《水產(chǎn)品質(zhì)量安全》講座第三講 孔雀石綠與水產(chǎn)品質(zhì)量安全（2）

龔珞軍 楊蘭松 雷 偉 韓育章 普家勇

5.孔雀石綠的降解

（1）孔雀石綠在水體中的自然降解 有研究表明，水體中的孔雀石綠絕大部分被底泥吸附。有底泥的孔雀石綠溶液實(shí)際濃度下降率極顯著高于無(wú)底泥的孔雀石綠溶液。溫度和紫外線強(qiáng)度影響底泥中孔雀石綠的分解速度。

（2）孔雀石綠的生物降解 一些桿菌、反硝化細(xì)菌及氣單胞菌菌株可分解孔雀石綠。孔雀石綠生物降解速度與溫度、pH、生物量、生物種類(lèi)和溶液初始濃度等有關(guān)。

6.在養(yǎng)殖池中潑灑孔雀石綠，將導(dǎo)致孔雀石綠在池塘底泥中殘留的背景污染?？兹甘G轉(zhuǎn)化為隱性孔雀石綠，一般由生物體酶完成及池底部分細(xì)菌具有孔雀石綠脫色能力的微生物所致。

受孔雀石綠污染的環(huán)境會(huì)引起水產(chǎn)品孔雀石綠殘留。當(dāng)養(yǎng)殖水體中隱性孔雀石綠濃度為0.001μg/mL時(shí)，兩個(gè)月后羅非魚(yú)肌肉中的積累達(dá)0.06μg/g，淡水白鯧肌肉中的積累達(dá)0.0708μg/g。將導(dǎo)致鰻鱺孔雀石綠殘留。研究表明，受到孔雀石綠污染的池塘養(yǎng)殖鰻鱺，隱性孔雀石綠15d前逐漸升高，以后逐漸下降。

三、孔雀石綠對(duì)水生生物的影響

1.對(duì)繁殖、發(fā)育的影響孔雀石綠引起波部東風(fēng)螺受精卵和幼體較高的滯育及死亡率，大部分胚體發(fā)育速度明顯減緩，部分胚體發(fā)育畸形。達(dá)一定濃度時(shí)，可導(dǎo)致全部死亡。它對(duì)波部東風(fēng)螺面盤(pán)幼蟲(chóng)毒性極強(qiáng)，造成大量死亡。

2.對(duì)組織器官的影響孔雀石綠對(duì)虹鱒的鰓、肝臟、腎臟和消化道均具有毒性，導(dǎo)致其受損，肝臟局部壞死，肝臟竇狀腺充血，局部黑斑癥，肝臟肥大、形成空泡及肝硬化等。腎近曲小管上皮細(xì)胞的增生，腎小球萎縮，腎被膜破裂，細(xì)胞壞死，核碎裂，核溶解。白細(xì)胞浸潤(rùn)，細(xì)胞核溶解破裂，紅細(xì)胞皺縮等細(xì)胞壞死癥狀；對(duì)消化道造成不利影響，腸道上皮細(xì)胞增生性肥大、壞疽、剝落，杯狀細(xì)胞數(shù)量增加等?？兹甘G溶液造成鯰的滲透調(diào)節(jié)和糖代謝紊亂，肝臟和肌肉中的糖元分解，引起高血糖；使蛋白質(zhì)合成能力下降，造成魚(yú)體貧血?？兹甘G也導(dǎo)致腸壞死與剝落、腸上皮細(xì)胞退化及杯形細(xì)胞增生。腸絨毛稍破裂，黏膜折疊破裂，肌肉和絨毛膜變形、變性?？兹甘G會(huì)引起魚(yú)類(lèi)消化道、鰓和皮膚輕度發(fā)炎，妨礙腸道酶分泌。

3.造成突變孔雀石綠對(duì)生殖細(xì)胞和腦垂體細(xì)胞具有抑制，引起突變?？兹甘G能使淡水魚(yú)魚(yú)卵染色體發(fā)生異常。當(dāng)孔雀石綠質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.5mg/L時(shí)，可使鳙魚(yú)和尼羅羅非魚(yú)的紅細(xì)胞產(chǎn)生微核，且微核率隨藥物質(zhì)量分?jǐn)?shù)的升高而提高?？兹甘G對(duì)虹鱒生殖腺及腦垂體促性腺發(fā)育細(xì)胞均具有毒性，導(dǎo)致其受損。虹鱒魚(yú)卵孵化時(shí)使用孔雀石綠溶液后，胚胎存活率下降，孵化時(shí)間延長(zhǎng)，孵化出的魚(yú)苗出現(xiàn)脊椎、頭、背鰭等部位畸變。

4.導(dǎo)致癌癥孔雀石綠會(huì)引起鯉上皮癌細(xì)胞、草魚(yú)腎細(xì)胞、斑點(diǎn)叉尾鮰卵巢細(xì)胞細(xì)胞變形，貼壁率下降等現(xiàn)象。濃度越高，細(xì)胞懸浮現(xiàn)象越嚴(yán)重，甚至出現(xiàn)碎片等現(xiàn)象。隨濃度增加，這三種細(xì)胞存活率下降。研究證實(shí)孔雀石綠能使虹鱒產(chǎn)生癌病變。

5.急性中毒孔雀石綠還能通過(guò)溶解足夠的鋅，引起水生動(dòng)物急性鋅中毒，并引起消化道、鰓和皮膚輕度發(fā)炎，從而影響水生生物正常的攝食和生長(zhǎng)，阻礙腸道酶（如胰蛋白酶、淀粉酶等）的活性，影響動(dòng)物的消化吸收功能。有研究表明，孔雀石綠的濃度增加1倍，其致死率可增加20倍。

