miRNA在EMS患者異位內(nèi)膜組織中的表達(dá)及其對(duì)VEGF 的影響

劉艷婷 何玉 林路 胡曉文

子宮內(nèi)膜異位癥（EMS）是育齡期婦女常見(jiàn)的婦科疾病，其特征是子宮內(nèi)膜組織異位植入并生長(zhǎng)在盆腔器官上，最常見(jiàn)于卵巢和腹膜[1]。子宮內(nèi)膜異位癥病因現(xiàn)仍不明確，在大多數(shù)情況下，認(rèn)為月經(jīng)逆行而沉積在腹腔內(nèi)的脫落子宮內(nèi)膜的植入為該病病因，其為國(guó)外的種植學(xué)說(shuō)；國(guó)內(nèi)專家的理論為在位內(nèi)膜決定論[2]。通過(guò)對(duì)子宮內(nèi)膜異位癥患者的在位內(nèi)膜及非子宮內(nèi)膜異位癥患者的在位內(nèi)膜進(jìn)行對(duì)照研究發(fā)現(xiàn)：子宮內(nèi)膜異位癥患者的在位子宮內(nèi)膜的粘附性、侵襲性、刺激形成血管的能力均強(qiáng)于非子宮內(nèi)膜異位癥患者，同時(shí)子宮內(nèi)膜異位癥患者的腹腔液中血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子水平較非子宮內(nèi)膜異位癥患者明顯升高。如果腹腔液血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子增多，作用于盆腔，將導(dǎo)致盆腔微血管生長(zhǎng)增加，因此子宮內(nèi)膜將更易于異位，并種植生長(zhǎng)。近年來(lái)通過(guò)對(duì)子宮內(nèi)膜異位癥不斷研究、探索，血管生成因子在子宮內(nèi)膜異位癥發(fā)病機(jī)制中的作用越來(lái)越受到人們的關(guān)注。有研究者發(fā)現(xiàn)，微小RNA（miRNA）異常表達(dá)在子宮內(nèi)膜異位癥的發(fā)生發(fā)展中同樣有著非常重要的意義[3]，一些可能參與子宮內(nèi)膜異位癥發(fā)生發(fā)展的miRNA，經(jīng)轉(zhuǎn)錄后調(diào)控靶基因的表達(dá)，調(diào)節(jié)異位內(nèi)膜細(xì)胞的侵襲和增殖。研究發(fā)現(xiàn)在子宮內(nèi)膜異位癥患者和非子宮內(nèi)膜異位癥患者的在位內(nèi)膜組織中微小RNA 的表達(dá)存在差異，且與血管生成有相關(guān)性[4，5]?，F(xiàn)將miRNA 在EMS患者異位內(nèi)膜組織中的表達(dá)及其對(duì)VEGF 的影響做一綜述。

1 miRNA

1.1 miRNA 概述 miRNA 多由18～25 個(gè)核苷酸組成，通過(guò)轉(zhuǎn)錄對(duì)基因進(jìn)行調(diào)控的內(nèi)源性非編碼小分子單鏈RNA，大多來(lái)源于染色體的非編碼區(qū)，多存在于自然界中的真核細(xì)胞中，miRNA 的穩(wěn)定性較強(qiáng)，其常與載體蛋白結(jié)合，形成沉默復(fù)合體，不易被RNA酶降解，具有高度保守性和組織特異性。從異位內(nèi)膜組織、在位內(nèi)膜組織、血液、體液等樣本中都可檢測(cè)到miRNA 的存在，且miRNA 的穩(wěn)定性較強(qiáng)，因此miRNA 成為疾病診斷的新的生物標(biāo)志物有一定的必然性。miRNA 按照堿基互補(bǔ)配對(duì)原則結(jié)合到特定靶基因的3'非編碼區(qū)，發(fā)揮轉(zhuǎn)錄后的基因調(diào)節(jié)作用。

miRNA 發(fā)揮作用的途徑與和靶基因的結(jié)合密切相關(guān)。miRNA 可與靶基因部分結(jié)合，改變靶基因的序列，對(duì)轉(zhuǎn)錄后的翻譯過(guò)程起抑制作用；也能同靶基因完全互補(bǔ)結(jié)合，從而導(dǎo)致靶基因降解，發(fā)揮負(fù)性調(diào)控作用[6]。由此可見(jiàn)，miRNA 在細(xì)胞增殖、細(xì)胞凋亡、細(xì)胞侵襲和惡性疾病的發(fā)生等過(guò)程中起重要作用。

