丹參酮ⅡA抗癌作用的研究進(jìn)展

聞娜 石心紅(通訊作者)

(中國(guó)藥科大學(xué)中藥制藥系 南京 211198)

1.鼻咽癌

CNE1為鼻咽癌細(xì)胞株，將不同濃度的丹參酮ⅡA作用于該細(xì)胞，發(fā)現(xiàn)丹參酮ⅡA濃度越高作用時(shí)間越長(zhǎng)，CNE1細(xì)胞存活數(shù)量越少。研究發(fā)現(xiàn)是因?yàn)榈⑼駻抑制了腫瘤細(xì)胞的抗細(xì)胞凋亡基因的表達(dá)和位于人類腫瘤表面參與免疫調(diào)節(jié)的B7H3的表達(dá)，促進(jìn)CNE1凋亡[1]。同時(shí)也有人發(fā)現(xiàn)這種抑制作用與鈣依賴性通道和MT-1A表達(dá)上調(diào)有關(guān)[2]。丹參酮ⅡA還可以誘導(dǎo)食管癌Eca-109細(xì)胞的凋亡[3]。李媛等還發(fā)現(xiàn)其他抗鼻咽癌機(jī)制，并利用膜片鉗方法觀察丹參酮ⅡA對(duì)氯通道的影響，發(fā)現(xiàn)丹參酮ⅡA對(duì)低分化的鼻咽癌細(xì)胞氯離子通道有激活作用，抑制細(xì)胞凋亡性容積減小，從而發(fā)揮抗癌作用。氯通道與細(xì)胞容積調(diào)劑密切相關(guān)，當(dāng)用細(xì)胞凋亡誘導(dǎo)劑激活氯通道后，細(xì)胞內(nèi)氯離子和鉀離子外流，從而使細(xì)胞內(nèi)水分外流導(dǎo)致細(xì)胞容積減小而誘導(dǎo)低分化鼻咽癌細(xì)胞（CNE-2Z）凋亡[4]。

2.乳腺癌

丹參酮ⅡA具有雌激素樣活性，作用于陽(yáng)性乳腺癌T47D細(xì)胞，抑制該細(xì)胞增殖，但該作用可被ICI182，780拮抗。丹參酮ⅡA可促進(jìn)陽(yáng)性乳腺癌細(xì)胞的兩種亞型細(xì)胞的表達(dá)，增加EAa/EAb的比值，通過對(duì)亞型細(xì)胞的調(diào)節(jié)，間接影響細(xì)胞增殖[5]。趙俊云采用MTT法檢測(cè)丹參酮ⅡA處理后的乳腺癌細(xì)胞中環(huán)氧合酶-2的蛋白水平，實(shí)驗(yàn)結(jié)果再次證明丹參酮ⅡA具有抑制T47D、MDA-MB-231細(xì)胞增殖作用，同時(shí)還抑制細(xì)胞MCF-7的增殖，其機(jī)制是通過抑制轉(zhuǎn)錄因子～kB、激活蛋白-1的活性，進(jìn)而抑制環(huán)氧化酶-2的表達(dá)[6]。

3.結(jié)腸癌

丹參酮ⅡA抗結(jié)腸癌的作用機(jī)制主要包括抑制細(xì)胞增殖、促進(jìn)癌細(xì)胞凋亡、抑制癌細(xì)胞的侵襲和轉(zhuǎn)移。

結(jié)腸癌細(xì)胞的侵襲轉(zhuǎn)移是其不斷增殖的重要因素，Shan[7]等人發(fā)現(xiàn)在癌細(xì)胞侵襲轉(zhuǎn)移過程中，丹參酮ⅡA可抑制核因子NF-κB的信號(hào)傳導(dǎo)通路，進(jìn)而抑制癌細(xì)胞侵襲轉(zhuǎn)移過程中發(fā)揮重要作用的基質(zhì)金屬蛋白酶-2（MMP-2）、基質(zhì)金屬蛋白酶-9（MMP-9）和尿激酶纖溶酶原激活物(UPa)，使三種分子水平降低，同時(shí)使基質(zhì)金屬蛋白酶抑制劑-1（TIMP-1）和基質(zhì)金屬蛋白酶抑制劑-2（TIMP-2）的水平升高。人機(jī)體免疫系統(tǒng)中的重要轉(zhuǎn)錄因子NF-κB被抑制后，腫瘤細(xì)胞的侵襲和轉(zhuǎn)移被抑制。