四、孔雀石綠對(duì)哺乳類(lèi)及人類(lèi)的危害

孔雀石綠在生物體內(nèi)首先代謝為隱性孔雀石綠，繼而進(jìn)一步代謝為其他甲基衍生物?？兹甘G在生物體內(nèi)有明顯蓄積現(xiàn)象，其化學(xué)官能團(tuán)三苯甲烷具有高毒、高殘留、致癌、致畸、致突變等毒副作用，對(duì)生物體的組織、生殖、免疫系統(tǒng)均有影響。

1.高毒性孔雀石綠與隱性孔雀石綠均能使大鼠的肝細(xì)胞空泡化，隱性孔雀石綠還能使甲狀腺濾泡上皮大量凋亡，減少公鼠甲狀腺激素的釋放，抑制血漿膽堿脂酶產(chǎn)生作用，進(jìn)而可造成乙酰膽堿的蓄積而出現(xiàn)神經(jīng)癥狀。

2.致癌性孔雀石綠的官能團(tuán)三苯甲烷分子中與苯環(huán)相連的亞甲基和次甲基受苯環(huán)影響有較高的反應(yīng)活性，可生成三苯甲基，能抑制人體谷胱甘肽-S-轉(zhuǎn)移酶的活性，嵌入DNA生成加合物。這兩種情況均能造成人體器官組織氧壓的改變和脂質(zhì)過(guò)氧化，使細(xì)胞凋亡，誘發(fā)腫瘤?？兹甘G可誘發(fā)大鼠甲狀腺腫瘤、肝腫瘤及乳腺腫瘤。隱性孔雀石綠可致雄性大鼠甲狀腺瘤、睪丸癌和雌性大鼠肝腫瘤增加，顯著誘發(fā)小鼠肝腫瘤。

孔雀石綠代謝產(chǎn)物的衍生物及初級(jí)和次級(jí)的芳香胺在癌癥發(fā)生中起著重要的作用，如小分子芳香胺，尤其是1-4個(gè)芳香環(huán)結(jié)構(gòu)進(jìn)入人體后，會(huì)穿透細(xì)胞膜，到達(dá)細(xì)胞核中的DNA。芳香胺易產(chǎn)生活潑的親電子“陽(yáng)氮離子”，攻擊DNA上的親核位置，相互以共價(jià)鍵結(jié)合，從而破壞DNA引起癌變。除此之外，芳香胺分子的扁平部分還會(huì)“插入”正常細(xì)胞中DNA螺旋線結(jié)構(gòu)的相鄰堿基對(duì)之間，從而破壞DNA，引起癌變。

3.突變性孔雀石綠可損傷小鼠睪丸生精上皮，通過(guò)Fas/Fas-L通路使生精細(xì)胞凋亡增加。孔雀石綠可導(dǎo)致哺乳動(dòng)物基因突變，突變熱點(diǎn)主要集中在核苷酸序列，移碼突變所占比率較大，有序列特異性。

4.致畸性孔雀石綠能使兔繁殖致畸。

五、水產(chǎn)養(yǎng)殖管理中有關(guān)孔雀石綠的法律法規(guī)

1.2002年農(nóng)業(yè)部發(fā)布了《食品動(dòng)物禁用的獸藥及其它化合物清單》（農(nóng)業(yè)部公告第193號(hào)），明文規(guī)定禁止使用孔雀石綠，且不得在動(dòng)物性食品中檢出（農(nóng)牧發(fā)[2002]1號(hào)）。

2.2002年農(nóng)業(yè)部發(fā)布的《動(dòng)物性食品中獸藥最高殘留限量》（農(nóng)業(yè)部公告第235號(hào)）中明文禁止使用孔雀石綠，且不得在動(dòng)物性食品中檢出。

3.2002年9月1日頒布執(zhí)行的NY5071-2002農(nóng)業(yè)部行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)《無(wú)公害食品 漁用藥物使用準(zhǔn)則》，明確孔雀石綠為禁用藥品。

4.2004年4月9日中華人民共和國(guó)國(guó)務(wù)院令第404號(hào)《獸藥管理?xiàng)l例》（2014年7月29日第一次修訂；2016年2月6日第二次修訂）規(guī)定，禁止使用假、劣獸藥以及國(guó)務(wù)院獸醫(yī)行政管理部門(mén)規(guī)定禁止使用的藥品和其他化合物。使用禁止使用的藥品按假獸藥處理。

5.2005年7月7日農(nóng)業(yè)部發(fā)出《關(guān)于組織查處“孔雀石綠”等禁用獸藥的緊急通知》（農(nóng)辦醫(yī)[2005]24號(hào)）。

6.美國(guó)食品與藥物管理局（FDA）將孔雀石綠列為致癌試驗(yàn)優(yōu)先研究的化學(xué)物之一，不允許其在養(yǎng)殖業(yè)中應(yīng)用；現(xiàn)在已經(jīng)成為許多國(guó)家的水產(chǎn)養(yǎng)殖禁用藥物之一。根據(jù)歐盟法案2002/675/EC規(guī)定，動(dòng)物源性食品中孔雀石綠和隱性孔雀石綠殘留總量不得高于2.0μg/kg；日本的“肯定列表”明確規(guī)定在進(jìn)口水產(chǎn)品中不得檢出孔雀石綠殘留。

（未完待續(xù)）