女性抗苗勒氏管激素在新鮮胚胎移植周期的臨床研究*

馬淑霞 高瑞格 白 靜

(洛陽市婦女兒童醫(yī)療保健中心生殖醫(yī)學(xué)研究所，河南 洛陽 471000)

近年來，隨著人們生活環(huán)境、生活習(xí)慣、工作壓力以及各種疾病等因素，導(dǎo)致不孕不育發(fā)生率呈現(xiàn)上升及年輕化趨勢。數(shù)據(jù)報(bào)道顯示[1]：在不孕不育夫妻中40.0%是男方原因，其中50.0%的不育男性為精子形態(tài)異常，導(dǎo)致越來越多的人不得不借助輔助生殖技術(shù)來獲得孩子。在輔助生殖超促排卵中，卵巢反應(yīng)具有個(gè)體差異性，而在外源性促性腺激素(Gn)刺激下，不同患者卵泡發(fā)育數(shù)量、質(zhì)量不盡相同[2]。卵巢反應(yīng)則主要由卵母細(xì)胞數(shù)量、質(zhì)量，即：卵巢儲備功能有關(guān)，臨床多根據(jù)患者的年齡、基礎(chǔ)激素水平、卵巢對各項(xiàng)試驗(yàn)的敏感性，但是女性抗苗勒氏管激素對新鮮胚胎移植周期的影響尚缺乏報(bào)道[3-4]。為了探討女性抗苗勒氏管激素在新鮮胚胎移植周期中的檢測意義，本研究回顧分析了2016年3月—2017年9月在本院行IVF/ICSI助孕的不孕癥患者450例進(jìn)行分析研究。

1 資料與方法

1.1臨床資料 取2016年3月—2017年9月醫(yī)院體外受精—胚胎移植/體外受精—胞漿內(nèi)單精子注射不孕癥患者450例，采用隨機(jī)數(shù)字法分為卵巢低反應(yīng)組、卵巢正常反應(yīng)組和卵巢高反應(yīng)組。卵巢低反應(yīng)組140例，年齡(28～45)歲，平均(34.12±4.16)歲，體質(zhì)量指數(shù)(19.83～25.31)kg/m2，平均(21.53±2.14)kg/m2。卵巢正常反應(yīng)組140例，年齡(29～46)歲，平均(35.01±4.21)歲，體質(zhì)量指數(shù)(19.91～25.98)kg/m2，平均(21.74±2.21)kg/m2。卵巢高反應(yīng)組170例，年齡(27～46)歲，平均(35.12±4.21)歲，體質(zhì)量指數(shù)(19.71～25.64)kg/m2，平均(21.83±2.31)kg/m2。納入標(biāo)準(zhǔn)：①符合IVF/ICSI不孕癥臨床診斷標(biāo)準(zhǔn)；②入院后均經(jīng)過生化指標(biāo)、影像學(xué)檢查得到確診。排除標(biāo)準(zhǔn)：①排除不符合納入診斷標(biāo)準(zhǔn)者；②排除合并有影響效應(yīng)指標(biāo)觀測、判斷其他生理或病理者；③排除多卵巢綜合征、甲狀腺功能異常者。

1.2方法 分組標(biāo)準(zhǔn)。根據(jù)獲卵個(gè)數(shù)分為卵巢低反應(yīng)組、卵巢正常反應(yīng)組和卵巢高反應(yīng)組。判斷標(biāo)準(zhǔn)如下：(1)獲卵數(shù)≤4個(gè)為卵巢低反應(yīng)，獲卵數(shù)≥20個(gè)為卵巢高反應(yīng)組，獲卵數(shù)5～19個(gè)為卵巢正常反應(yīng)。胚胎移植后2周檢查β-hCG，妊娠45 d超聲下看到孕囊確定為臨床妊娠。(2)促性腺激素釋放激素激動(dòng)劑短方案超排卵。3組患者從月經(jīng)第2 d開始每天采用0.1 mg醋酸曲普瑞林(長春金賽藥業(yè)有限責(zé)任公司，國藥準(zhǔn)字H20041531)，月經(jīng)第3 d根據(jù)患者的年齡、基礎(chǔ)內(nèi)分泌激素、B超檢查卵巢竇卵泡數(shù)，從而確定Gn使用劑量，開始促排卵治療，對于至少有2個(gè)優(yōu)勢卵泡直徑≥18 mm時(shí)開始注射5000 IU～10000 IU hCG，注射后35～36 h后經(jīng)陰道超聲下取卵。最后430個(gè)周期進(jìn)行了新鮮胚胎移植。7例患者由于孕酮較高取消胚胎移植，1例由于內(nèi)膜過薄取消新鮮移植。12例患者預(yù)防卵巢過度刺激綜合征行全胚冷凍。(3)生化指標(biāo)檢查。3組患者均在促排周期月經(jīng)第2 d及注射人絨毛膜促性腺激素當(dāng)日檢測三組血清抗苗勒氏管激素(AMH)、E2及孕酮(P)水平情況。血清儲存在-20 ℃，采用高敏感雙位酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)檢測FSH、LH、E2及P水平。采用全自動(dòng)免疫化學(xué)發(fā)光法檢測3組卵巢激素，相關(guān)操作步驟必須嚴(yán)格遵循儀器、試劑盒操作說明進(jìn)行[5-6]。

