從非洲豬瘟病毒分子機理與傳播特點淺談豬場防控

楊有福 程 寶 李 想 畢小娟

（湖南加農(nóng)正和生物技術(shù)有限公司，湖南長沙 410001）

非洲豬瘟（African Swine Fever，ASF）是一種由非洲豬瘟病毒（African Swine Fever Virus，ASFV）感染引起的，以家豬和野豬為主要宿主的高度接觸性、傳染性、出血性疾病。非洲豬瘟的潛伏期為4～19 d，急性感染4～5 d后可出現(xiàn)臨床癥狀。家豬急性感染后常表現(xiàn)為高燒、精神萎靡、食欲不振、呼吸障礙、結(jié)膜炎、皮膚青紫、全身出血、便血等臨床癥狀，解剖后常見脾臟充血腫大，胃、肝臟、腎臟以及淋巴結(jié)腫大出血，感染豬在短時間內(nèi)死亡，死亡率達100%[1-5]。1921年肯尼亞首次報道了非洲豬瘟疫情，隨后歐洲、拉美等多個國家相繼報道，2007年該病進入高加索地區(qū)后，格魯吉亞、俄羅斯、波蘭等地接連“淪陷”[4，6]。2018年8月非洲豬瘟傳入我國，截止2019年5月已傳遍我國除港澳臺外的31個省份，給我國養(yǎng)豬業(yè)帶來一定的經(jīng)濟損失。

1 非洲豬瘟病毒分子病原學(xué)

ASFV是一種非節(jié)段直鏈、雙鏈DNA病毒，是非洲豬瘟病毒科的唯一成員。病毒為正二十面體對稱結(jié)構(gòu)，直徑為200 nm，核酸長度在170～190 kb，有151～167個開放閱讀框，能編碼150～200個蛋白[1，4]，包括病毒結(jié)構(gòu)蛋白以及與侵入細胞、基因轉(zhuǎn)錄和復(fù)制相關(guān)的蛋白和酶等，如病毒編碼的p21蛋白與該病毒對細胞的吸附相關(guān)，p30蛋白對病毒內(nèi)化十分重要[2，7]。ASFV基因組中的多基因家族（Multigene Family，MGF）MGF360和MGF505被認為與ASFV的宿主特異性、病毒毒性、抑制干擾素分泌和阻斷宿主免疫響應(yīng)有關(guān)[8-10]。

2 非洲豬瘟病毒理化性質(zhì)

ASFV在環(huán)境中較頑強，合適條件下能保持活性長達幾天甚至十幾天，在有機物中存活時間更長。感染豬的分泌物、排泄物、血液和組織都含有ASFV，且其活性可保持幾個星期，健康豬與以上物品的直接接觸都能導(dǎo)致感染發(fā)??；熏制、腌制類食品中，ASFV的存活時間也較長，如熏制的香腸和風(fēng)干的火腿需要在32～49℃下熏制12 h以上或干燥25～35 d才確保無ASFV，而西班牙火腿需要122～140 d風(fēng)干處理才確保無ASFV存在[4，6]。這表明不同的加工工藝對肉類中ASFV的殺滅效果不同，但ASFV在熏制、風(fēng)干食品中長時間地保持活性仍是病毒傳播的風(fēng)險因素；此外，被污染的衣服、鞋子、設(shè)備和車輛等都能造成病毒傳染[11]。

ASFV對環(huán)境酸堿度敏感范圍大，能在pH值4～10范圍內(nèi)保持穩(wěn)定，當(dāng)pH＜4或pH＞11時，病毒將失活；ASFV耐冷不耐熱，在新鮮或冰凍的肉中能存活數(shù)周甚至數(shù)月，而60℃加熱20 min或是火腿罐頭加工時70℃處理即可讓ASFV失活；許多的脂類溶劑、去污劑，以及醛類、酚類和碘化物為主要成分的消毒劑都能使ASFV 失活[4，6]。

3 非洲豬瘟病毒傳播、傳染過程

非洲豬瘟是豬的一種高度接觸性傳染病，豬的呼吸道和消化道是ASFV感染的主要部位[5]。豬只與被ASFV污染的人員、衣物、鞋子或設(shè)備接觸，ASFV通過豬的呼吸道或消化道首先侵入扁桃體、下頜和淋巴結(jié)，并在其中增殖，隨淋巴液和血液進入循環(huán)系統(tǒng)，隨后侵襲豬的臟器，到達復(fù)制的第二級器官，通常復(fù)制發(fā)生在血管內(nèi)皮細胞或巨噬細胞中[3，12]，非洲豬瘟病毒具有優(yōu)先感染髓系細胞的特點，例如巨噬細胞/單核細胞是首要被攻擊靶點，傳遞病原信息的樹突細胞也是ASFV感染的對象，病毒在這些細胞中增殖，造成淋巴細胞凋亡、血管內(nèi)皮受損、出血、血栓等病理變化，引發(fā)相應(yīng)器官、組織的病變[13-15]，最終導(dǎo)致感染豬只死亡。

此外，ASFV存在超過30株毒株和23種基因型，其基因及其編碼蛋白的功能尚不明確，對ASFV免疫逃避機制仍不清楚，這制約了防治藥物和疫苗研制工作的進展，目前尚無有效的防控藥物和疫苗。由于非洲豬瘟是高度接觸性傳染病，面對已經(jīng)傳播的非洲豬瘟疫情，做好生物安全，成為養(yǎng)殖場防控非洲豬瘟、“獨善其身”的唯一可行方法。

