不規(guī)則抗體檢測在臨床輸血安全中的意義

馮旭

不規(guī)則抗體是指除ABO 血型系統(tǒng)（抗-A、抗-B及抗-AB）以外的其他血型系統(tǒng)的抗體，可由妊娠、輸血、移植等免疫刺激和某些疾病誘發(fā)產(chǎn)生，是引起臨床血型鑒定、交叉配血困難、溶血性輸血反應以及新生兒溶血病的主要原因[1，2]。因此，輸血前對患者進行不規(guī)則抗體檢測十分必要。本研究對我院2015年1月～2017年12月臨床擬輸血和備血的4 529 例患者進行不規(guī)則抗體檢測，探討其在臨床輸血安全中的意義。

1 材料與方法

1.1 一般資料 選擇我院2015年1月～2017年12月臨床擬輸血和備血患者共4 529 例，其中男2 376 例，女2 153 例；既往有輸血史1 481 例；既往有妊娠史 1 849 例。采集每例患者靜脈血2～3ml，EDTA 抗凝。

1.2 試劑與儀器 不規(guī)則抗體檢測試劑（人血紅細胞）、低離子強度鹽溶液抗人球蛋白微柱凝膠檢測卡均購自長春博迅生物技術有限公司，低速自動平衡離心機購自湖南邁克爾實驗儀器有限公司，血型血清學專用標準化離心機購自珠海貝索，免疫微柱孵育器、卡式離心機購自長春博研科學儀器有限公司，2℃～6℃醫(yī)用冷藏冰箱購自海爾。

1.3 方法 通過抗人球蛋白微柱凝膠檢測卡和不規(guī)則抗體檢測試劑對4 529 例患者進行不規(guī)則抗體初篩試驗，操作過程嚴格按照說明進行：將4%不規(guī)則抗體檢測試劑用LISS 液稀釋到0.8%，各取50μl上述Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ稀釋液加入到已標記的凝膠卡的微孔內(nèi)，再向各微孔內(nèi)分別加入50μl 患者血漿，置于37℃條件下孵育15min，使用卡式法專用離心機離心5min，根據(jù)所提供的不規(guī)則抗體檢測試劑的反應格局判定結(jié)果。將初篩陽性患者的標本送至上級參比實驗室進行抗體鑒定。

1.4 統(tǒng)計學方法 使用SPSS 17.0 統(tǒng)計學軟件對所有數(shù)據(jù)進行處理，計數(shù)資料的組間比較采用χ2檢驗，以P＜0.05 為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結(jié)果

2.1 不規(guī)則抗體的篩查情況 4 529 例患者中不規(guī)則抗體陽性53 例，總陽性率為1.17%。其中2 376例男性患者中陽性16 例（0.67%）；2 153 例女性患者中陽性37 例（1.72%）；女性患者不規(guī)則抗體陽性率明顯高于男性患者（χ2=10.67，P＜0.001）。 1 481 例有輸血史患者中陽性44 例（2.97%）；3 048 例無輸血史患者中陽性9 例（0.30%）；有輸血史患者不規(guī)則抗體陽性率明顯高于無輸血史患者（χ2=61.70，P＜0.001）。1 849 例有妊娠史患者中陽性36 例（1.95%）；304 例無輸血史患者中陽性1 例（0.33%）；有妊娠史患者不規(guī)則抗體陽性率明顯高于無妊娠史患者（χ2=4.05，P＜0.05）。

2.2 不規(guī)則抗體的特異性分布情況 53 例不規(guī)則抗體初篩陽性的患者抗體鑒定結(jié)果顯示，Rh 系統(tǒng)占62.26%，MNS 系統(tǒng)占9.43%，Lewis 系統(tǒng)占7.55%，Duffy 系統(tǒng)占1.89%，自身抗體占13.21%，冷抗體占5.66%。見表1。

表1 53 例不規(guī)則抗體特異性分布

3 討論

隨著科學技術的不斷發(fā)展和檢測手段的不斷更新，目前已發(fā)現(xiàn)并被國際輸血協(xié)會認可的血型系統(tǒng)已有36 個[3，4]，其中與臨床輸血安全最為息息相關且意義重大的為ABO 和Rh 血型系統(tǒng)。由于疾病、創(chuàng)傷等一些原因?qū)е禄颊哓氀?、失血量過多時臨床上常給予輸血治療。交叉配血是保證臨床輸血安全、及時、有效的重要實驗。然而，在實際工作中，常常是僅針對ABO、Rh（D）同型的受、供雙方進行交叉配血試驗，而對輸入的血液是否引入新的稀有抗原以及產(chǎn)生有意義的抗體不得而知，這將在很大程度上影響患者再次輸血時的效果。因此，在輸血前對患者進行不規(guī)則抗體檢測顯得尤為重要。

此次研究顯示，在4 529 例患者中不規(guī)則抗體陽性53 例，總陽性率1.17%，與既往報道的不規(guī)則抗體陽性率（0.6%～1.8%）一致[1，5]，提示我們在日常工作中應引起對不規(guī)則抗體檢測的重視，避免漏檢給交叉配血帶來困難，影響及時輸血治療。但差異較大時說明輸注抗原不相合的血液并非一定產(chǎn)生不規(guī)則抗體，還與抗原的劑量效應有關[6～8]。另外研究結(jié)果還顯示，不規(guī)則抗體的陽性率存在性別差異，即女性高于男性，分析原因可能是女性患者在某些特殊時期（如接受妊娠等免疫刺激），機體產(chǎn)生免疫應答。這一推測在我們此次研究的另一個結(jié)果中進一步得以證實，我們發(fā)現(xiàn)女性患者中有妊娠史者不規(guī)則抗體陽性率明顯高于無妊娠史者（1.95% vs 0.33%，P＜0.05）。不規(guī)則抗體的產(chǎn)生不僅與妊娠、某些免疫性疾病、血液病有關，還與輸血史有關，且與輸血次數(shù)成正相關。有研究結(jié)果顯示，患者每輸入1 個單位的血液制品，體內(nèi)產(chǎn)生不規(guī)則概率為0.8%～1.5%，且隨著輸血次數(shù)的增多，這一概率可增至14%～22%[9]。

對53 例不規(guī)則抗體初篩陽性的患者進行抗體鑒定，除7 例為自身抗體，3 例為冷抗體外，其余43例不規(guī)則抗體主要分布在Rh、MNS、Lewis、Duffy 血型系統(tǒng)，其中又以Rh 系統(tǒng)最為常見，這一結(jié)果可能為基層一些缺乏實驗條件的醫(yī)院帶來參考價值。Rh 血型系統(tǒng)的不規(guī)則抗體是引起溶血性輸血反應最主要的原因。我們發(fā)現(xiàn)抗-E 產(chǎn)生的概率最高（41.51%），提示抗-E 應引起輸血科工作人員的足夠重視。而D 抗原的免疫原性雖然最強，但抗-D出現(xiàn)的頻率低（3.77%），可能與D 抗原在我國漢族人群中分布的頻率高達99.7%有關[10]。另外聯(lián)合出現(xiàn)的抗-Ec 和抗-Ce 近年來也逐漸增多，同樣應當予以重視。

綜上所述，輸血前進行不規(guī)則抗體的檢測十分必要，且在條件允許的情況下應盡可能多的開展多個血型系統(tǒng)的交叉配合試驗，以盡可能少地輸入新抗原為原則，對不規(guī)則抗體陽性的患者選擇不含有對應抗原的血液進行輸注，減少發(fā)生輸血不良反應，保證患者安全而又及時有效的輸血治療。