血凝儀的不同檢測系統(tǒng)對凝血四項檢測結(jié)果的可比性探討

郭吉 王愛瑋 天津市黃河醫(yī)院檢驗科 （天津 300110）

內(nèi)容提要： 血凝儀在臨床檢驗中檢測凝血四項對臨床多種疾病診治都有重要的價值。血凝儀檢測系統(tǒng)包括檢測儀器、試劑及校準(zhǔn)品等，而臨床可采取的血凝儀檢測系統(tǒng)較多，不同的檢測系統(tǒng)檢測結(jié)果存在一定的差異。各類檢測系統(tǒng)血凝儀檢測結(jié)果的可比性是醫(yī)學(xué)檢驗中心比較熱門的課題，也是對他們的考驗。國內(nèi)中等以上的醫(yī)院基本已開展凝血四項檢驗，為此做好血凝儀不同檢測系統(tǒng)檢測結(jié)果可比性研究，可從凝血四項展開，即凝血酶原時間（PT）、凝血酶時間（TT）、活化部分促凝血活酶激酶時間（APTT）及纖維蛋白原（FIB）。

隨著醫(yī)學(xué)分子生物學(xué)與細(xì)胞生物學(xué)不斷發(fā)展，凝血與血栓相關(guān)疾病在理論與臨床應(yīng)用等方面均取得了明顯的進步。分子生物技術(shù)的發(fā)展，使得血栓疾病診斷方法、檢測手段、疾病防治均取得了長足進步。總的來說，止血和血栓檢測意義要高于出血性疾病范疇，為此重視血栓和止血試驗檢測，推廣檢測技術(shù)的應(yīng)用，成為一大熱點課題。凝血酶原時間（PT）、凝血酶時間（TT）、活化部分促凝血活酶激酶時間（APTT）及纖維蛋白原（FIB）是凝血四項檢驗主要指標(biāo)，也是臨床疾病診治中比較有價值的部分，但是不同的血凝儀檢測系統(tǒng)可能檢出的結(jié)果差異性較大，為了減少這種差異，就需要定期進行對比，盡量減少這種系統(tǒng)帶來的差異，從而提高臨床檢驗科學(xué)與合理性[1]。為了分析血凝儀不同檢測系統(tǒng)對凝血四項檢測結(jié)果的可比性情況，本文進行了如下探討。

1.不同血凝儀檢測系統(tǒng)對PT結(jié)果可比性分析

PT檢測結(jié)果受到很多因素干擾，其中組織凝血活酶試劑類型、質(zhì)量屬于最為主要的因素，若應(yīng)用秒、活動度等指標(biāo)報告結(jié)果，組織凝血活酶試劑不同，則會出現(xiàn)結(jié)果差異，導(dǎo)致檢驗結(jié)果無可比性[2]。一旦按照這樣的結(jié)果指導(dǎo)臨床抗凝治療，危險性較大，為此國際血液學(xué)標(biāo)準(zhǔn)化委員會規(guī)定，采取組織凝血活酶試劑時應(yīng)標(biāo)明其國際敏感度指數(shù)（ISI），報告PT結(jié)果時采取國際標(biāo)準(zhǔn)化比值，即INR。INR=凝血酶原比率·ISI，凝血酶原比率指的是患者樣本和正常樣本PT秒數(shù)比值，ISI則可反映不同組織凝血活酶試劑對凝血因子缺乏敏感性情況[3]。采取INR報告PT能避免組織凝血活酶試劑因缺乏凝血因子敏感性所致的差異。國內(nèi)衛(wèi)生部臨床檢驗中心于1996年向WHO相關(guān)部門申請，獲取組織凝血活酶參考品，將其作為標(biāo)準(zhǔn)制定了國內(nèi)參考品，并在國內(nèi)大范圍推廣，得到了認(rèn)可。1997年，中華醫(yī)學(xué)會檢驗學(xué)分會等聯(lián)合提出中國檢測FIB、PT及APTT標(biāo)準(zhǔn)化方案。當(dāng)然，在實踐中發(fā)現(xiàn)，盡管應(yīng)用標(biāo)準(zhǔn)化方案實驗，不同血凝儀檢測系統(tǒng)所得的PT與INR依舊有差異。隨后，越來越多的學(xué)者對影響檢測結(jié)果一致性的因素實施了探索與分析，比如應(yīng)用同一臺血凝儀、兩種組織凝血活酶試劑、同一個INR值對血漿定標(biāo)后檢測正常體檢者、初期與長期服用抗凝藥物者INR，發(fā)現(xiàn)兩種試劑間差異顯著，指出INR一致性影響因素可能源于試劑敏感性與口服抗凝劑時期及其他藥物的干擾。也有學(xué)者認(rèn)為不同血凝儀會干擾INR值，利用一種已知ISI組織凝血活酶定標(biāo)儀器特異性ISI值，在一定程度上可提高同一標(biāo)本INR檢測結(jié)果可比性。