1.2 miRNA 與子宮內(nèi)膜異位癥的關(guān)系 近年來(lái)隨著miRNA 研究的進(jìn)展，miRNA 與EMS 相關(guān)的研究也日益增多。miRNA 在子宮內(nèi)膜異位癥中的表達(dá)差異主要表現(xiàn)在子宮內(nèi)膜異位癥患者與正常人群之間、子宮內(nèi)膜異位癥患者的在位子宮內(nèi)膜和異位子宮內(nèi)膜組織之間的差異。在子宮內(nèi)膜異位癥中在位內(nèi)膜組織的粘附、種植、侵襲、血管生成等病理生理改變中，miRNA 在異位內(nèi)膜組織、細(xì)胞和血液中的表達(dá)具有特異性[7]。這些特異性表達(dá)的miRNA 很可能在子宮內(nèi)膜異位癥的細(xì)胞分化、增殖、遷移和血管生成等方面發(fā)揮調(diào)控作用。有研究表明，miRNA 126 與子宮內(nèi)膜異位癥的發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)及嚴(yán)重程度相關(guān)，推測(cè)miRNA 可能影響EMS 個(gè)體易感性及其嚴(yán)重性[8]。Zhou 等[9]通過(guò)基因芯片技術(shù)對(duì)比EMS 患者在位內(nèi)膜與正常子宮內(nèi)膜，發(fā)現(xiàn)miRNA 存在差異表達(dá)，部分miRNA 在miRNA 表達(dá)譜中上調(diào)最明顯，過(guò)表達(dá)的 miRNA 通過(guò)激活 MEK/ERK 信號(hào)通路抑制孕激素受體表達(dá)，延遲在位內(nèi)膜蛻膜化，從而促進(jìn)EMS 進(jìn)展或通過(guò)上調(diào)轉(zhuǎn)錄因子激發(fā)一系列細(xì)胞增殖、凋亡和血管形成等多種信號(hào)通路，促進(jìn)EMS 病程演進(jìn)[10]。

2 血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子

2.1 VEGF 概述 血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子（VEGF）是一種肝素結(jié)合糖蛋白，是一種有效的促血管生成因子，具有強(qiáng)大的血管生成活性、血管通透性和內(nèi)皮細(xì)胞特異性有絲分裂活性，在生理和病理性血管生成中起重要作用，血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子在血管發(fā)育中具有促進(jìn)內(nèi)皮細(xì)胞增殖、維持未成熟血管的活力、促進(jìn)周細(xì)胞募集等功能。VEGF 的活化不僅導(dǎo)致血管增生和增加通透性，而且導(dǎo)致許多參與血管生成過(guò)程的蛋白水解酶的表達(dá)。

2.2 VEGF 與子宮內(nèi)膜異位癥的關(guān)系 在位內(nèi)膜決定論認(rèn)為子宮內(nèi)膜在宮腔外需經(jīng)黏附、侵襲、血管形成等過(guò)程，得以種植、生長(zhǎng)，才能導(dǎo)致子宮內(nèi)膜異位癥的發(fā)生。因此認(rèn)為血管生成是子宮內(nèi)膜異位癥發(fā)病機(jī)制的基礎(chǔ)。血管生成是由多種肽類生長(zhǎng)因子誘導(dǎo)的，包括血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子（VEGF）、成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子、血小板衍生生長(zhǎng)因子等。在促血管生成因子中，占首要地位的為血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子，它可直接作用于血管內(nèi)皮細(xì)胞，導(dǎo)致新生血管的形成。對(duì)子宮內(nèi)膜異位癥的在位內(nèi)膜細(xì)胞的宮腔外轉(zhuǎn)移和種植十分重要。在子宮內(nèi)膜異位病變的活躍部位VEGF 水平明顯升高，并通過(guò)增強(qiáng)VEGF 的表達(dá)，使新生血管形成。已有研究表明：子宮內(nèi)膜異位癥患者血液及腹腔液中VEGF 含量明顯高于非子宮內(nèi)膜異位癥患者，且隨著患者病情的加重而增高，Ⅲ、Ⅳ期患者血清及腹腔液中的VEGF明顯高于Ⅰ、Ⅱ期患者（P＜0.01）。根據(jù)患者腹腔液中VEGF 的含量高低，有助于判斷子宮內(nèi)膜異位癥患者的病情嚴(yán)重程度[11～13]。