Ma等[8]為了研究丹參酮ⅡA抑制結(jié)腸癌細(xì)胞的生長(zhǎng)是通過調(diào)節(jié)環(huán)氧合酶COX-2-wnt/β～連環(huán)蛋白信號(hào)通路實(shí)現(xiàn)的，試驗(yàn)將結(jié)腸癌細(xì)胞株HC8693暴露于不同濃度的丹參酮ⅡA下，經(jīng)MTT法、蛋白印記和酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)檢測(cè)后發(fā)現(xiàn)，丹參酮ⅡA明顯抑制HC8693的細(xì)胞生長(zhǎng)，RNA反轉(zhuǎn)錄和COX-2與β-連環(huán)蛋白表達(dá)明顯下降，同時(shí)參與腫瘤細(xì)胞增殖、發(fā)生和發(fā)展的血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子水平也降低,抑制了結(jié)腸癌血管的形成。所以證明了丹參酮ⅡA也可通過調(diào)節(jié)COX-2-wnt/β-連環(huán)蛋白信號(hào)通路來(lái)抑制結(jié)腸癌細(xì)胞的生長(zhǎng)。也有研究者[9]對(duì)HCT1116和COLO205進(jìn)行研究，發(fā)現(xiàn)癌細(xì)胞的存活能力與丹參酮ⅡA的劑量和作用與時(shí)間相關(guān)，并且在丹參酮ⅡA作用后出現(xiàn)細(xì)胞核內(nèi)的磷酸化P65水平降低，同時(shí)發(fā)現(xiàn)內(nèi)皮血管因子、原癌基因、環(huán)氧合酶和淋巴細(xì)胞瘤-2的表達(dá)水平也降低。而且，激活NF-κB的吡咯烷二硫代氨基甲酸也被抑制，諸多現(xiàn)象都證明了丹參酮ⅡA通過抑制NF-κB通路發(fā)揮誘導(dǎo)癌細(xì)胞死亡的療效。

腫瘤壞死因子（TNF-a）是由巨噬細(xì)胞產(chǎn)生的細(xì)胞毒性因子，與腫瘤壞死因子受體1結(jié)合，激活受體形成復(fù)雜的死亡誘導(dǎo)信號(hào)。母紅血球病癌基因ErbB-2是跨膜受體酪氨酸激酶在人體大腸腺癌的過表達(dá)。Su[10]等人發(fā)現(xiàn)丹參酮ⅡA在體內(nèi)和體外都能增加Col205細(xì)胞中腫瘤壞死因子和半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3的水平，一旦腫瘤壞死因子受體被激活，便形成復(fù)雜的死亡誘導(dǎo)信號(hào)，這個(gè)過程是由外部刺激引發(fā)膜受體結(jié)合,最終激活半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶導(dǎo)致細(xì)胞死亡。所以丹參酮ⅡA在結(jié)腸癌細(xì)胞內(nèi)通過激活凋亡的死亡受體介導(dǎo)途徑，下調(diào)ErbB-2在結(jié)腸癌細(xì)胞內(nèi)的表達(dá)，所以丹參酮ⅡA對(duì)結(jié)腸癌有很好的療效。

此研究者還發(fā)現(xiàn)丹參酮ⅡA和5-氟尿嘧啶同時(shí)使用強(qiáng)化了5-氟尿嘧啶在結(jié)腸癌裸體小鼠模型的功效，主要是通過下調(diào)P糖蛋白，自噬標(biāo)志性蛋白LC3-II,血管內(nèi)皮因子，基質(zhì)金屬蛋白-7，NF-κBP65蛋白的表達(dá)，從而對(duì)結(jié)腸癌的治療有輔助作用[11]。