2 結(jié) 果

2.13組FSH、LH、E2及P水平比較 卵巢正常反應(yīng)組FSH水平，低于卵巢低反應(yīng)組(P<0.04)；卵巢正常反應(yīng)組LH、E2及P水平、AMH水平，高于卵巢低反應(yīng)組(P<0.05)，低于卵巢高反應(yīng)組(P<0.05)，見表1。

表1 3組FSH、LH、E2及P水平比較

與卵巢低反應(yīng)組相比，aP<0.05；與卵巢高反應(yīng)組相比，bP<0.05

2.2妊娠患者與未妊娠患者Gn量、獲卵數(shù)及AMH水平比較

胚胎移植430例患者中，162例未妊娠，268例妊娠。妊娠患者與未妊娠患者Gn量及獲卵數(shù)比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)；妊娠患者AMH水平，高于未妊娠患者(P<0.05)，見表2。

表2 妊娠患者與未妊娠患者Gn量、獲卵數(shù)及AMH水平比較

3 討 論

輔助生殖技術(shù)屬于是一種新型的幫助不孕患者受孕的方法，它是指通過對精子、卵子、受精卵、配體等操作進(jìn)行處理，從而治療不孕不育的技術(shù)。根據(jù)我國衛(wèi)生部頒布的《人類輔助生殖技術(shù)管理方法》在實(shí)施人類輔助生殖技術(shù)時(shí)必須嚴(yán)格遵循我國人口和計(jì)劃生育法相關(guān)條例規(guī)定，保證每一位患者均能獲得健康、自然的孩子[7]。文獻(xiàn)報(bào)道顯示[8]：女性抗苗勒氏管激素(AMH)在新鮮胚胎移植中具有一定的指導(dǎo)意義，但是其具體機(jī)制尚不清楚。AMH屬于是一種表達(dá)純化的二聚體糖蛋白，在人體中主要位于19號染色體中，該糖蛋白與抑制素、激活素相同屬于轉(zhuǎn)化生長因子β超家族。文獻(xiàn)報(bào)道顯示：AMG在女性胎兒36周后由竇前卵泡以及小竇卵泡的顆粒細(xì)胞分化獲得，并且在人體中能抑制卵泡的生長，能有效的防治卵泡過快過早消耗[9]。AMH在卵巢不同反應(yīng)人群中表達(dá)不同。此外，AMH主要作用在靶器官細(xì)胞膜上，能發(fā)揮絲-蘇氨酸激活酶活性的特異性II型受體作用，屬于能間接作為卵泡質(zhì)量及獲卵數(shù)量的。本研究中，卵巢正常反應(yīng)組FSH水平，低于卵巢低反應(yīng)組(P<0.04)；卵巢正常反應(yīng)組E2及P水平、AMH水平，高于卵巢低反應(yīng)組(P<0.05)，低于卵巢高反應(yīng)組(P<0.05)。由此看出：AMH與卵巢反應(yīng)成正相關(guān)，F(xiàn)SH與卵巢反應(yīng)呈負(fù)相關(guān)。此外，有人提出AMH能有效的預(yù)測卵巢過度刺激綜合征的發(fā)生。國外學(xué)者對僅有單個(gè)卵泡發(fā)育的IVF患者作為研究對象，結(jié)果顯示：卵泡液AMH水平與臨床妊娠率、胚胎的種植率呈正相關(guān)，與流產(chǎn)率無關(guān)，因此，AMH并不能預(yù)測妊娠結(jié)局，難以直接反應(yīng)卵母細(xì)胞及胚胎的質(zhì)量[10]。本研究中新鮮胚胎移植430例患者中，162例未妊娠，268例妊娠。妊娠患者與未妊娠患者Gn量及獲卵數(shù)比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，妊娠患者AMH水平高于非妊娠患者，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)院意義。可見AMH對預(yù)測臨床結(jié)局有一定的指導(dǎo)意義。另一項(xiàng)研究統(tǒng)計(jì)≥35歲IVF患者認(rèn)為，血清AMH是預(yù)測臨床妊娠率的獨(dú)立因素，妊娠者AMH平均水平為3.2 ng/ml,顯著高于妊娠失敗者1.15 ng/ml[11]。因此，臨床上檢測AMH水平可能能作為獨(dú)立指標(biāo)或聯(lián)合其他指標(biāo)預(yù)測患者卵巢的儲備功能，可以初步判斷助孕結(jié)局，并且根據(jù)檢測水平及時(shí)采取有效的措施進(jìn)行干預(yù)，對于卵巢高反應(yīng)者可以通過減少Gn用量來降低卵巢風(fēng)險(xiǎn)，進(jìn)一步提高妊娠結(jié)局，盡可能的讓每一位女性都能獲得健康的寶寶。

綜上所述，女性抗苗勒氏管激素在IVF/ICSI不孕癥患者中具有一定指導(dǎo)意義，可以預(yù)測卵巢高反應(yīng)，對于妊娠結(jié)局的預(yù)測尚需進(jìn)一步研究。