降血脂軟膠囊對高脂血癥大鼠血脂的影響

馮婷婷，岳 娟，高首勤，任 蓓，嚴(yán)佳佳

（1.山西中醫(yī)藥大學(xué)，山西太原030024； 2.中國輻射防護(hù)研究院，山西太原030006；3.山西振東制藥有限公司，山西晉中030619）

高脂血癥（Hyperlipidemia）又稱為血脂蛋白異常（Dyslipoproteinemia），是指血脂代謝發(fā)生紊亂，脂肪代謝或轉(zhuǎn)運(yùn)異常，血漿中一種或者幾種脂質(zhì)濃度異常，包括血清總膽固醇（TC）、甘油三酯（TG）、低密度脂蛋白膽固醇（LDL-C）水平過高或血漿高密度脂蛋白膽固醇（HDL-C）水平過低。大量流行病學(xué)調(diào)查和研究均表明，高脂血癥是導(dǎo)致動脈粥樣硬化（AS）、冠心病、糖尿病等多種疾病的危險因素［1］。降血脂軟膠囊的處方為沙棘油1.5 g，紫蘇子油1.5 g，天然VE100 mg，魚油適量（100 mg）。本實驗觀察降血脂軟膠囊的降血脂功效，現(xiàn)將結(jié)果報道如下。

1 材料與方法

1.1 實驗材料

1.1.1 實驗動物 健康雄性清潔級8 w Sprague Dawley（SD）大鼠 55 只，體重約 160～180 g，購于中國食品藥品檢定研究院［許可證號：SCXK（京）2009-0017］。

1.1.2 實驗藥物 降血脂軟膠囊的處方為沙棘油1.5 g，紫蘇子油 1.5 g，天然 VE100 mg，魚油適量（100 mg），以明膠甘油為囊材制備軟膠囊（山西五臺沙棘汁有限公司提供）。辛伐他汀片（Simvastatin），杭州默沙東制藥有限公司，批號：100312。

1.1.3 實驗試劑 總膽固醇（TC）測定試劑盒（浙江東歐診斷產(chǎn)品有限公司提供，批號2011050040）；甘油三酯（TG）測定試劑盒（批號20110302）、低密度脂蛋白（LDL-C）測定試劑盒（批號20110312）、高密度脂蛋白（HDL-C）測定試劑盒（批號20110303）北京北華康泰臨床試劑有限公司生產(chǎn)；游離脂肪酸（FFA）測定試劑盒（南京建成生物工程研究所，批號20110730）；試劑均為市售分析純。

1.1.4 實驗儀器 電子天平（北京賽多利斯天平有限公司，型號BS110S）；低溫離心機(jī)（KUBOTA公司，型號5800）；高速冷凍離心機(jī)（Sigma 1-15K型）；酶標(biāo)儀（Thermo Electrom Corporation，型號 1500）；紫外可見分光光度計（上海菁華科技儀器有限公司，型號752）。

1.2 實驗方法

1.2.1 高血脂模型的制作 采用高脂飼料喂養(yǎng)法建立實驗性大鼠高脂血癥模型［2］。雄性SD大鼠55只，體重160～180 g，普通飼料喂養(yǎng)1 w，禁食不禁水12 h后，眼眶后靜脈叢取血，分離血清，按試劑盒方法測定血清總膽固醇，根據(jù)總膽固醇高低隨機(jī)分為5組，正常組、模型組、軟膠囊低劑量組、軟膠囊高劑量組、辛伐他汀組，每組11只。正常組用普通飼料喂養(yǎng)，其余4組用高脂飼料（2%膽固醇、0.5%豬膽鹽、10%豬油、0.2%丙基硫氧嘧啶，基礎(chǔ)飼料87.3%）喂養(yǎng)，連續(xù)喂養(yǎng)6 w后大鼠眼眶后靜脈叢取血，測定造模大鼠空腹TC水平，大鼠TC值大于 7 mmol/L 視為造模成功［2］。

1.2.2 肝指數(shù)的檢測 高脂喂養(yǎng)的同時，軟膠囊低、高劑量組分別按體重經(jīng)口給予40 g/kg、80 g/kg的降血脂軟膠囊，辛伐他汀組給予15 mg/kg的辛伐他汀，模型組和正常組給予等量的蒸餾水，連續(xù)6 w，1次/d。于給藥第42天，大鼠禁食不禁水12 h后，股動脈取血，再頸椎脫臼處死大鼠，解剖大鼠，肝臟稱重，計算肝指數(shù)。

1.2.3 體內(nèi)血清學(xué)指標(biāo) 各組于給藥后第14天、第26天、第36天（大鼠禁食不禁水12 h后），眼眶后靜脈叢取血，分離血清，按試劑盒方法測定TC。第42天（大鼠禁食不禁水12 h后），股動脈取血，再頸椎脫臼處死大鼠，分離血清測定TC、TG、FFA、HDL-C、LDL-C。

