轉(zhuǎn)基因作物快速檢測技術(shù)進(jìn)展與展望

梁晉剛 徐俊鋒 焦悅 劉鵬程 張秀杰

摘要：轉(zhuǎn)基因檢測作為轉(zhuǎn)基因生物安全評價、監(jiān)管和標(biāo)識管理的重要支撐，可有效防范未經(jīng)安全評價和品種審定的轉(zhuǎn)基因作物非法擴(kuò)散，保障我國農(nóng)業(yè)轉(zhuǎn)基因生物產(chǎn)業(yè)健康發(fā)展。隨著現(xiàn)代生物技術(shù)的發(fā)展，轉(zhuǎn)基因檢測技術(shù)也在朝著快速、簡便、高通量、自動化等方向發(fā)展，轉(zhuǎn)基因快速檢測技術(shù)越來越得到廣泛運(yùn)用并在監(jiān)管過程中發(fā)揮了重要作用。本文簡要介紹了轉(zhuǎn)基因作物快速檢測技術(shù)的發(fā)展現(xiàn)狀，并討論了幾種快速檢測技術(shù)存在的問題，最后總結(jié)歸納了轉(zhuǎn)基因作物檢測存在的新問題，為我國轉(zhuǎn)基因作物的安全監(jiān)管提供參考。

關(guān)鍵詞：轉(zhuǎn)基因作物;快速檢測技術(shù);監(jiān)管;研究進(jìn)展;展望

中圖分類號： Q785文獻(xiàn)標(biāo)志碼： A

文章編號：1002-1302（2019）21-0071-04

收稿日期：2018-07-24

基金項(xiàng)目：轉(zhuǎn)基因生物新品種培育科技重大專項(xiàng)（編號：2016ZX08011-003）。

作者簡介：梁晉剛（1987—），男，山西陽泉人，博士，農(nóng)藝師，主要從事轉(zhuǎn)基因生物安全評價與檢測研究。E-mail：382408162@qq.com。

通信作者：張秀杰，副研究員，主要從事轉(zhuǎn)基因生物安全評價與檢測研究。E-mail：zhxj7410@sina.com。

許多轉(zhuǎn)基因生物被研發(fā)公司給予不同的商品名稱，以便在市場上進(jìn)行商業(yè)化運(yùn)作。然而其遺傳性狀和商品名不一定完全相同，即具有不同商品名稱的轉(zhuǎn)基因生物可能具有相同的遺傳性狀，以相同商品名稱出售的轉(zhuǎn)基因生物可能包含不同的遺傳性狀。因此，明確產(chǎn)品含有何種轉(zhuǎn)基因成分的唯一方法就是通過轉(zhuǎn)基因生物檢測。

自1996年轉(zhuǎn)基因作物商業(yè)化以來，轉(zhuǎn)基因技術(shù)研究范圍不斷擴(kuò)大，全球轉(zhuǎn)基因作物種植面積持續(xù)增加。2017年，全球轉(zhuǎn)基因作物種植面積達(dá)到1.898億hm2，轉(zhuǎn)基因作物在帶來巨大經(jīng)濟(jì)效益和生態(tài)效益的同時，其潛在風(fēng)險也一直飽受爭議，因此建立快速且準(zhǔn)確地轉(zhuǎn)基因檢測體系十分重要[1]。

國際上批準(zhǔn)商業(yè)化種植的轉(zhuǎn)基因作物經(jīng)過了最為嚴(yán)格的安全評價與檢測，也建立了有史以來最為嚴(yán)格的監(jiān)管體系[2]。我國同樣十分重視農(nóng)業(yè)轉(zhuǎn)基因生物安全管理工作，每年都會組織開展農(nóng)業(yè)轉(zhuǎn)基因生物安全監(jiān)管工作，一些相關(guān)的檢測手段也正在不斷地完善中。從2002年起，農(nóng)業(yè)部發(fā)布了一系列農(nóng)業(yè)轉(zhuǎn)基因生物安全標(biāo)準(zhǔn)，截至2017年12月，現(xiàn)行有效的標(biāo)準(zhǔn)共176項(xiàng)，其中，產(chǎn)品成分檢測類的標(biāo)準(zhǔn)有100項(xiàng)[3]。作為法規(guī)實(shí)施的重要技術(shù)保障，農(nóng)業(yè)轉(zhuǎn)基因標(biāo)準(zhǔn)在安全評價、安全監(jiān)管、檢測監(jiān)測和產(chǎn)品標(biāo)識等方面發(fā)揮了重要作用。轉(zhuǎn)基因作物管理的完善，需要快速而簡便的檢測方法。

