中藥復(fù)方防治阿爾茨海默病的實驗研究概況

楊夢琳，張運輝,2*，伍大華

(1.重慶三峽醫(yī)藥高等專科學(xué)校中醫(yī)學(xué)院，重慶 404120；2.湖南中醫(yī)藥大學(xué)中醫(yī)學(xué)院，湖南 長沙 410208；3.湖南中醫(yī)藥大學(xué)中西結(jié)合醫(yī)院，湖南 長沙 410006)

阿爾茨海默病(Alzheimer's disease,AD)是老年性癡呆癥類型之一，以進行性認知功能障礙和行為損害為主要臨床表現(xiàn)的中樞神經(jīng)系統(tǒng)的退行性疾病，其特征性病變機理為大腦皮層萎縮，伴有淀粉樣β蛋白(Aβ)沉積所致的神經(jīng)元斑塊、高磷酸化Tau蛋白所致的神經(jīng)元纖維纏結(jié)和記憶性神經(jīng)細胞數(shù)目丟失。

近年來，隨著對防治AD的實驗研究和臨床觀察的不斷深入，有關(guān)中藥復(fù)方防治阿爾茨海默病的研究越來越受到廣泛的關(guān)注和重視，并取得了巨大進展。筆者就近年來中藥復(fù)方防治阿爾茨海默病實驗研究資料進行整理，闡述如下。

1 調(diào)控AD膽堿能系統(tǒng)

一般學(xué)者認為，膽堿能系統(tǒng)與人類的大腦學(xué)習(xí)記憶密切相關(guān)。AD患者腦內(nèi)膽堿能神經(jīng)細胞損害嚴重，患者腦組織中膽堿乙酰轉(zhuǎn)移酶(ChAT)活性明顯減低，而乙酰膽堿酯酶(AchE)活性卻顯著增強，因此乙酰膽堿含量明顯降低，最終導(dǎo)致以學(xué)習(xí)記憶減退和認知障礙為主的臨床表現(xiàn)，從而產(chǎn)生癡呆癥狀。所以改善膽堿能神經(jīng)系統(tǒng)功能已成為防治AD研究的重要方法之一。

王虎平等[1]通過相關(guān)實驗發(fā)現(xiàn)，逍遙散能提高氫溴酸東莨膽堿致AD模型小鼠的ChAT活性，降低AchE活力，從而改善AD模型小鼠的膽堿能功能。劉志壽等[2]研究發(fā)現(xiàn)，地黃益智顆粒能明顯提高D-半乳糖致AD模型大鼠的ChAT活力，減低AchE活性，從而對老年性癡呆起到防治作用。董云芳[3]通過研究證明，金思維(由人參、肉蓯蓉、遠志、郁金等中藥組成)可提高東莨膽堿導(dǎo)致AD模型小鼠皮層和海馬組織Ach含量，降低皮層和海馬組織AchE活性，從而改善東莨膽堿導(dǎo)致AD模型小鼠的學(xué)習(xí)記憶能力。

2 拮抗AD中β淀粉樣蛋白及高度磷酸化Tau蛋白

多項研究證明，以Aβ為主要成分的神經(jīng)元斑塊(SP)和高度磷酸化Tau蛋白所導(dǎo)致的神經(jīng)元纖維纏結(jié)(NFT)是AD的主要病理表現(xiàn)，所以干預(yù)Aβ的聚集和Tau蛋白高度磷酸化是防治AD的主要措施之一。