4.肝癌

肝癌已成為世界上死亡率較高的幾大癌癥之一，目前發(fā)現(xiàn)丹參酮ⅡA在抗肝癌領(lǐng)域也有一定的效果。有研究者[12]采用MTT細(xì)胞計(jì)數(shù)和平板克隆形成法檢測(cè)肝癌細(xì)胞株SMMC-7721的生長(zhǎng)和增殖。采用顯微鏡、DNA電泳法和流式細(xì)胞數(shù)檢測(cè)該細(xì)胞株的凋亡。最終發(fā)現(xiàn)隨著丹參酮ⅡA給藥劑量的增加，作用時(shí)間的延長(zhǎng)，抑制癌細(xì)胞的作用隨之增強(qiáng)，當(dāng)時(shí)間達(dá)到72h時(shí)抑制效果最明顯。在丹參酮作用組中通過光和投射電子顯微鏡發(fā)現(xiàn)有染色質(zhì)縮合，形成新月和凋亡體的出現(xiàn)。證明了丹參酮ⅡA對(duì)抑制肝癌細(xì)胞的生長(zhǎng)和增殖是通過誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡產(chǎn)生的。同樣，也有研究者對(duì)肝癌細(xì)胞株HePG2、BEL7402進(jìn)行研究[13]，也得到了相同的結(jié)果，在試驗(yàn)中，用丹參酮ⅡA處理癌細(xì)胞不同時(shí)間和給予不同的劑量后發(fā)現(xiàn)這種抑制作用存在時(shí)間和劑量依賴性。當(dāng)用高濃度丹參酮ⅡA長(zhǎng)時(shí)間處理癌細(xì)胞時(shí)出現(xiàn)凋亡體，再次證明了丹參酮ⅡA有抗肝癌的效果。

5.腎癌

目前，全球腎癌的發(fā)病率逐漸上升，許多研究者發(fā)現(xiàn)丹參酮ⅡA對(duì)腎癌有一定的治療作用。試驗(yàn)過程中利用不同濃度的丹參酮ⅡA處理786～O細(xì)胞，結(jié)果與對(duì)照組比較，經(jīng)處理后的細(xì)胞活力明顯降低。細(xì)胞周期S期的細(xì)胞增殖被阻滯導(dǎo)致該期細(xì)胞比例增加，并且猜測(cè)是由丹參酮ⅡA促進(jìn)P53和P21蛋白表達(dá)引起的[14]。

6.宮頸癌

丹參酮ⅡA除以單體成分發(fā)揮療效外，將其制備成鈉鹽也能夠發(fā)揮特定的療效。丹參酮ⅡA磺酸鈉能降低宮頸癌細(xì)胞HeLa的遷移，但對(duì)細(xì)胞活性不產(chǎn)生影響[15],也有研究者發(fā)現(xiàn)丹參酮ⅡA對(duì)HeLa細(xì)胞生長(zhǎng)增殖有抑制作用，可能是由于抑制了細(xì)胞間隙連接蛋白Cx43的表達(dá)并促進(jìn)SKP2的表達(dá)引起的[16]。丹參酮ⅡA還作用于宮頸癌鱗癌Siha細(xì)胞，明顯抑制其增殖[17]。

7.小結(jié)

丹參酮ⅡA除對(duì)上述癌癥有較好的防治效果外，還具有抗肺癌、抗膀胱癌等作用，其抗腫瘤機(jī)制主要為抑制腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)和增殖，誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞死亡，抑制腫瘤細(xì)胞侵襲和轉(zhuǎn)移，其過程伴隨著對(duì)細(xì)胞周期各信號(hào)因子的調(diào)控。丹參酮ⅡA的抗腫瘤作用相比于放化療更安全。了解丹參酮ⅡA的抗腫瘤作用機(jī)制可快速發(fā)掘丹參酮ⅡA對(duì)其他癌癥的作用，從而降低普通治療對(duì)人體造成的傷害，為癌癥治療提供良好的輔助作用。