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    幽門螺桿菌感染與人胃黏膜組織miRNA584 和miRNA1290表達相關(guān)性分析

    2018-12-27 01:51:04任于晗王亞娟王金鋼
    浙江中西醫(yī)結(jié)合雜志 2018年12期
    關(guān)鍵詞:胃癌

    葉 彬 任于晗 王亞娟 俞 珊 王金鋼 郭 妮

    作者單位:浙江省嵊州市人民醫(yī)院(浙江大學附屬一院嵊州分院)消化內(nèi)科(嵊州312400)

    幽門螺桿菌(helieobacter pylori,Hp)感染被認為與慢性胃炎、胃黏膜腸化生、胃癌等疾病的發(fā)生密切相關(guān),Hp 感染增加了胃黏膜腸化生、胃癌發(fā)生的幾率[1-2]。miRNAs(microRNA,微小RNA)是一類在轉(zhuǎn)錄后水平調(diào)控基因表達的小的內(nèi)源性非編碼RNA分子,其在癌癥的發(fā)生發(fā)展中可能發(fā)揮重要功能[3-4]。研究表明,miRNA584 和miRNA1290 是胃黏膜發(fā)生腸化生機制中的一個重要通路[5-9]。本研究觀察Hp 感染與人胃黏膜組織miRNA584 和miRNA1290 表達情況,探究Hp 感染與miRNA584 和miRNA1290 表達的相關(guān)性。

    1 材料與方法

    1.1 臨床資料 選取2013 年6 月—2014 年12 月在嵊州市人民醫(yī)院行胃鏡檢查的慢性胃炎患者80例,其中男性46 例,女性34 例。平均年齡(52.37±11.47)歲。所有患者均進行14C-尿素呼氣試驗檢查,檢查結(jié)果Hp 陽性患者40 例,Hp 陰性患者40 例。胃鏡檢查分別于胃體中部大彎、小彎側(cè)及胃竇距幽門3cm 大彎、小彎側(cè)各活檢1 塊組織行光鏡檢查,所有活檢組織必須為黏膜全層,包括黏膜肌層。

    1.2 試 劑 單克隆抗體購自Santa Cruz 公司,二甲苯等試劑購自華東試劑公司,醋酸酐等試劑購自武漢博士德公司,三乙醇胺等試劑購自上海化學試劑公司,預雜交液及雜交液購自丹麥Exiqon 公司。

    1.3 原位雜交方法 對收集的四塊胃黏膜組織石蠟標本,依照脫蠟、水化、染色、水洗殘液、脫水、封片等流程進行原位雜交,miRNA584 和miRNA1290 以細胞質(zhì)中出現(xiàn)明顯的藍色顆粒為陽性染色,采用半定量積分法[10]判斷結(jié)果。染色強度分級:1 分,無染色或弱染色;2 分,中等強度染色;3 分,強染色。陽性細胞數(shù)分級:1 分,陽性表達率<10%;2 分,陽性表達率10%~50%;3 分,陽性表達率>50%。以上兩項分數(shù)相乘,得分0~3 分者為低表達,>3 分為高表達。

    1.4 統(tǒng)計學方法 應用SPSS17.0 統(tǒng)計軟件進行數(shù)據(jù)處理,計數(shù)資料比較采用χ2檢驗。P<0.05 為差異有統(tǒng)計學意義。

    2 結(jié) 果

    檢測樣本中miRNA584 和miRNA1290 的陽性染色主要出現(xiàn)在胞質(zhì)中,胞膜和胞核無表達。Hp 陽性患者胃黏膜組織miRNA584 無染色或弱染色14例,中等強度染色17 例,強染色9 例;miRNA1290 無染色或弱染色16 例,中等強度染色13 例,強染色11例。Hp 陰性患者胃黏膜組織miRNA584 無染色或弱染色23 例,中等強度染色13 例,強染色4 例;miRNA1290 無染色或弱染色27 例,中等強度染色7 例,強染色6 例。與Hp 陰性患者胃黏膜組織比較,Hp 陽性患者胃黏膜組織miRNA584 和miRNA1290 表達均增加,差異均有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。見表1。

    表1 Hp 感染與胃黏膜組織miRNA584、miRNA1290 表達[例(%)]

    3 討 論

    Hp 在胃黏膜腸化及胃癌發(fā)生發(fā)展中起重要的作用,Hp 感染增加了胃癌的發(fā)生風險[1-2],已經(jīng)被WHO 正式列為Ⅰ類致癌因子。

    研究表明,miRNAs 在胃癌的發(fā)生、發(fā)展以及轉(zhuǎn)移的過程中起到了重要的作用[11-12],在萎縮性胃炎及胃黏膜腸化生等胃癌前狀態(tài)中,存在大量表達異常的miRNAs[13-14]。研究表明,miRNA584 和miRNA 1290 在體外培養(yǎng)的胃黏膜上皮細胞感染Hp 后發(fā)生腸化生改變中起到重要的作用,在Hp 毒力因子CagA 作用下miRNA584 和miRNA1290 表達升高,促進了腸化生的發(fā)生,其中miRNA584 通過Erk1/2 途徑上調(diào),miRNA1290 通過NF-κB 通路激活,miRNA584 和miRNA1290 的共同靶基因是Foxa1,該實驗表明,miRNA584 和miRNA1290 是CagA 誘導胃黏膜腸化生機制中的一個重要通路[10]。體外實驗表明,miRNA1290 在胃癌細胞表達升高,而使用miRNA1290 抑制物后,胃癌細胞的增殖也受到抑制[15]。

    本研究發(fā)現(xiàn),與Hp 陰性患者比較,Hp 陽性患者胃黏膜組織miRNA584 和miRNA1290 表達均增加,提示Hp 感染可能導致miRNA584 和miRNA1290 表達上調(diào)。根據(jù)已有研究,我們推測miRNA584 和miRNA1290 可能在Hp 誘導胃黏膜細胞腸化生中起重要作用,但具體機制需要進一步深入研究。

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