 果

2.1 年齡及LHD水平的總體分布情況 入選的9950例表觀健康體檢者，經(jīng)離群值檢驗(yàn)，男性及女性各組均未發(fā)現(xiàn)離群值。按性別分組后，其年齡及LHD水平均呈偏態(tài)分布(均P<0.01)，男性年齡及LHD水平依次為43(32～53)歲、5.12(3.27～8.77)%；女性則為37(29～48)歲、8.77(5.60～13.68)%，兩組間年齡及LHD水平的差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。

2.2 不同年齡、不同性別組間LHD水平 各年齡組LHD水平均呈偏態(tài)分布(均P<0.01)，且男女間的差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(均P<0.01)，故需同時(shí)按性別和年齡段分組分別制定參考區(qū)間。見(jiàn)表1。

表1 不同年齡、不同性別組間LHD水平比較

注：1)表示男性兩年齡組間差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；2)表示女性兩年齡組間差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義

2.3 男性各年齡組LHD水平及其參考區(qū)間 男性30～39歲組、40～49歲組及50～59歲組3組間差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，參考區(qū)間可以合并，合并后差異仍具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見(jiàn)表2。

2.4 女性各年齡組LHD水平及其參考區(qū)間 女性20～29歲組、30～39歲組與40～49歲組3組間以及50～59歲組與60～69歲組兩組間的差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，參考區(qū)間可以合并。合并后女性差異仍具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見(jiàn)表3。

表2 男性各年齡組LHD水平及其參考區(qū)間

表3 女性各年齡組LHD水平及其參考區(qū)間

2.5 參考區(qū)間的驗(yàn)證 根據(jù)參考區(qū)間的分組情況，每組另收集2017年10月2—6日本院體檢中心健康體檢者各20例對(duì)建立的參考區(qū)間進(jìn)行驗(yàn)證，其檢測(cè)結(jié)果均在建立的參考區(qū)間范圍內(nèi)，驗(yàn)證通過(guò)。

3 討 論

ID容易導(dǎo)致IDA的發(fā)生，而IDA是最常見(jiàn)的貧血類(lèi)型，至今仍是全球關(guān)注的健康問(wèn)題；另一方面，機(jī)體缺鐵時(shí)可引起人體免疫力低下，導(dǎo)致兒童生長(zhǎng)發(fā)育遲緩，甚至影響其智力發(fā)育[1]，因此，及早發(fā)現(xiàn)并給予相應(yīng)預(yù)防治療措施，具有重要意義。LHD是由MCHC經(jīng)過(guò)數(shù)學(xué)公式計(jì)算得到的， LHD與鐵的可獲得性及可利用性相關(guān)，可用于ID及貧血類(lèi)型的診斷和鑒別診斷[1-6]。

本研究建立的男性和女性各年齡組的參考區(qū)間與張麗霞等[3]報(bào)道的參考區(qū)間[(1.86±0.77)%]、曾思強(qiáng)等[5]報(bào)道的參考區(qū)間[(2.37±0.81)%]明顯不一致，這可能與參考個(gè)體所在的地區(qū)、種族、生活飲食習(xí)慣、經(jīng)濟(jì)條件、自然礦物質(zhì)含量等因素不同有關(guān)[6]，同時(shí)受參考個(gè)體的納入和排除標(biāo)準(zhǔn)不一致的影響[7]。與采用衛(wèi)生行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)中MCHC的參考區(qū)間(男/女：316 g/L～354 g/L)直接轉(zhuǎn)換所得的LHD參考區(qū)間(男/女：1.00%～23.05%)相比較一致[7]。遂寧地區(qū)男性20～59歲組和60～69歲組的參考區(qū)間比行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)窄；女性20～49歲組和50～69歲組以及男性和女性≥70歲組的參考區(qū)間上、下限均高于行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)，但仍存在一定的差異，這可能與女性生理性周期失血及圍絕經(jīng)期激素紊亂易導(dǎo)致功能性子宮出血、老年人骨髓造血功能下降且是痔瘡的高發(fā)人群等因素有關(guān)[12]，人體少量失血將導(dǎo)致鐵的丟失，生成少量的小細(xì)胞低色素紅細(xì)胞，從而導(dǎo)致外周血中LHD水平升高。另一方面，行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)的參考個(gè)體選自東北、華北、西北、華南、華東、西南6個(gè)地區(qū)20～79歲的城鄉(xiāng)成人健康人群[7]，而本研究與行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)的參考人群存在一定差異，也可能導(dǎo)致兩者間LHD參考區(qū)間存在一定的差異。故新的檢測(cè)項(xiàng)目運(yùn)用于臨床前各地區(qū)需建立適宜于該地區(qū)的參考區(qū)間，若引用外部的參考區(qū)間使用前必須驗(yàn)證或評(píng)估適用性。

本研究也存在一定的局限性：(1)研究對(duì)象的納入和排除標(biāo)準(zhǔn)不嚴(yán)謹(jǐn)，未能排除大便隱血試驗(yàn)陽(yáng)性者以及吸煙和酗酒者；(2)納入的研究對(duì)象范圍仍不夠大，未聯(lián)合本地區(qū)其他醫(yī)院及體檢中心，且未包含嬰幼兒、青春期少年等特殊人群。

綜上所述，本研究成功建立了遂寧地區(qū)20～89歲表觀健康者人群外周血中LHD的參考區(qū)間，有助于LHD聯(lián)合鐵代謝、網(wǎng)織紅細(xì)胞、外周血紅細(xì)胞形態(tài)、骨髓鐵染色等檢測(cè)結(jié)果在ID篩查及相關(guān)貧血類(lèi)型鑒別診斷中的運(yùn)用[13-14]。今后要制定更加合理的參考個(gè)體納入和排除標(biāo)準(zhǔn)，在保證檢測(cè)結(jié)果一致性的條件下與本地區(qū)多中心合作，擴(kuò)大標(biāo)本量，驗(yàn)證或重新建立本地區(qū)人群中LHD的參考區(qū)間[15]。