4 非洲豬瘟防控關(guān)鍵點

非洲豬瘟是一種高度接觸性傳染病，健康豬只的口鼻或是皮膚破損處直接接觸到足夠劑量的ASFV就可被感染。ASFV在環(huán)境中十分頑強，感染豬的分泌物、排泄物、血液等均可檢出[4]，且在感染3 d后就能被檢測出[16]，此外，被污染的衣服、鞋子、設(shè)備和車輛等都攜帶有感染活性的ASFV，是傳播的重要途徑[11]。養(yǎng)殖場附近存在感染非洲豬瘟的豬場、屠宰場，經(jīng)常來往多家豬場的獸醫(yī)等都會提高傳播非洲豬瘟病毒的風(fēng)險[6]。國內(nèi)報道的案例中，有多個案例是豬場在售豬后，出現(xiàn)圈舍內(nèi)豬只死亡，在時間上也吻合非洲豬瘟的傳染規(guī)律?？梢酝茢嗍窃谑圬i時，由于販豬車長期往來疫區(qū)，且未進行徹底清洗消毒，此外，還可能在賣豬時，豬場人員的違規(guī)操作，導(dǎo)致ASFV傳入。

非洲豬瘟是高度接觸性傳播疾病，這使得“拔牙式”撲殺、小范圍點狀隔離存在可能，但隔離的范圍不可能太小。非洲豬瘟潛伏期為4～19 d，而豬在感染ASFV的第3 d就可以出現(xiàn)排毒，導(dǎo)致感染豬出現(xiàn)臨床癥狀時，非洲豬瘟的傳染面積已經(jīng)擴大[4，17]。ASFV可以通過健康豬只的口鼻或是皮膚破損處與感染豬直接接觸而傳播；同時感染豬的尿液、唾液等也含有大量ASFV，人員、設(shè)備可能接觸到病毒后，在行走或喂料中傳染到其他欄舍[17]；氣溶膠被認為可以短距離傳播ASFV，在欄舍中成為擴大傳染范圍的途徑之一[18]。根據(jù)非洲豬瘟病毒的傳播特性，早期果斷的精準式“拔牙”防控是有可能的，但在實際操作中要做到“舍小保大”，要果斷地將發(fā)病豬舍的所有生豬安全快速地處理掉，而不是只清除發(fā)病豬只，或者只清除鄰近欄舍的豬，豬場如果不果斷處理掉整棟豬舍的豬，是極不明智和危險的，這是在增加傳染源。而定時的非洲豬瘟病毒檢測和“拔牙式”清理發(fā)病豬是防控該病的關(guān)鍵。

雖然ASFV在合適環(huán)境下能保持活性幾天甚至幾個月，但許多脂類溶劑、去污劑，以及市面上銷售的醛類、酚類、碘類等消毒劑都能在消毒時間內(nèi)殺滅ASFV。此外，ASFV對酸堿性敏感，許多養(yǎng)殖場常用堿性消毒劑消毒豬舍，如燒堿、石灰等在做環(huán)境消毒時能起到很好的殺滅ASFV的效果，但需要注意消毒劑pH值需大于11。在豬場用水中添加酸化劑，也可以防控非洲豬瘟，也是降低疫病傳播的一種方式。

雖然ASFV基因及其編碼的150多個蛋白的功能尚不完全清楚，但研究者對其基因組中多個MGF的研究獲得了不少的成果。ASFV基因組中包含11～15個MGF 360和9～10個MGF 530，它們對于ASFV在宿主巨噬細胞中的增殖是必須的。研究證明非洲豬瘟感染會抑制I型干擾素的分泌，而一些MGF 360和MGF 530家族編碼的蛋白質(zhì)直接或間接地參與了抑制I型干擾素的分泌[9，19]。此外，在體外培養(yǎng)的細胞中，ASFV既抑制Ⅰ型干擾素，也抑制Ⅱ型干擾素；有研究報道ASFV感染豬后，在豬的體內(nèi)表現(xiàn)出對干擾素α的抑制，對干擾素β和干擾素γ沒有抑制作用。研究人員發(fā)現(xiàn)干擾素α與干擾素γ協(xié)同作用可抑制ASFV的復(fù)制，而單獨的干擾素α或干擾素γ不具備對ASFV的抑制作用。因此，在非洲豬瘟感染的豬體內(nèi)，干擾素α被ASFV抑制，豬體內(nèi)通過反饋機制雖然提高了干擾素γ含量，但是由于缺乏干擾素α的配合，仍舊發(fā)揮不了作用[19]。這些結(jié)果表明，干擾素對抑制ASFV在宿主細胞中復(fù)制、引發(fā)免疫響應(yīng)中積極作用。通過一些干擾素誘導(dǎo)劑，如中藥刺五加可以長期誘導(dǎo)豬體內(nèi)干擾素產(chǎn)生，提高機體抵抗力。做好生物安全最后一步——保護易感動物是防控非洲豬瘟的有效手段。

5 總結(jié)

綜上所述，非洲豬瘟疫情傳入我國后，短時間內(nèi)對我國的養(yǎng)豬業(yè)造成很大威脅，且國內(nèi)外沒有治療和防控藥物。目前，做好生物安全、保護好易感動物、以豬場為單位堅守是對抗非洲豬瘟疫情唯一可行的方法。