微量元素檢測分析前影響因素

周裕騰

（福建省福州兒童醫(yī)院 福建福州 350005）

1 前言

微量元素是指人體內(nèi)含量為10～104 μg/L 的元素，其檢測分析結(jié)果受檢測樣本預(yù)期濃度及檢測方法的影響。從當(dāng)前對測定誤差及檢測影響因素的分析發(fā)現(xiàn)，元素天然豐度及種類或樣本預(yù)期濃度產(chǎn)生的誤差遠(yuǎn)遠(yuǎn)小于污染產(chǎn)生的誤差。近年來，研究領(lǐng)域針對微量元素檢測分析前的變異控制展開了更為深入的探究，全方位分析了影響微量元素檢測的因素。本文從內(nèi)外環(huán)境入手進(jìn)行具體探究，以便能夠找到合適的措施彌補(bǔ)對檢測方法靈敏度及精準(zhǔn)度造成的影響，保障微量元素檢測分析結(jié)果的科學(xué)性及客觀性。

2 檢測設(shè)備及檢測環(huán)境

檢測設(shè)備中常用的樣品采集器具及存儲容器是造成樣品污染的主要因素，大部分實(shí)驗(yàn)室會通過書面制度對檢測設(shè)備的處理及管理做出規(guī)定，以規(guī)避檢測設(shè)備污染情況。通常實(shí)驗(yàn)室會通過酸洗的方式處理所有玻璃器皿及塑料器具，即用濃度10%的硝酸溶液進(jìn)行浸泡，再使用Ⅰ類水進(jìn)行反復(fù)沖洗；而導(dǎo)管及針頭類型設(shè)備會使用濃度為4%的超純極乙酸及濃度為2%的超純級硝酸進(jìn)行浸泡與漂洗12 h，配合預(yù)期下限檢測方法對浸泡液中微量元素含量進(jìn)行檢測，若結(jié)果超過檢出水平，需要進(jìn)一步分析，判斷污染是否還具有臨床意義。雖然擁有嚴(yán)格的管理制度及設(shè)備處理標(biāo)準(zhǔn)，但是在實(shí)際操作中，隨機(jī)污染的情況仍然不可避免。為了減少檢測設(shè)備污染情況，應(yīng)加大管理力度及人力資源投入力度，對檢測設(shè)備進(jìn)行更為嚴(yán)格且細(xì)致的檢查，認(rèn)真驗(yàn)收采購的器具與耗材[1]。

此外，微量元素檢測過程中的環(huán)境污染也十分常見。實(shí)驗(yàn)室理論要求達(dá)到100 級潔凈實(shí)驗(yàn)室，但在實(shí)際情況中很難達(dá)到此標(biāo)準(zhǔn)。因此，在實(shí)驗(yàn)室環(huán)境管理與控制過程中，應(yīng)盡量控制塵埃及氣溶膠對微量元素檢測分析的影響，實(shí)驗(yàn)臺及地面、設(shè)備表面等物體的表面清潔應(yīng)盡量選擇濕掃、濕擦方式，減少塵埃的出現(xiàn)；分析天平的使用應(yīng)盡量在無塵柜中進(jìn)行，而處理非干燥組織或樣本過程中，要使用Ⅱ級生物安全柜確保環(huán)境的穩(wěn)定。

3 實(shí)驗(yàn)用水

微量元素檢測是一項(xiàng)對檢測過程精密性、客觀性有著嚴(yán)格要求的實(shí)驗(yàn)，其對于實(shí)驗(yàn)用水有著具體的要求與標(biāo)準(zhǔn)，在實(shí)驗(yàn)前需要做好用水篩選，以便保障檢測結(jié)果的有效性，這主要是因?yàn)樗幸埠胁煌煞旨安煌康奈⒘吭兀鋾苯佑绊憣?shí)驗(yàn)結(jié)果的客觀性及真實(shí)性。通常會要求微量元素檢測實(shí)驗(yàn)使用高純度去離子水，即Ⅰ類水（水溫低于25℃、電阻率高于1.0×107Ω/cm），但使用前仍然需要檢測水質(zhì)，準(zhǔn)確判斷水源是否存在污染情況[2]。