牟南樵[4]研究發(fā)現(xiàn)，加減益經(jīng)湯能有效預(yù)防去勢雌性大鼠在學(xué)習(xí)和認知障礙上的改變，保護大腦的學(xué)習(xí)記憶功能，其作用機制可能是通過減少GSK-3β活性表達從而降低Tau蛋白相關(guān)位點的磷酸化水平，保護了海馬區(qū)神經(jīng)細胞的形態(tài)和功能，預(yù)防阿爾茨海默病的發(fā)展。黃麗萍等[5]研究發(fā)現(xiàn)，二至丸(由女貞子、墨旱蓮組成)能通過延緩Aβ的生成與神經(jīng)細胞的氧化損害來達到治療AD作用。王志勇[6]實驗表明，扶正祛邪方(由人參、黃連、川芎組成)能通過減低Aβ蛋白的表達，從而增強AD模型細胞的活性。陳延[7]通過實驗發(fā)現(xiàn)，加減薯蕷丸(由山藥、熟地黃、制何首烏、黨參、白芍、炒白術(shù)、茯苓、遠志、當歸、石菖蒲、枸杞、杜仲和五味子組成)能調(diào)控能量應(yīng)激介導(dǎo)的自噬，拮抗CCH大鼠海馬Aβ蛋白沉積，同時還能調(diào)控miR-132/GSK-3β信號，抑制CCH大鼠海馬Tau蛋白的高度磷酸化。楊文育等[8]研究表明，清心開竅方(由生地黃、麥冬、白芍、石斛、牡丹皮、茯神、苦參、陳皮、知母和石菖蒲組成)可以下調(diào)GSK3α、βAPP和Aβ的表達，并能降低APP/PS1雙轉(zhuǎn)基因小鼠腦內(nèi)皮質(zhì)及海馬區(qū)的神經(jīng)元斑塊數(shù)目?？祫P[9]研究發(fā)現(xiàn)，癲癇清顆粒(由石菖蒲、膽南星、郁金、熟地黃、柴胡、水蛭、白芍和蒲黃等組成)能夠抑制Aβ1-42引起AD模型小鼠Tau蛋白異常磷酸化，同時能抑制Aβ1-42引起AD模型小鼠腦組織中的Aβ1-42、Aβ1-40的沉積及含量，從而拮抗Aβ的生成。吳紅彥等[10]實驗證實，黑逍遙散能通過抑制wnt信號通路相關(guān)基因wisp-1、crebbp、igfbp-1和casq2的表達從而影響Aβ25-35誘導(dǎo)AD模型大鼠的Aβ代謝和Tau蛋白異常磷酸化。季雪[11]實驗發(fā)現(xiàn)，不同濃度的解毒益智方(由川芎、黃連、益智仁、龜板膠、地龍、山茱萸和酒大黃組成)能明顯減少AD線蟲頭部Aβ多肽的沉積情況。齊越等[12]研究發(fā)現(xiàn)，益智聰明湯(由人參、茯苓、制何首烏、肉蓯蓉、益智仁、知母、石菖蒲、遠志、川芎、赤芍和牛膝組成)能降低Aβ25-35致阿爾茨海默病模型小鼠GSK-3β的活性，抑制Tau蛋白異常磷酸化。

3 抑制AD中氧化應(yīng)激及清除自由基

多數(shù)學(xué)者認為，在大腦的退化進程中，神經(jīng)元細胞膜上不飽和脂肪酸容易被氧化而產(chǎn)生大量自由基，引發(fā)大量的過氧化脂質(zhì)(LPO),其代謝產(chǎn)物中丙二醛(MDA)毒性最強，極大地影響細胞代謝和正常功能，導(dǎo)致神經(jīng)細胞功能凋亡，從而誘發(fā)AD的形成。但是機體中存在著許多自由基清除系統(tǒng)，例如超氧化物歧化酶(SOD)與谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-Px)等拮抗氧化系統(tǒng)。因此拮抗氧化應(yīng)激反應(yīng)已成為防治AD研究的重要措施之一。

