屏障系統(tǒng)中SPF實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的飼養(yǎng)與管理

朱玉 秦嫘 何寶國(guó)

（齊齊哈爾醫(yī)學(xué)院 161042）

除清潔級(jí)動(dòng)物應(yīng)排除的病原外，不攜帶主要潛在感染或條件致病和對(duì)科學(xué)實(shí)驗(yàn)干擾大的病原，這類動(dòng)物被稱為無(wú)特殊病原體 (Specific Pathogen Free，SPF) 動(dòng)物。在動(dòng)物實(shí)驗(yàn)過(guò)程中，不同種屬、同一種屬中不同品系的動(dòng)物對(duì)藥理反應(yīng)也不同，如果應(yīng)用了不健康的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，還可能無(wú)法獲得實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)，致使實(shí)驗(yàn)失敗。由于SPF 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物遺傳背景明確，健康狀況優(yōu)良，實(shí)驗(yàn)反應(yīng)敏感，實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)準(zhǔn)確，常常被用來(lái)做藥物和毒性反應(yīng)實(shí)驗(yàn)，但SPF 動(dòng)物對(duì)飼養(yǎng)環(huán)境要求較高，對(duì)管理水平要求嚴(yán)格，所以必須飼養(yǎng)在屏障系統(tǒng)中，實(shí)行嚴(yán)格的微生物控制才能符合實(shí)驗(yàn)動(dòng)物標(biāo)準(zhǔn)。

1 人員要求

管理人員應(yīng)為醫(yī)學(xué)、動(dòng)物學(xué)等相關(guān)專業(yè)人員，并經(jīng)嚴(yán)格的專業(yè)培訓(xùn)，儀器、設(shè)備操作熟練，能認(rèn)真執(zhí)行無(wú)菌操作，嚴(yán)格控制污染，熟悉相關(guān)各物品等無(wú)菌操作方法和程序，并嚴(yán)格按照方法執(zhí)行。管理人員要有強(qiáng)烈的責(zé)任心強(qiáng)，要經(jīng)常檢查各種儀器設(shè)施的運(yùn)轉(zhuǎn)情況，按照各儀器、設(shè)備使用、維護(hù)方法進(jìn)行操作，做到正確操作、常檢查、勤清潔。

2 SPF實(shí)驗(yàn)動(dòng)物飼養(yǎng)的要求

飼養(yǎng)SPF 級(jí)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物單位必須擁有實(shí)驗(yàn)動(dòng)物使用許可證；實(shí)驗(yàn)動(dòng)物所需的飼料來(lái)源合理，采用正確方法處理后再進(jìn)行飼喂，必須從具有實(shí)驗(yàn)動(dòng)物飼料生產(chǎn)許可證的單位購(gòu)買，所用飼料經(jīng)過(guò)高壓或輻照滅菌后再喂給實(shí)驗(yàn)動(dòng)物；沒(méi)有特殊要求時(shí)，實(shí)驗(yàn)動(dòng)物采用自由飲水，且需要飲用經(jīng)過(guò)凈化和消毒處理后的水；使用優(yōu)質(zhì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物墊料，做到勤更換；勤觀察，即觀察動(dòng)物精神狀態(tài)、是否打架、吃食和飲水情況等，把不健康的動(dòng)物及時(shí)取出并處理，要時(shí)刻觀察飼養(yǎng)的環(huán)境指標(biāo)：包括溫度（18～29℃）日溫差 （3℃以內(nèi)）、相對(duì)濕度 （適宜 40%～70%）、換氣次數(shù) （l0 次/h）、氣流速度 （0.18m/s 以內(nèi)）、壓差（25Pa）、潔凈度 （一萬(wàn)級(jí)）、氨濃度 （l5mg/m3）、噪音 （≤60dB）、光照度 （150～300Lux）。

3 SPF實(shí)驗(yàn)動(dòng)物管理的要求

進(jìn)出屏障系統(tǒng)室內(nèi)要嚴(yán)格按照正確流向走動(dòng)：人員進(jìn)出屏障系統(tǒng)流向：一更衣室→二更衣室→風(fēng)淋→潔凈走廊→飼養(yǎng)區(qū)→實(shí)驗(yàn)區(qū)→次潔凈走廊→緩沖間→出屏障系統(tǒng)；物品進(jìn)出屏障系統(tǒng)流向：雙扉高壓消毒器 (傳遞窗、渡槽) →潔凈儲(chǔ)物間→潔凈走廊→緩沖間→出屏障系統(tǒng)→洗消間；動(dòng)物進(jìn)出屏障系統(tǒng)流向：外運(yùn)→檢疫室→繁殖區(qū)→潔凈走廊→實(shí)驗(yàn)區(qū)→次潔凈走廊→緩沖間→出屏障系統(tǒng)。

SPF 動(dòng)物飼養(yǎng)區(qū)及配套設(shè)施啟用前，需經(jīng)過(guò)多次清潔、除塵、清洗、抹拭。然后用甲醛+高錳酸鉀煙熏 24～48h 后，開啟送風(fēng)排風(fēng)系統(tǒng)24～48h，將殘留的刺激氣味排凈，工作人員換上高壓消毒的凈化防塵服到飼養(yǎng)區(qū)內(nèi)，將煙熏用的用具清理好，用草酸液將濺出的高錳酸鉀污跡抹去，搞好衛(wèi)生。并通過(guò)省級(jí)動(dòng)物監(jiān)測(cè)部門的技術(shù)監(jiān)測(cè)，獲得設(shè)施合格證后方可使用。嚴(yán)格控制動(dòng)物質(zhì)量，一定要在國(guó)家動(dòng)物種子庫(kù)引種，以保證動(dòng)物的質(zhì)量符合標(biāo)準(zhǔn)化要求。

4 SPF實(shí)驗(yàn)動(dòng)物日常飼養(yǎng)管理方法

飼料應(yīng)無(wú)菌、高營(yíng)養(yǎng)，每次投放3～4d 的飼料量；按雄：雌比例為1：4～5，隨機(jī)同籠；每只動(dòng)物均有記錄掛卡，詳細(xì)記錄動(dòng)物的種屬、品系、代號(hào) (名字)、出生日期、留種日期、交配日期和與配動(dòng)物代號(hào)、生產(chǎn)日期、生產(chǎn)仔數(shù)、存活狀況、斷奶日期，正在進(jìn)行實(shí)驗(yàn)動(dòng)物應(yīng)有實(shí)驗(yàn)記錄卡，記錄動(dòng)物的種屬、品系、性別、實(shí)驗(yàn)性質(zhì)、組別和編號(hào)、實(shí)驗(yàn)?zāi)康暮瓦M(jìn)行結(jié)果，并將記錄卡完整保存。飼養(yǎng)管理人員如發(fā)現(xiàn)有死亡的動(dòng)物時(shí)，應(yīng)立即取出動(dòng)物尸體并及時(shí)處理后記錄，同時(shí)將死亡動(dòng)物所用物品消毒處理。