全血標(biāo)本肌鈣蛋白I（TnI）應(yīng)用AQT90FLEX分析儀檢測(cè)的方法學(xué)評(píng)價(jià)

馬軍 張愛民 天津市中西醫(yī)結(jié)合醫(yī)院南開醫(yī)院 （天津 300100）

內(nèi)容提要： 目的：研究全血標(biāo)本肌鈣蛋白I（TnI）應(yīng)用AQT90FLEX分析儀檢測(cè)的方法學(xué)。方法：隨機(jī)抽取2019年3月1日～5日本院急診患者的靜脈血標(biāo)本63份。采用AQT90FLEX分析儀檢測(cè)全血標(biāo)本肌鈣蛋白I，驗(yàn)證分析測(cè)量范圍、攜帶污染率、功能靈敏度、參考區(qū)間。結(jié)果：0.010～16.0μg/L范圍內(nèi)的線性良好，攜帶污染率、功能靈敏度分別為0.018%、0.010μg/L，TnI濃度通過參考區(qū)間驗(yàn)證；63份全血標(biāo)本中TnI濃度＜0.010μg/L的比例為80.95%，處于正常范圍內(nèi)，19.05%的全血標(biāo)本存在TnI濃度偏高情況。結(jié)論：AQT90FLEX分析儀應(yīng)用在全血標(biāo)本肌鈣蛋白I的檢測(cè)中具有線性良好的優(yōu)勢(shì)，且攜帶污染率、功能靈敏度可達(dá)到質(zhì)量要求且參考區(qū)間驗(yàn)證通過，針對(duì)全血標(biāo)本TnI濃度高的患者應(yīng)盡早進(jìn)行心電圖檢查，便于早期發(fā)現(xiàn)及防治急性心肌梗死。

如何快速將急性心肌梗死患者與胸痛患者準(zhǔn)確鑒別，對(duì)于及時(shí)進(jìn)行對(duì)癥治療、改善預(yù)后具有重要作用。全血標(biāo)本肌鈣蛋白I（Troponin I，TnI）在急性心肌梗死的診斷中具有較高的特異性和敏感度，可作為快速輔助診斷心肌梗死突發(fā)的有效指標(biāo)，但是在臨床實(shí)際應(yīng)用過程中，采用血漿標(biāo)本對(duì)TnI進(jìn)行檢測(cè)具有檢測(cè)耗時(shí)長(zhǎng)的不足[1]，耽誤患者的治療時(shí)間。AQT90FLEX分析儀是一種全自動(dòng)的床旁快速免疫分析儀，對(duì)全血標(biāo)本TnI進(jìn)行檢測(cè)的時(shí)間較短，有利于患者盡快接受對(duì)癥治療，本文旨在分析應(yīng)用AQT90FLEX分析儀檢測(cè)TnI的方法學(xué)，正文詳細(xì)內(nèi)容如下。

1.資料與方法

1.1 臨床資料

研究對(duì)象：來自本院急診患者的靜脈血標(biāo)本63份（屬于2019年3月1日～5日）。健康體檢者的臨床診斷結(jié)果正常，血液常規(guī)、免疫檢驗(yàn)、生化、B超、心電圖檢查結(jié)果均正常。靜脈血標(biāo)本均經(jīng)乙二胺四乙酸二鉀（EDTA—K2）抗凝，靜脈血標(biāo)本對(duì)應(yīng)者的一般信息為：男28例，女35例；年齡為18～97歲，平均65.38歲。

1.2 方法

（1）分析測(cè)量范圍評(píng)價(jià)：以EP-6A文件為依據(jù)，將TnI濃度靠近線性范圍上限的患者全血標(biāo)本作為高值濃度（H），TnI濃度低則表示為低值濃度（H），形成系列檢測(cè)標(biāo)本，再使用AQT90FLEX分析儀檢測(cè)TnI，取每個(gè)濃度檢測(cè)兩次的平均值，分析試驗(yàn)數(shù)據(jù)的可靠性之后，進(jìn)行多項(xiàng)式回顧分析。

（2）攜帶污染率：對(duì)高濃度TnI全血標(biāo)本、低濃度TnI全血標(biāo)本分別檢測(cè)三次，得到H1、H2、H3、L1、L2、L3測(cè)定值，攜帶污染率為（L1-L3）×（H3-L3）×100.00%。

（3）功能靈敏度：以EP-7A文件為依據(jù)反復(fù)測(cè)定TnI低值標(biāo)本，得到±s、變異系數(shù)（CV），功能靈敏度即為CV不足20%的試驗(yàn)樣品所具有的分析物水平。

（4）參考區(qū)間：從在本院進(jìn)行體檢的健康體檢者中隨機(jī)選擇5例進(jìn)行驗(yàn)證，均檢測(cè)TnI，統(tǒng)計(jì)檢測(cè)結(jié)果，當(dāng)檢測(cè)結(jié)果在參考區(qū)間（TnI＜0.023μg/L）內(nèi)的數(shù)量在90%及以上，則說明可接受，已通過驗(yàn)證，針對(duì)未通過驗(yàn)證的情況，需進(jìn)行參考區(qū)間確認(rèn)試驗(yàn)。

1.3 觀察指標(biāo)

觀察分析測(cè)量范圍、攜帶污染率、功能靈敏度、參考區(qū)間。觀察檢測(cè)結(jié)果。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