一方面轉(zhuǎn)基因作物種植面積逐年上升，品系（事件）越來越多、元件構(gòu)成越來越復(fù)雜，另一方面轉(zhuǎn)基因作物對人和環(huán)境的安全性問題也備受爭議，同時轉(zhuǎn)基因作物非法種植、流通及低水平混雜現(xiàn)象時有發(fā)生。因此許多國家都制定了相應(yīng)的定性定量檢測和標(biāo)識制度。我國嚴(yán)格按照法律法規(guī)開展轉(zhuǎn)基因安全評價和安全管理，只有通過安全評價后，方可獲得生產(chǎn)應(yīng)用安全證書。然而目前監(jiān)管實(shí)踐中卻依然缺乏對轉(zhuǎn)基因成分進(jìn)行高通量、快速高效、操作簡單、低成本的檢測技術(shù)與配套產(chǎn)品。

1轉(zhuǎn)基因作物檢測技術(shù)研究進(jìn)展

1.1商業(yè)化轉(zhuǎn)基因作物的主要外源元件

目前國內(nèi)外轉(zhuǎn)基因生物研發(fā)迅猛，各種新型的轉(zhuǎn)化體層出不窮，給轉(zhuǎn)基因檢測工作帶來極大挑戰(zhàn)?，F(xiàn)國內(nèi)外商業(yè)化轉(zhuǎn)基因作物主要有玉米、大豆、棉花、水稻、油菜，這5類主要轉(zhuǎn)基因作物的外源插入基因序列按啟動子、終止子、目的基因、標(biāo)記基因進(jìn)行分類統(tǒng)計(jì)分析，主要檢測元件包括：

轉(zhuǎn)基因玉米檢測CaMV 35S啟動子、FMV 35S啟動子、bar、pat、Cp4-epsps、m-epsps、Cry1Ab、nptII、CaMV 35S終止子、NOS終止子等;

轉(zhuǎn)基因大豆檢測CaMV 35S啟動子、FMV 35S啟動子、pat、Cry1Ac、Cp4-epsps、NOS終止子、E9終止子等;

轉(zhuǎn)基因棉花檢測CaMV 35S啟動子、FMV 35S啟動子、pat、Cry1Ab/Ac、Cp4-epsps、API、CpTI、nptII、NOS終止子、E9終止子等;

轉(zhuǎn)基因水稻檢測CaMV 35S啟動子、bar、Cry1Ab/Ac、nptII、hpt、NOS終止子等;

轉(zhuǎn)基因油菜檢測CaMV35S啟動子、FMV35S啟動子、NOS啟動子、bar、pat、Cp4-epsps、NOS終止子、E9終止子等。

各類檢測元件可在轉(zhuǎn)基因檢測相關(guān)數(shù)據(jù)庫中查詢，數(shù)據(jù)庫主要有GMDD（GMO Detection Method Database）、EU Database of Reference Methods for GMO Analysis、GMO Compass。

1.2轉(zhuǎn)基因作物的檢測方法概述

根據(jù)檢測轉(zhuǎn)基因作物中的目標(biāo)物，轉(zhuǎn)基因作物的成分檢測主要從3個方面入手：（1）針對基因核酸的檢測，在檢測的特異性上，又分為篩選檢測、基因特異性檢測、構(gòu)建特異性檢測、轉(zhuǎn)化體特異性檢測等類型，利用的方法主要為定性PCR和實(shí)時熒光定量PCR 2種;（2）針對蛋白質(zhì)的檢測，主要包括蛋白質(zhì)印跡法、酶聯(lián)免疫吸附法、免疫層析法;（3）基于代謝物的檢測，主要包括高效液相色譜法和雙向電泳法[4-8]。

目前，檢測中最常用的仍是定性PCR和實(shí)時熒光PCR方法[7]。與此同時，雖然許多國家已經(jīng)實(shí)施了嚴(yán)格的轉(zhuǎn)基因標(biāo)識管理規(guī)定，但經(jīng)常有未經(jīng)授權(quán)和不受控制的轉(zhuǎn)基因作物被釋放的報道，因此迫切需要一種即時、敏感、簡單、低成本、易于操作的方法來進(jìn)行現(xiàn)場檢測轉(zhuǎn)基因作物[9]。