此外，在微量元素檢測實(shí)驗(yàn)過程中，必須使用高純度級別試劑，檢測前需嚴(yán)格檢查試劑的質(zhì)量及級別。

4 樣品采集與處理

人體微量元素檢測主要采用血液標(biāo)本或尿液標(biāo)本，但不同種類微量元素檢測使用的樣本存在一定差異，如檢測體內(nèi)汞元素含量、鉛元素含量時，應(yīng)盡量使用全血標(biāo)本，常見微量元素使用血漿或血清標(biāo)本；血液標(biāo)本盡量選擇靜脈血液，其受污染的影響最小。目前采血方式最簡便的為指尖采血，但是這種方式采集的樣本污染程度較高，無法保障檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性。樣本采集過程中要避免樣本受到外源性的污染，尤其是內(nèi)外源性水平存在較大差異時，外源性污染會導(dǎo)致檢測結(jié)果嚴(yán)重失真。從保障檢測結(jié)果準(zhǔn)確性角度來講，建議采取真空采樣采集微量元素檢測樣本，但每次使用真空采樣管前，要對采樣管、采血枕頭、膠塞等設(shè)施的微量元素進(jìn)行檢測，若出現(xiàn)超過可接受下限情況，需采用酸漂洗法或血清漂洗法進(jìn)行處理。

酸漂洗法的具體操作為：每一批次的采血管或注射器需要隨機(jī)抽取5～10 支進(jìn)行檢測，在采血管中加入5 mL 濃度為5%的硝酸溶液，并選擇空白對照試劑；采血管驗(yàn)證環(huán)節(jié)需要保持其處于水平狀態(tài)，保障漂洗液能夠與膠塞充分接觸，但驗(yàn)證時間較長，有時會超過24 h；保障漂洗液與采血管充分接觸后，根據(jù)待測元素的檢驗(yàn)要求制備漂洗液樣本，做好漂洗液及空白對照樣本處理；最終檢測采血管的污染情況，如有毒元素含量、微量元素含量、超微量元素含量的檢測等[3]。

血清漂洗法的具體操作過程中，樣本采集采血管及試劑的選擇與處理是第一環(huán)節(jié)，還包括皮膚消毒、采樣技術(shù)的操作、樣本最終分類等環(huán)節(jié)。血清漂洗法的具體操作與酸漂洗法相同，但其適用更多環(huán)節(jié)，需要注意以下事項(xiàng)：（1）靜脈采血需要先進(jìn)行皮膚消毒，可以使用濃度為0.2%的酒精、純水等，禁止使用任何含碘的消毒試劑，采集后應(yīng)通過搖晃的方式保障樣本與抗凝劑充分接觸；（2）血液樣本采集過程中盡量保障每人單獨(dú)使用采血管，避免造成交叉污染；（3）采血過程中禁止通過注射器采血再注射到采血管，因?yàn)樽⑸淦骺梢詳y帶污染元素，導(dǎo)致樣本污染；（4）樣本采集完成后要做好密封工作，選擇安全的存儲工具，避免出現(xiàn)系統(tǒng)性的樣本污染情況[4]。

此外，微量元素檢測中還可以使用尿液作為樣本，大多情況下會以24 h 內(nèi)的尿液作為樣本，其可以更準(zhǔn)確地獲得檢測分析結(jié)果。尿液樣本通常會通過肌酐校正處理，但是要注意驅(qū)排鉛治療過程中應(yīng)選擇8 h 內(nèi)的尿液，這樣可以更客觀地反映尿液中鉛排出情況。尿液樣本采集過程中，采集器具中需要添加超純的硝酸，保障其環(huán)境的pH 在2.0 以下，維持樣本的穩(wěn)定[5]。

5 結(jié)語

綜上所述，微量元素檢測分析對環(huán)境及檢測器具的要求都較高。為了保障檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性及客觀性，應(yīng)做好檢測人員的培訓(xùn)工作，使其全面了解檢測分析前的影響因素，保障檢測分析過程中的環(huán)境及檢測設(shè)備的潔凈，并做好樣本采集工作，盡量減少污染元素的影響。此外，人體微量元素檢測前24 h內(nèi)食物的攝入也會對檢測結(jié)果產(chǎn)生一定的影響。為了保障結(jié)果的準(zhǔn)確性，檢測前應(yīng)告知被檢測者避免食用啤酒、茶葉或特殊水果等含鈷元素及鉛元素等微量元素較高的食物。