將觀察指標(biāo)數(shù)據(jù)錄入統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件SPSS21.0、Microsoft Excel 2010中進(jìn)行處理，用[n(%)]的形式表示計(jì)數(shù)資料，χ2檢驗(yàn)，用±s的形式予以表示計(jì)量資料，t檢驗(yàn)，采用多項(xiàng)式回歸分析，P＜0.05表示差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2.結(jié)果

2.1 分析測(cè)量評(píng)價(jià)結(jié)果

直線回歸分析顯示線性范圍為0.010～16.0μg/L，提示線性良好（r=0.989）。

2.2 攜帶污染率

攜帶污染率為0.018%。

2.3 功能靈敏度

TnI濃度為0.010μg/L的CV值為16.00%，在20%以內(nèi)，結(jié)果為可接受，表明TnI的功能靈敏度即為線性范圍最低值（0.010μg/L）。

2.4 參考區(qū)間

5名健康體檢者全血標(biāo)本的TnI濃度為0.010μg/L以下，均在參考區(qū)間內(nèi)，結(jié)果為通過。

2.5 檢查結(jié)果

經(jīng)AQT90FLEX分析儀檢查結(jié)果顯示，63例急診患者的全血標(biāo)本中TnI濃度＞0.010μg/L者有12例（19.05%），其余51例（80.95%）患者的全血標(biāo)本中TnI濃度均＜0.010μg/L，提示51例患者的TnI濃度在正常區(qū)間內(nèi)。

3.討論

在臨床全血肌鈣蛋白I的檢測(cè)中多采用免疫分析儀，且不同的廠家生產(chǎn)的免疫分析儀及配套的質(zhì)控品存在差異，導(dǎo)致全血肌鈣蛋白I的檢測(cè)結(jié)果也出現(xiàn)差異，因此為了減少檢測(cè)結(jié)果的誤差，提高檢測(cè)準(zhǔn)確率，選擇一種準(zhǔn)確性高的儀器和檢測(cè)方法十分重要。

全血肌鈣蛋白I是診斷急性心肌梗死敏感性、特異性均較高的指標(biāo)[2]，AQT90 FLEX分析儀應(yīng)用在全血肌鈣蛋白I檢測(cè)中采用時(shí)間分辨熒光免疫分析法，其原理在于：預(yù)先固化生物素?；膯慰寺】筎nI抗體至檢測(cè)杯里的鏈霉素蛋白表面，并在捕獲抗體表面分別加入到分隔層和示蹤抗體，于分析過程中將標(biāo)本、分析液自動(dòng)進(jìn)入至含有特應(yīng)試劑的試杯中，示蹤抗體、捕獲抗體與TnI抗體形成一個(gè)三明治樣結(jié)構(gòu)，孵育結(jié)束后利用時(shí)間分辨熒光免疫分析法對(duì)干燥試杯表面的銪標(biāo)記示蹤抗體信號(hào)進(jìn)行測(cè)定，通過銪標(biāo)記信號(hào)直接測(cè)定被分析物質(zhì)，將測(cè)得的信號(hào)直接向濃度轉(zhuǎn)化，便于工作人員直接觀察和記錄。同實(shí)驗(yàn)室的大項(xiàng)檢驗(yàn)設(shè)備進(jìn)行比較，AQT90 FLEX分析儀可為用戶提供簡(jiǎn)便和安全的操作，能夠連續(xù)隨機(jī)進(jìn)樣，最快10min出結(jié)果，具有無污染的特點(diǎn)，特別適合應(yīng)用在急診胸痛TnI的檢測(cè)中，從而有利于快速鑒別診斷胸痛、急性心肌梗死，便于患者及時(shí)接受對(duì)癥治療。

本文從多個(gè)方面對(duì)AQT90 FLEX分析儀的檢測(cè)價(jià)值進(jìn)行了分析，以NCCLS EP5-A文件為參照，整體評(píng)估各個(gè)批次后發(fā)現(xiàn)AQT90 FLEX分析儀的分析測(cè)量范圍、攜帶污染率、功能靈敏度均能滿足臨床TnI檢測(cè)需要，參考區(qū)間能夠滿足性能要求。本次研究中檢出12例患者的TnI濃度不在正常范圍內(nèi)，提示其存在急性心肌梗死發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)，應(yīng)盡早進(jìn)行心電圖檢查。另外易火春，朱建輝，王思瑜，等[3]在《AQT90 FLEX分析儀檢測(cè)全血肌鈣蛋白I的方法學(xué)評(píng)價(jià)》一文中還提到，不同濃度質(zhì)控品的TnI總CV在規(guī)定的允許誤差范圍內(nèi)，提示總不精密度處于可接受范圍內(nèi)；質(zhì)評(píng)物檢測(cè)結(jié)果在規(guī)定允許的誤差范圍內(nèi)，證明了AQT90 FLEX分析儀用于檢測(cè)全血肌鈣蛋白I具有較高的精密度和準(zhǔn)確度，而本次研究中由于尚無質(zhì)控品及質(zhì)評(píng)物，因此無法進(jìn)行精密度和準(zhǔn)確度檢驗(yàn)。

總而言之，在全血肌鈣蛋白I的檢測(cè)中采用AQT90 FLEX分析儀具有較高的臨床價(jià)值，可為臨床檢測(cè)急性心肌梗死提供科學(xué)、有效的參考依據(jù)。