轉(zhuǎn)基因快速檢測技術(shù)在政府監(jiān)管、企業(yè)內(nèi)控等方面發(fā)揮的作用越來越重要。農(nóng)業(yè)農(nóng)村部曾在印發(fā)的農(nóng)業(yè)轉(zhuǎn)基因生物安全監(jiān)管工作方案中建議，充分利用試紙條等快速檢測方法，降低成本，擴(kuò)大監(jiān)測范圍[10]。

2轉(zhuǎn)基因作物的快速檢測技術(shù)研究進(jìn)展

轉(zhuǎn)基因作物常規(guī)檢測法結(jié)果比較可靠，但樣品前處理繁瑣、檢測成本高、時間長，需要專門的技術(shù)人員，無法滿足快速、低成本等實(shí)際的需要，從而催生出許多的快速檢測技術(shù)，如各種試紙條、生物芯片、傳感器等，這些技術(shù)的加入為現(xiàn)場檢測提供了更廣闊的發(fā)展空間。其中，目前實(shí)際應(yīng)用比較多的是以PCR為基礎(chǔ)的檢測方法和以DNA雜交為基礎(chǔ)的生物傳感器[11]。

2.1以核酸恒溫?cái)U(kuò)增為基礎(chǔ)的快速檢測

核酸恒溫?cái)U(kuò)增技術(shù)與常規(guī)PCR相比，可在恒定溫度下使DNA或者RNA目標(biāo)片段延伸，對儀器要求較低，通常簡易的水浴鍋或恒溫槽等就可以滿足要求，擺脫了傳統(tǒng)擴(kuò)增方法對精密溫控設(shè)備的需求，實(shí)現(xiàn)快速檢測，大致可分為4類：（1）鏈置換DNA聚合酶介導(dǎo)的反應(yīng)，如環(huán)介導(dǎo)恒溫?cái)U(kuò)增（loop mediated isothermal amplification，LAMP）、交叉引物恒溫?cái)U(kuò)增（cross-priming amplification，CPA）和滾環(huán)擴(kuò)增（rolling circle amplification，RCA）;（2）酶促解旋/引物退火的反應(yīng)，如重組酶介導(dǎo)擴(kuò)增（recombinase polymerase amplification，RPA）;（3）基于RNA轉(zhuǎn)錄的擴(kuò)增反應(yīng)，如轉(zhuǎn)錄介導(dǎo)的擴(kuò)增（transcription-mediated amplification，TMA）和基于核酸序列的擴(kuò)增（nucleic acid sequence-based amplification，NASBA）;（4）基于單鏈剪切輔助的反應(yīng)，如鏈置換擴(kuò)增（strand displacement amplification，SDA）和切口酶介導(dǎo)的擴(kuò)增（niking enzyme amplification reaction，NEAR）[12]。其中，以LAMP、CPA、RPA等簡便快速的恒溫?cái)U(kuò)增技術(shù)在轉(zhuǎn)基因檢測中已受到廣泛關(guān)注。

2.1.1基于LAMP技術(shù)的快速檢測方法

LAMP技術(shù)依賴于能識別靶標(biāo)序列上6個特異區(qū)域的4條引物（包括正向外引物、正向內(nèi)引物、反向外引物和反向內(nèi)引物）和1個具有鏈置換特性的DNA聚合酶，在等溫條件下特異、高效、快速地?cái)U(kuò)增靶基因，靈敏度高、特異性高。另外，通過設(shè)計(jì)2條環(huán)引物（正向環(huán)引物和反向環(huán)引物）可加快LAMP反應(yīng)速度，使整個反應(yīng)時間縮短[13-15]。與CPA不同的是，LAMP擴(kuò)增具有更高的擴(kuò)増效率，更大的產(chǎn)物生成量，常用的是濁度法、鈣黃綠素法和SYBR Green Ⅰ熒光法[16]。LAMP擴(kuò)增以其高特異性和高擴(kuò)增效率的特點(diǎn)在食品、環(huán)境、農(nóng)業(yè)、臨床等多個方面都有廣泛的應(yīng)用。Shao等發(fā)展了基于毛細(xì)管陣列的恒溫核酸擴(kuò)增技術(shù)（capillary array-based loop-mediated isothermal amplification for multiplex visual detection of nucleic acids，CALM），該平臺可實(shí)現(xiàn)并行的多重LAMP反應(yīng)，研究人員選取了7種常用且重要的轉(zhuǎn)基因元件（P-CaMV35S、bar、cp4-epsps、P-FMV 35S、pat、T-nos、nptII），同時加入5個物種內(nèi)源基因（ADH1、Sad1、SPS、HMG I/Y、Lectin）作為陽性對照對平臺進(jìn)行性能測試，表明CALM技術(shù)平臺具有極高的檢測準(zhǔn)確性，也表明其在實(shí)際檢測領(lǐng)域有著很好的運(yùn)用前景[17]。Wang等研究引入了一種新型的金屬指示劑-酸性絡(luò)藍(lán)K（acid chrome blue K，ACBK），建立了閉管LAMP擴(kuò)增和檢測結(jié)果可視化檢測技術(shù)，并以T-nos和P-CaMV35S為靶序列，建立了TNOS-ACBK-LAMP和P35S-ACBK-LAMP檢測體系，檢測結(jié)果既可以裸眼直接判斷也可以借助紫外可見光譜分析[18-19]。為了使診斷技術(shù)更加簡便易行，使之適用于在田間操作，Wang等建立了轉(zhuǎn)基因作物葉片DNA快速提取技術(shù)，并使用普通保溫杯為LAMP反應(yīng)提供所需的恒溫條件，通過肉眼判別是否產(chǎn)生焦磷酸鎂白色沉淀來檢測轉(zhuǎn)基因作物，最終研發(fā)出一套不依賴電源不依賴實(shí)驗(yàn)室條件、可以在30 min內(nèi)完成的田間LAMP檢測技術(shù)體系[20]。