賀勇[13]通過實驗發(fā)現(xiàn)，提高大鼠腦組織抗氧化酶SOD和GSH-Px活性，降低MDA含量，可能是補腦膠囊(由人參、石菖蒲、遠志等組成)防治AD模型大鼠的作用機制之一。曹玉成[14]研究表明，補腎填髓方(由淫羊藿、何首烏、龜板、龍骨、石菖蒲、遠志等組成)能增強SOD酶活性，降低MDA酶活性，修復(fù)模型大鼠氧化應(yīng)激。成紅江[15]通過實驗證明，加味不忘散(由炙遠志、石菖蒲、人參、茯苓、當歸、白術(shù)、黃連和茯神組成)能增強chAT活力降低導(dǎo)致microRNA-30e海馬過表達引起認知功能障礙的SD大鼠的chAT活力，且高、低劑量之間具有濃度依賴性。高海寧[16]通過實驗發(fā)現(xiàn)，六味地黃丸含藥血清可減緩H2O2損傷的PC12細胞LDH漏出量及MDA含量，增強細胞SOD活性，提高細胞抗氧化能力，延緩細胞氧化損傷。趙海等[17]研究發(fā)現(xiàn)，補腦膠囊(由人參、石菖蒲、遠志等組成)能提高AD模型大鼠SOD和GSH-Px的活力，減低MDA含量，從而改善AD模型大鼠的學(xué)習(xí)記憶能力及腦組織變性。劉娟[18]實驗發(fā)現(xiàn)，補腎健脾方(由淫羊藿、生黃芪、鬼箭羽、蒼術(shù)、水蛭和甘草組成)能提高2型糖尿病合并AD模型大鼠SOD和GSH-Px的活性，降低MDA含量，考慮氧化應(yīng)激是補腎健脾方干預(yù)T2DM、AD的共同作用靶點之一。陳洪燕等[19]實驗證實，蜂眠寧膠囊(由蜂胎凍干粉、黃芪、纈草、酸棗仁組成)能上調(diào)D-半乳糖所致衰老模型小鼠腦組織中SOD和GSH-Px的含量，降低MDA含量，從而提高AD模型小鼠學(xué)習(xí)記憶能力。張娜[20]實驗發(fā)現(xiàn)，地黃飲子能提高Aβ1-42所致AD模型大鼠腦組織中SOD和GSH-Px的活性，減低MDA含量，從而增強AD模型大鼠抗氧化能力。張利平等[21]研究證明，自擬清心益智湯(由生黃芪、炒棗仁、地龍、火麻仁、赤芍、益智仁、當歸、桃仁、桂枝和炙甘草組成)能提高AD患者SOD的活力，降低MDA含量，從而改善AD患者的生活質(zhì)量與認知水平。劉繼朔等[22]研究發(fā)現(xiàn)，薏靈酒(由薏苡仁、靈芝組成)能提高D-半乳糖所致衰老模型小鼠血清SOD的和CAT的含量，下調(diào)MDA含量，從而改善AD模型小鼠學(xué)習(xí)記憶能力。

4 拮抗AD神經(jīng)元凋亡

多項研究證實，大腦的神經(jīng)細胞丟失是AD的主要病理表現(xiàn)之一。AD的神經(jīng)細胞凋亡機制與Aβ過度表達、氧化應(yīng)激、半胱天冬酶(Caspase)激活、細胞周期中諸多因素調(diào)節(jié)異常及能量代謝障礙密切相關(guān)。Bcl-2基因家族是目前廣泛研究的一類神經(jīng)細胞減少相關(guān)基因，其調(diào)控和表達是影響神經(jīng)細胞凋亡的重要因素之一。因此抑制神經(jīng)元凋亡成為防治AD研究的重要內(nèi)容。

