胃潰瘍-失血性休克實驗技術創(chuàng)新在實驗教學中的探討

李天舒，劉 龍，劉亞男，秦 源

(1.吉林大學基礎醫(yī)學院機能科學實驗中心，吉林 長春130021；2.吉林大學中日聯(lián)誼醫(yī)院，吉林 長春130033；3.吉林大學護理學院2016級，吉林 長春130021)

隨著人民生活水平的發(fā)展，人們逐漸增加自我健康保護，既往因飲食不規(guī)律，寒冷所導致的胃潰瘍逐漸減少；而人們因為外傷，重病，其他刺激情況所導致的失血性休克-應激性胃潰瘍比重逐漸增高，尤其缺血再灌注后加重了胃黏膜的潰瘍程度[1]，導致在臨床上治療效果不佳。基礎醫(yī)學教學內容也應隨著疾病的發(fā)展而創(chuàng)新，為了讓同學們對疾病有新的了解，我們創(chuàng)新了傳統(tǒng)的病理生理學實驗“大鼠應激性胃潰瘍”實驗技術方法，以往實驗內容包括應激性胃潰瘍的兩種模型的復制：倒置法和冷儲法。實驗前將大白鼠24 h禁食，自由飲水，然后通過倒置法和冷儲法復制大鼠應激性胃潰瘍模型[2]?，F(xiàn)通過實驗技術方法的創(chuàng)新，將基礎實驗教學和臨床醫(yī)學問題緊密聯(lián)系，聯(lián)合藥物對應激性胃潰瘍模型的治療及缺血再灌注損傷機制探討，幫助同學更好的了解應激性胃潰瘍的發(fā)生機制和藥物抗應激性胃潰瘍的原理。通過實驗技術方法的創(chuàng)新，引導學生自主學習，從而培養(yǎng)學生的創(chuàng)新能力[3]。

1 失血性休克大鼠應激性胃潰瘍動物模型的建立

1.1將大白鼠分為三組，空白對照組，給藥組，模型組?？瞻讓φ战M：正常飲食飲水；給藥組和模型組：術前24 h禁食，自由飲水，倒置和冷儲2 h。

1.2大鼠麻醉固定，頸部手術，分離一側頸總動脈和一側頸外淺靜脈，頸動脈插管(用靜脈留置針插管方便記錄血壓及放血比較簡潔方便)，記錄血壓，插頸外淺靜脈備再灌注用。通過頸總動脈靜脈留置針放血至平均動脈壓40 mmHg，給藥組給藥。10 min后經(jīng)靜脈插管回輸血液(放出的動脈血里含少量肝素生理鹽水)，所有動物90 min后處死，找到大鼠的胃，分別結扎幽門和賁門，在結扎線的外側剪斷胃與食管、十二指腸連接處。取出胃，向胃腔內注射10%甲醛溶液10 ml,再將胃放入甲醛溶液浸泡15 min。

1.3將胃平展在玻璃平皿上，觀察空白對照組，模型組，給藥組胃黏膜潰瘍的大小及數(shù)目，進行胃黏膜組織損傷潰瘍指數(shù)判定(分7度)[4]。

1.4取胃粘膜組織進行超氧化物歧化酶(SOD)，丙二醛(MDA)，黃嘌呤氧化酶(XOD)測定。

1.5在實驗教師的指導下，同學們進行實驗數(shù)據(jù)的統(tǒng)計處理，分析疾病發(fā)生機制和相關藥物治療機制。

2 結果

2.1通過“失血性休克-應激性胃潰瘍實驗的改進”使同學們掌握了復制失血性休克-應激性胃潰瘍動物病理模型的方法。以往大鼠應激性胃潰瘍實驗內容比較單一，只是通過簡單的冷藏，倒立復制胃潰瘍模型，同學對實驗不感興趣。通過實驗技術方法的創(chuàng)新，新實驗的動物手術操作比較復雜，實驗內容緊密聯(lián)系臨床實際以及最新抗?jié)兯幬锏闹委熯M展，增強了同學們對醫(yī)學機能實驗學的興趣，也提高了同學們手術操作能力，為今后臨床外科工作奠定了基礎。

其中本實驗創(chuàng)新的方法用靜脈留置針代替了傳統(tǒng)的動靜脈插管，由于大鼠動靜脈管徑小，一般插管極易凝血，靜脈留置針管壁由于特殊原料抗凝血效果好，使動脈放血過程更加便利，減少了凝血因素帶來的困擾。

2.2測定動物血清MDA，SOD。MDA是組織脂質過氧化產物，胃組織MDA顯著增高，與胃潰瘍指數(shù)呈正比[5]，SOD為超氧化物歧化酶，其作用是催化超氧陰離子自由基發(fā)生歧化反應，防止氧化損傷的發(fā)生[6]，通過實驗讓同學了解失血性休克再灌注后，氧自由基參與胃潰瘍的發(fā)生，SOD值在再灌注后顯著下降是由于強烈的應激作用會導致大鼠體內組織超氧化物歧化酶含量降低。通過這些指標的變化，可以幫助同學們熟悉應激性胃潰瘍的發(fā)生機制。

3 結語

人類疾病動物模型已成為現(xiàn)代醫(yī)學認識生命科學客觀規(guī)律的主要工具，通過研究動物模型，可更加準確地觀察實驗結果，從而有助于人們更深刻地認識人類疾病的發(fā)生、發(fā)展規(guī)律和采取更有效的防治措施[7]。

復制應激性胃潰瘍動物模型有很多種，如饑餓，冷藏，電擊，休克[8]。近年來臨床由于外傷，重病及其他刺激情況下，出現(xiàn)胃、十二指腸黏膜急性病變增多，當胃黏膜潰瘍惡化侵蝕大血管時，可引起大出血，導致的失血性休克-應激性胃潰瘍比重逐漸增高，尤其缺血再灌注后加重了胃黏膜的潰瘍程度。醫(yī)學機能實驗教學是培養(yǎng)臨床醫(yī)學生通過對功能異常的動物病例模型的復制和藥物的應用有機結合，更貼近于臨床實際，更好地為醫(yī)學生奠定醫(yī)學知識.實驗動物模型的復制對于研究疾病大發(fā)生機制，起著十分重要的作用。因此我們在“大鼠應激性胃潰瘍”傳統(tǒng)驗證實驗的基礎上進行了實驗技術方法的創(chuàng)新，增加藥物對應激性胃潰瘍模型的治療及缺血再灌注損傷機制探討?？墒雇瑢W們更加全面了解疾病的發(fā)生機制，幫助同學們未來學習臨床醫(yī)學知識奠定堅實的基礎醫(yī)學知識。