2.1.2基于CPA技術(shù)的快速檢測方法

CPA主要利用具有鏈置換功能的DNA聚合酶結(jié)合特殊的引物設(shè)計(jì)在體外恒溫條件下（63 ℃）特異、高效、快速地復(fù)制模板完成擴(kuò)增，并通過側(cè)橫流試紙條進(jìn)行檢測[21]。快速、簡單、不需要昂貴儀器和分子實(shí)驗(yàn)室的特點(diǎn)使CPA逐漸受到關(guān)注，Huang等利用CPA結(jié)合側(cè)橫流試紙條用來對轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品進(jìn)行現(xiàn)場篩選，通過檢測CaMV35S基因可檢測0.05%的轉(zhuǎn)基因玉米MON810[22]。

2.1.3基于RPA技術(shù)的快速檢測方法

重組聚合酶擴(kuò)增（RPA）技術(shù)被稱為是可以替代PCR的核酸檢測技術(shù)。RPA擴(kuò)增的速度非?？?，靈敏度高，對硬件設(shè)備要求低，而且不需要復(fù)雜的樣本處理。這樣的技術(shù)特別適合于體外診斷、獸醫(yī)、食品安全、生物防御、農(nóng)業(yè)等領(lǐng)域。RPA能在室溫條件（37～42 ℃）下快速檢測樣本里的痕量DNA。Xu等用這一技術(shù)在15～25 min內(nèi)檢出了只含100拷貝目標(biāo)分子的樣本。此外，他們還建立了實(shí)時RPA分析體系，成功檢測了4種主要的轉(zhuǎn)基因作物（玉米、水稻、棉花和大豆）[23]。Wang等研發(fā)了一種靠人體加熱介導(dǎo)的RPA方法，試驗(yàn)結(jié)果可通過肉眼直接觀察，結(jié)果表明該方法可在不同的環(huán)境溫度下準(zhǔn)確檢測耐除草劑轉(zhuǎn)基因大豆GTS 40-3-2[9]。

2.2以DNA雜交為基礎(chǔ)的快速檢測

貴金屬納米粒子（金、銀、銅等）具有強(qiáng)烈的光-物質(zhì)相互作用特性。納米結(jié)構(gòu)材料與表面價電子集體振蕩頻率匹配的光子相互作用時會發(fā)生局域表面等離子體共振（localized surface plasmon resonance，LSPR）現(xiàn)象。該方法具有樣品處理方法簡化、高通量、特異性強(qiáng)等特征，可以免除基因檢測中復(fù)雜的PCR擴(kuò)增環(huán)節(jié)。Jang等展示了金納米粒子LSPR效應(yīng)可用于檢測耐除草劑大豆外源基因，經(jīng)過30 min雜交反應(yīng)后，在540 nm條件下可最低檢測含1 nmol/L目標(biāo)DNA的樣品[24]。程志強(qiáng)等利用表面等離子共振成像（surface plasmon resonance imaging，SPRi）技術(shù)，分析了玉米的6種轉(zhuǎn)基因序列和6種轉(zhuǎn)基因操作元件，并證明可將DNA和RNA探針結(jié)合的信號放大40倍左右[25]。