3 miRNA 與VEGF 的關(guān)系

已有報(bào)道m(xù)iRNA 可以調(diào)控VEGF-A 的表達(dá)，進(jìn)而調(diào)控血管的生成[14]，且在子宮內(nèi)膜異位癥中特異表達(dá)的miRNA 也與新生血管的形成過(guò)程密切相關(guān)，miRNA 通過(guò)調(diào)節(jié)促進(jìn)血管生成因子的表達(dá)來(lái)調(diào)節(jié)血管生成過(guò)程，如血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子、表皮生長(zhǎng)因子、血小板衍生生長(zhǎng)因子等[15，16]。有研究證實(shí)，miRNA 功能的缺失在多種疾病的發(fā)生機(jī)制中發(fā)揮極其重要的作用[17，18]。相關(guān)研究證明子宮內(nèi)膜異位癥患者異位內(nèi)膜組織中某些特定miRNA 的不同表達(dá)，可間接影響VEGF 的表達(dá)，使其呈高表達(dá)形式存在，且根據(jù)分組對(duì)照研究，以腹膜異位內(nèi)膜組織中VEGF 高表達(dá)變化更為明顯，由此說(shuō)明，miRNA 的異常表達(dá)可作用于靶基因，如VEGF，使其表達(dá)增高，可能是子宮內(nèi)膜異位癥的重要發(fā)病機(jī)制之一[19，20]。

4 總結(jié)

miRNA 的發(fā)現(xiàn)為子宮內(nèi)膜異位癥的研究提供了一個(gè)全新的方向，通過(guò)基因芯片的研究，能準(zhǔn)確地證實(shí)子宮內(nèi)膜異位癥相關(guān)的標(biāo)志性的miRNA，這將對(duì)子宮內(nèi)膜異位癥早期診斷技術(shù)的發(fā)展有極大的促進(jìn)作用。隨著子宮內(nèi)膜異位癥相關(guān)miRNA 的深入研究，對(duì)子宮內(nèi)膜異位癥的發(fā)病機(jī)制的闡述更加明確，同時(shí)對(duì)該病的認(rèn)識(shí)也更加深入，這對(duì)診斷、評(píng)估、預(yù)防、治療子宮內(nèi)膜異位癥提供了新方向。血管的形成在子宮內(nèi)膜異位癥的病理生理過(guò)程中起重要作用，VEGF 為調(diào)控血管生長(zhǎng)的重要內(nèi)皮生長(zhǎng)因子，對(duì)于VEGF 的研究對(duì)揭示子宮內(nèi)膜異位癥的發(fā)病機(jī)制有重要幫助。近年來(lái)，通過(guò)對(duì)miRNA與VEGF 的相關(guān)研究，發(fā)現(xiàn)部分miRNA 作用于VEGF 的靶基因，導(dǎo)致VEGF 的靶基因高表達(dá)，同時(shí)提高VEGF 的表達(dá)。VEGF 作用于血管內(nèi)皮，使血管形成，滿足子宮內(nèi)膜異位癥發(fā)生發(fā)展的要求。

相信隨著國(guó)內(nèi)外子宮內(nèi)膜異位癥相關(guān)研究的不斷深入，miRNA 參與子宮內(nèi)膜異位癥發(fā)生發(fā)展的機(jī)制將會(huì)更加清晰明了。而VEGF 也可能成為子宮內(nèi)膜異位癥的重要標(biāo)志物而廣泛應(yīng)用于臨床，使更多的子宮內(nèi)膜異位癥患者被早期診斷，免受該病帶來(lái)的疼痛及不孕的困擾。miRNA 將可能成為子宮內(nèi)膜異位癥發(fā)現(xiàn)發(fā)展及預(yù)防評(píng)估的新指標(biāo)，通過(guò)誘導(dǎo)或抑制某些miRNA 的表達(dá)，或定向敲除與VEGF 的靶基因相關(guān)的miRNA，抑制VEGF 的高表達(dá)，從而降低血管的形成及生長(zhǎng)，可能成為子宮內(nèi)膜異位癥新的治療方式。