詹欽凱[23]實驗發(fā)現(xiàn)，補腎益智方(由蛇床子、枸杞子、人參、何首烏、牡丹皮和冰片組成)能修復(fù)海馬神經(jīng)元的損傷及丟失，增強海馬注射Aβ25-35致記憶障礙模型小鼠的學(xué)習(xí)記憶能力，對AD有一定治療作用。賈星星[24]實驗證明，扶正祛邪方(由人參、黃連、川芎組成)可能通過NMDAR/PP2A/tau途徑保護SAMP8小鼠的神經(jīng)細胞，從而增強小鼠的學(xué)習(xí)記憶。張越穎[25]通過實驗證明，與模型組相比，六味地黃丸水煎劑可以明顯延緩Caspase-3的升高。邵怡然等[26]通過實驗發(fā)現(xiàn)，洗心湯含藥腦脊液對Aβ1-42誘導(dǎo)所致神經(jīng)細胞凋亡具有明顯的保護作用。夏青[27]研究發(fā)現(xiàn)，補腦扶神方(由竹節(jié)參、天麻、白果組成)可以明顯抑制Aβ25-35誘導(dǎo)的AD模型大鼠海馬區(qū)腦損傷，并增加尼氏小體數(shù)量，促進神經(jīng)遞質(zhì)的合成，達到保護腦組織及神經(jīng)元的目的。潘怡宏等[28]研究證實，補元清腦顆粒(由石菖蒲、遠志、人參、茯苓和熟地黃等組成)可以上調(diào)APP/PS1雙轉(zhuǎn)基因小鼠海馬組織Bcl-2蛋白的表達水平，從而增強APP/PS1雙轉(zhuǎn)基因小鼠的學(xué)習(xí)記憶能力，并有抑制神經(jīng)元的作用。樸鐘源等[29]實驗證實，地黃飲子能降低Aβ25-35誘導(dǎo)的SH-SY5Y細胞的細胞凋亡率，從而抑制神經(jīng)元的凋亡。

5 抗AD炎癥反應(yīng)

慢性炎癥過程一直被認為是AD的神經(jīng)病理學(xué)發(fā)病的重要機理之一。在AD的炎癥反應(yīng)發(fā)生發(fā)展過程中炎性細胞因子損傷、核轉(zhuǎn)錄因子(NF-κB)、被激活及膠質(zhì)細胞受到人們廣泛的重視。因此抑制炎癥反應(yīng)成為防治AD研究的重要途徑之一。

劉斌[30]體外實驗研究表明，補陽還五湯通過拮抗NK-κBP65信號通路影響ICAM-1、VCAM-1蛋白介導(dǎo)的血管內(nèi)皮炎癥，修復(fù)Aβ誘導(dǎo)的腦微血管內(nèi)皮細胞損傷引起的形態(tài)學(xué)改變，對腦微血管內(nèi)皮細胞產(chǎn)生保護作用。馬福云[31]研究表明，補腎方(由熟地黃、山茱萸、山藥、茯苓、巴戟天、五味子、肉蓯蓉、枸杞、杜仲、續(xù)斷組成)治療AD可能是通過神經(jīng)炎癥通路發(fā)揮作用，TGF-β1是可能的作用靶點。劉梟[32]研究表明，改良三甲散(由炙龜板、炙鱉甲、炙地鱉蟲、炙地龍、石菖蒲和制何首烏組成)含藥腦脊液可以降低JNK磷酸化，延緩炎癥介質(zhì)和細胞因子的釋放，從而減弱激活的BV2細胞對PC12細胞的毒性作用，這可能是改良三甲散治療老年性癡呆病的作用機制之一。崔勇[33]研究發(fā)現(xiàn)，六味地黃丸可以拮抗TLR4/NF-κB信號轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑，下調(diào)APP/PS1雙轉(zhuǎn)基因小鼠TNF-α和IL-1β的表達，從而通過減輕中樞免疫炎癥反應(yīng)，發(fā)揮防治AD的作用。張佳佳等[34]研究發(fā)現(xiàn)，天芪益智顆粒(由紅芪和紅景天組成)可以抑制阿爾茨海默病模型大鼠腦組織膠質(zhì)細胞的激活，拮抗促炎性因子合成、分泌，有效遏制神經(jīng)炎性反應(yīng)。

6 改善AD突觸可塑性

大多數(shù)學(xué)者認為，AD的發(fā)病與突觸可塑性的損傷具有巨大的關(guān)系。大腦突觸結(jié)構(gòu)和功能的可塑性的損害是AD病理進展至關(guān)重要的中心環(huán)節(jié)，同時也是AD學(xué)習(xí)記憶能力下降的病理機理之一。因此改善突觸可塑性已成為防治AD的主要措施之一。