Yun等研制出自動微流控薄膜芯片（auto-microfluidic thin-film chip，AMTC）來多重檢測轉(zhuǎn)基因玉米，將DNA探針固定于方形尼龍薄膜上并置于反向斑點(diǎn)雜交儀器的反應(yīng)室內(nèi)，該方法檢測極限可達(dá)到0.1%，表明膜芯片技術(shù)的檢出限不低于普通PCR和實(shí)時熒光定量PCR[26]。

2.3以蛋白質(zhì)為基礎(chǔ)的快速檢測

基于抗體識別轉(zhuǎn)基因蛋白的快速檢測一直是國內(nèi)外快速檢測領(lǐng)域應(yīng)用最為廣泛的方法，農(nóng)業(yè)部曾明文推薦該方法用于轉(zhuǎn)基因生物安全監(jiān)管實(shí)踐[10]。Freitas等研制出阻抗型電化學(xué)免疫傳感器用于檢測轉(zhuǎn)基因玉米種子中表達(dá)的Cry1Ab蛋白，該方法可檢測轉(zhuǎn)基因玉米種子質(zhì)量分?jǐn)?shù)含量為0～5%的樣品，整個分析過程約需4 h，且與ELISA分析具有相同的精確度，為在田間簡便快速地檢測轉(zhuǎn)基因作物的殺蟲蛋白提供了廣闊的應(yīng)用前景[27]。Gao等研制了一種基于碳納米團(tuán)簇的無標(biāo)記電化學(xué)發(fā)光免疫傳感用于檢測Cry1Ab蛋白，該方法可在65 min內(nèi)檢出含3 pg/mL Cry1Ab蛋白的樣品，另外，該方法還分別成功檢出了含0.10%轉(zhuǎn)基因水稻BT63的樣品和含0.02%轉(zhuǎn)基因玉米MON810的樣品[28]。

磁性納米粒子（magnetic nanoparticles，MNps）已運(yùn)用于提取轉(zhuǎn)基因大豆基因組DNA，實(shí)現(xiàn)了樣品的快速高效提取[29]。Liang等又成功將該技術(shù)運(yùn)用于Cry1Ac蛋白的檢測，該技術(shù)具有更高的靈敏度，可檢測0.1 pg/L～1.0 mg/L含量的Cry1Ac蛋白[30]。

2.4其他快速檢測技術(shù)

拉曼光譜（raman spectroscopy，RS）是一種散射光譜，具有檢測過程簡單、檢測效率高、不會造成環(huán)境污染、大大降低檢測成本等特點(diǎn)[31-32]。林萍等發(fā)明了一種轉(zhuǎn)基因水稻種子及其親本的快速檢測方法，采用拉曼光譜裝置獲取轉(zhuǎn)基因水稻種子及其親本的拉曼光譜散射特征曲線，采用核主成分分析法獲取核主成分，將核主成分作為大間隔最近鄰居算法的輸入變量，在核空間中實(shí)現(xiàn)轉(zhuǎn)基因水稻種子樣本的鑒定[33]。Kadam等利用表面增強(qiáng)拉曼光譜（surface-enhanced Raman spectroscopy，SERS）技術(shù)，研發(fā)出省去PCR擴(kuò)增，且可高靈敏精確檢測出含有0.1 pg轉(zhuǎn)基因擬南芥的樣品[11]。

3轉(zhuǎn)基因檢測討論及展望

3.1快速檢測方法存在的問題

使用核酸恒溫?cái)U(kuò)增技術(shù)已能在較短的時間內(nèi)、恒定的溫度下對核酸完成擴(kuò)增，不需要精密的溫控設(shè)備，具備易于集成的潛力，為便攜核酸分析提供了基礎(chǔ)，但在實(shí)際應(yīng)用中仍然存在一些不足。大部分恒溫?cái)U(kuò)增檢測方法自身存在一定程度的缺陷。試紙條法：盡管核酸試紙條法價格低廉、使用方便、特異性強(qiáng)，但具有需要開蓋檢測的弊端，使得研究者不得不借助其他手段避免氣溶膠的產(chǎn)生。濁度法：盡管濁度法檢測核酸擴(kuò)增非常直觀，但很多情況下難以用肉眼分辨結(jié)果，容易造成誤判。因此，目前盡管快速檢測方法層出不窮，考慮到檢測結(jié)果的穩(wěn)定性，全世界范圍內(nèi)轉(zhuǎn)基因檢測中最常用的仍是定性PCR和實(shí)時熒光PCR方法[7]。