2.不同血凝儀檢測系統(tǒng)對APTT與TT結(jié)果可比性分析

應(yīng)用不同儀器或試劑處理時，APTT與TT檢測結(jié)果也會受到影響，差異也比較突出，但目前關(guān)于這方面的報道十分少見，缺乏有利可靠的校正方法。結(jié)合過去一些報道及學(xué)者的研究看出，檢測試劑不同可能是造成APTT與TT結(jié)果有差異的原因。APTT檢測主要是將一種腦磷脂與激活劑加入乏血小板血漿中，經(jīng)溫浴處理后，加入鈣離子（適當(dāng)濃度）中，以秒計纖維蛋白凝塊形成時間，所得值便為APTT。過去常用的APTT檢測試劑激活劑主要有硅土、鞣花酸及白陶土等，但不同的廠家、儀器配套試劑所用的激活劑也不同，或激活劑相同情況下也可能存在內(nèi)在品質(zhì)差異，使得激活劑對凝血因子敏感性也不同，最終檢測的結(jié)果也就不同。TT檢驗試劑，不同廠家所用的凝血酶成分盡管相同，但濃度可能有差異，這就會導(dǎo)致血漿凝固時間出現(xiàn)差異?；诖耍瑸榱颂岣卟煌治鰞x對凝血四項結(jié)果的可比性，就應(yīng)對統(tǒng)一試劑實施檢測。在近期一些研究中看出，對APTT和TT等無需做標(biāo)準(zhǔn)曲線的檢測項目，僅僅應(yīng)用統(tǒng)一試劑和新鮮定標(biāo)血漿校正儀器后，方能進一步提高檢測結(jié)果可比性[4]。但是這種情況還有待進一步研究與探索，才能付諸于實踐。

3.不同血凝儀檢測系統(tǒng)對FIB結(jié)果可比性分析

臨床檢測FIB的方法較多，各種檢測方法所得的結(jié)果也存在一定的差異。美國國家臨床實驗室標(biāo)準(zhǔn)化委員會推薦的方案為克勞斯法，這種方法檢測的是有凝血功能的FIB，才能獲取較高的精密度。縱觀過去臨床應(yīng)用來看，血凝儀采取克勞斯法檢測FIB時，應(yīng)先建立標(biāo)準(zhǔn)曲線，而標(biāo)準(zhǔn)曲線的建立需定標(biāo)血漿，即事先準(zhǔn)備好標(biāo)準(zhǔn)品。但不同廠家FIB標(biāo)準(zhǔn)品存在很大差異，這也為FIB測定結(jié)果可比性提供了條件。WHO于1992年建立首個血漿FIB國際標(biāo)準(zhǔn)品，自從建立該標(biāo)準(zhǔn)品后，其應(yīng)用逐漸推廣開來，不過其復(fù)溶時存在混濁，存放時間過長后這種混濁更顯著。1999年又建立第二個FIB國際標(biāo)準(zhǔn)品，替代了第一個標(biāo)準(zhǔn)品，之后各國都按照該標(biāo)準(zhǔn)品量化本國的次級標(biāo)準(zhǔn)品，得到了廣泛認(rèn)可。盡管我國也推薦采取克勞斯法檢測FIB，但廠家不同，其生產(chǎn)的定標(biāo)血漿與試劑就存在差異，不同檢測系統(tǒng)所得FIB值也會有差異。為了提高FIB檢測結(jié)果因不同檢測系統(tǒng)檢測的可比性，可選擇新鮮血漿定期比對，將校正合格的血凝儀測定所得FIB作為定值血漿，然后建立血凝儀曲線，提高FIB可比性。這種操作方法簡單可行，在國內(nèi)逐漸得到證實。

4.小結(jié)

血凝儀的應(yīng)用逐漸普遍，為臨床疾病診斷與治療提供了不錯的依據(jù)。當(dāng)前，國內(nèi)中等以上醫(yī)院大部分已開展凝血四項檢查，而凝血四項指標(biāo)也是止血功能評估常用項目，對判斷出血、血栓性疾病及監(jiān)測抗栓與溶栓治療提供了條件。但是，不同的血凝儀檢測系統(tǒng)所得的凝血四項檢驗結(jié)果存在差異。檢測系統(tǒng)指的是完成一個檢驗項目涉及的儀器、校準(zhǔn)品、試劑、保養(yǎng)計劃等，國際上推薦使用固定組織的檢測系統(tǒng)，才能使得患者檢驗結(jié)果有據(jù)可循，且有可比性[5]。血凝儀測定的原理、試劑、校準(zhǔn)品等存在差異，測定結(jié)果、參考范圍也會出現(xiàn)差異，造成同一個樣本在不同檢測系統(tǒng)中測定的項目結(jié)果存在差異，給臨床診治帶來了困難?；诖?，如何確保血凝儀檢測結(jié)果具有可比性就十分必要。盡管國內(nèi)已有一些報道對不同檢測系統(tǒng)結(jié)果可比性進行了報道，但缺乏大樣本的調(diào)查，還需要在以后的研究中加大投入力度，同時衛(wèi)生行政部門應(yīng)重視相關(guān)管理，統(tǒng)一比對，才能更好地服務(wù)社會。