李棟[35]通過實驗發(fā)現(xiàn)，六味地黃苷糖及其活性成分可通過對D-絲氨酸代謝、轉(zhuǎn)運等通路的調(diào)節(jié)發(fā)揮其對皮質(zhì)醇所致LTP的損害的保護作用。馮慧利[36]研究發(fā)現(xiàn)，中藥復(fù)方金思維(由人參、肉蓯蓉、石菖蒲和郁金等組成)能使AD模型小鼠神經(jīng)氈內(nèi)的突觸數(shù)量增加，并使神經(jīng)元和突觸結(jié)構(gòu)有不同程度的改善。王健等[37]通過研究證明，調(diào)心方(由黨參、桂枝、石菖蒲、遠志、龍骨、白芍和甘草等組成)能抑制APP/PS1雙轉(zhuǎn)基因AD小鼠突觸結(jié)構(gòu)退變和突觸數(shù)量較少，對認知和突觸具有保護作用。陳芳[38]通過實驗發(fā)現(xiàn)，在AD早期參枝苓口服液(由黨參、桂枝和茯苓等組成)可能通過增加海馬CA1區(qū)突觸數(shù)目、改善髓鞘板層結(jié)構(gòu)和少突膠質(zhì)細胞、神經(jīng)元的超微結(jié)構(gòu)發(fā)揮髓鞘、突觸保護作用，從而改善APP/PS1小鼠早期學(xué)習(xí)記憶障礙。劉曉蕾[39]研究發(fā)現(xiàn)，隨著加味不忘散(由人參、石菖蒲、遠志、茯苓、茯神、白術(shù)、黃連和當歸組成)干預(yù)劑量增加對AD模型大鼠海馬內(nèi)突觸結(jié)構(gòu)逐漸由不完整變完整，突觸間隙由大變小，突觸后膜內(nèi)的致密物也由少變多，提示加味不忘散對AD模型大鼠海馬內(nèi)突觸結(jié)構(gòu)和數(shù)量具有改善作用，并具有劑量依賴性。高彥斌等[40]研究發(fā)現(xiàn)，洗心湯能上調(diào)APP/PS1雙轉(zhuǎn)基因小鼠突觸后致密物質(zhì)-95(PSD-95)、N-甲基-D-天冬氨酸受體2B(NMDAR2B)、髓鞘踐行蛋白(MBP)及生長相關(guān)蛋白43(GAP43)的表達，維持海馬神經(jīng)元突觸正常功能，保護神經(jīng)元完整性，改善APP/PS1雙轉(zhuǎn)基因小鼠學(xué)習(xí)記憶能力。張敬華[41]研究發(fā)現(xiàn)，華佗再造丸(由當歸、川芎、吳茱萸、紅花和冰片等組成)能夠提高APP/PS1小鼠突觸可塑性，逆轉(zhuǎn)APP/PS1小鼠海馬中的LTP損傷，從而增加海馬區(qū)樹突棘密度。李孟宇[42]通過實驗發(fā)現(xiàn)，六味地黃湯及活性成分可顯著提高SAMP8小鼠的LTP，表示六味地黃湯及活性成分能增強SAMP8小鼠神經(jīng)突觸可塑性的作用。

7 討論與展望

近幾年來，大量的實驗和臨床療效大大地彰顯了中藥復(fù)方防治AD的優(yōu)勢。由于AD發(fā)病機制復(fù)雜，動物造模不能完全再現(xiàn)人體AD的病理改變，再加上中藥復(fù)方的成分的復(fù)雜性，臨床診斷和療效判定標準沒有統(tǒng)一，這些給中藥復(fù)方防治AD的實驗研究和臨床觀察帶來了巨大的挑戰(zhàn)。因此，總結(jié)中藥復(fù)方治療AD的臨床療效與實驗進展，進一步加強中藥復(fù)方對AD研究的深度與廣度，提出中藥復(fù)方防治AD研究科學(xué)性、獨創(chuàng)性的思路與方法，建立一個科學(xué)、統(tǒng)一、有效的診斷和療效評價系統(tǒng)，還有待進一步探索。