3.2快速檢測技術(shù)在監(jiān)管中的應(yīng)用前景

從檢測原理考慮，以傳統(tǒng)核酸擴(kuò)增為基礎(chǔ)的轉(zhuǎn)基因檢測技術(shù)面臨兩大主要的關(guān)鍵挑戰(zhàn)，即特異性檢測引物設(shè)計(jì)及高質(zhì)量模板DNA的獲取。目前，隨著加工技術(shù)水平和加工精度的提高，原料DNA在加工過程中破壞更為嚴(yán)重。同時，精細(xì)化的加工過程往往容易引入更多物理、化學(xué)或生物性的PCR抑制因子，造成了模板DNA質(zhì)量的降低，客觀上又給轉(zhuǎn)基因檢測帶來了困難。因此，為提高轉(zhuǎn)基因成分檢測的特異性及靈敏度，需大力發(fā)展復(fù)雜樣品（如深加工食品樣品、干擾成分復(fù)雜樣品等）的核酸提取和純化技術(shù)，同時也應(yīng)發(fā)展特異性和靈敏度更高、重復(fù)性更好、檢測更快速、結(jié)果更可靠的新型核酸檢測技術(shù)，同時需依據(jù)相應(yīng)的技術(shù)特點(diǎn)對不同檢測技術(shù)進(jìn)行組合使用，形成行之有效的檢測技術(shù)?？梢灶A(yù)見，隨著各種商業(yè)化轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品種類和數(shù)量加速推出，必然要求在短時間內(nèi)同時完成大量樣品的各種轉(zhuǎn)基因成分檢測，因此，高通量、自動化、微型化、低成本、高靈敏度、高特異性、快速簡便、準(zhǔn)確高效的轉(zhuǎn)基因檢測技術(shù)及技術(shù)組合將是未來轉(zhuǎn)基因檢測技術(shù)研究與應(yīng)用的發(fā)展方向。

3.3新型生物技術(shù)植物的安全管理

隨著轉(zhuǎn)基因技術(shù)更加精準(zhǔn)，基因編輯技術(shù)、定點(diǎn)重組技術(shù)的突破有望使基因操作實(shí)現(xiàn)安全化、精準(zhǔn)化，同時也面臨如何對這個新生事物進(jìn)行監(jiān)管和檢測的新問題。

一方面，隨著轉(zhuǎn)基因研究的深入與發(fā)展，如以CRISPR/CAS9為代表的基因組定點(diǎn)編輯技術(shù)，在轉(zhuǎn)基因研發(fā)中得以應(yīng)用與發(fā)展，轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品呈現(xiàn)出多樣化發(fā)展的趨勢。為維護(hù)自己的商業(yè)利益，研發(fā)單位往往不愿將相應(yīng)的遺傳改造信息，特別是基因序列信息對外公布，造成遺傳改造的基因序列信息難以獲取。此類基因編輯作物不同于傳統(tǒng)轉(zhuǎn)基因作物，基因編輯作物更多的是對目的基因的刪除、插入、堿基突變等，這些基因編輯作物在基因水平上可能與傳統(tǒng)育種相比無明顯差異，這增加了檢測的復(fù)雜性。如何有效區(qū)分基因編輯作物與自然突變作物仍然是檢測的一大難點(diǎn)。

另一方面，對于傳統(tǒng)轉(zhuǎn)基因作物的檢測技術(shù)來說，基于蛋白質(zhì)的檢測技術(shù)是其重要的組成部分。但是對于RNAi轉(zhuǎn)基因作物（比如轉(zhuǎn)基因番木瓜）來說，由于沒有外源蛋白的表達(dá)，基于蛋白質(zhì)的轉(zhuǎn)基因檢測技術(shù)就不再適用。這對RNAi轉(zhuǎn)基因作物的現(xiàn)場快速檢測提出了更高的要求。因此，開發(fā)新型的可以對RNAi轉(zhuǎn)基因成分進(jìn)行現(xiàn)場檢測的快速檢測方法是未來RNAi轉(zhuǎn)基因作物監(jiān)管的基礎(chǔ)。

為精確地對轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品中的轉(zhuǎn)基因成分進(jìn)行定量，研究人員須研發(fā)出更多更好的適合轉(zhuǎn)基因作物檢測需求的方法和快速篩查技術(shù)。

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