1.3 統(tǒng)計學(xué)方法

所有實驗數(shù)據(jù)以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（±s）表示，采用t檢驗進(jìn)行組間比較，P<0.05認(rèn)為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 藥物對高脂血癥大鼠肝指數(shù)的影響

與正常組相比，模型組大鼠的肝指數(shù)明顯升高（P<0.01）。與模型組相比，降血脂軟膠囊低、高劑量組及辛伐他汀組大鼠肝指數(shù)均降低，但差異無統(tǒng)計學(xué)意義。結(jié)果見表1。

表1 降血脂軟膠囊對高脂血癥大鼠肝指數(shù)的影響（±s）

表1 降血脂軟膠囊對高脂血癥大鼠肝指數(shù)的影響（±s）

注：與正常組比較，1）P<0.01

-2組別 劑量 肝指數(shù)（×10）正常組 - 2.72±0.02模型組 - 4.17±0.041）軟膠囊低劑量組 40 g/kg 3.74±0.03軟膠囊高劑量組 80 g/kg 3.59±0.04辛伐他汀組 15 mg/kg 3.98±0.04

2.2 降血脂軟膠囊對高脂血癥大鼠血清TC含量的影響

與正常組相比，模型組血清總膽固醇（TC）含量明顯升高（P<0.01）。與模型組相比，給藥后第36天降血脂軟膠囊高劑量組血清TC含量明顯降低（P<0.01），低劑量組和辛伐他汀組血清TC亦降低（P<0.05）；第42天血清TC檢測結(jié)果與第36天相同。結(jié)果見表2。

2.3 降血脂軟膠囊對高脂血癥大鼠血清TG和FFA含量的影響

與正常組相比，模型組TG、FFA含量均明顯升高（P<0.01）。與模型組相比，降血脂軟膠囊低、高劑量組和辛伐他汀組血清 TG、FFA含量均降低（P<0.05，P<0.01）?？梢姡笛浤z囊低、高劑量及辛伐他汀均可降低高脂血癥大鼠血清中甘油三酯和游離脂肪酸含量。結(jié)果見表3。

表3 降血脂軟膠囊對高血脂大鼠血清TG和FFA含量的影響 （±s）

表3 降血脂軟膠囊對高血脂大鼠血清TG和FFA含量的影響 （±s）

注：與正常組比較，1）P<0.01；與模型組比較，2）P<0.05，3）P<0.01

組別 劑量 TG（mmol/L） FFA（μmol/L）正常組 - 0.39±0.12 744.42±78.08模型組 - 0.95±0.071） 1 082.79±90.161）軟膠囊低劑量組 40 g/kg 0.59±0.152） 810.94±51.263）軟膠囊高劑量組 80 g/kg 0.45±0.133） 825.23±104.013）辛伐他汀組 15 mg/kg 0.41±0.083） 735.54±39.503）

表2 降血脂軟膠囊對高脂血癥大鼠血清TC含量的影響 （mmol/L，±s）

表2 降血脂軟膠囊對高脂血癥大鼠血清TC含量的影響 （mmol/L，±s）

注：與正常組比較，1）P<0.01；與模型組比較，2）P<0.05，3）P<0.01

組別 劑量 給藥前 給藥后第14天 第26天 第36天 第42天正常組 - 1.53±0.19 1.43±0.18 1.46±0.16 1.54±0.26 1.33±0.39模型組 - 1.50±0.24 3.12±0.731） 2.69±0.761） 6.94±1.921） 5.89±1.321）軟膠囊低劑量組 40 g/kg 1.57±0.29 3.33±1.50 2.80±1.06 5.05±0.932） 4.45±0.922）軟膠囊高劑量組 80 g/kg 1.58±0.27 3.09±1.88 2.99±0.94 4.06±1.563） 4.09±1.723）辛伐他汀組 15 mg/kg 1.51±0.23 3.16±0.85 2.72±0.76 5.22±1.722） 4.62±1.552）

2.4 降血脂軟膠囊對高脂血癥大鼠血清脂蛋白含量的影響

與正常組相比，模型組血清低密度脂蛋白（LDL-C）含量明顯升高（P<0.01），高密度脂蛋白（HDL-C）含量明顯降低（P<0.05）。與模型組相比，降血脂軟膠囊高劑量組、低劑量組和辛伐他汀組血清 LDL-C 含量均明顯降低（P<0.05，P<0.01），降血脂軟膠囊高劑量組和辛伐他汀組血清HDL-C含量均明顯升高（P<0.05）。結(jié)果見表4。

表4 降血脂軟膠囊對高血脂大鼠血清脂蛋白含量的影響（mmol/L，±s）

表4 降血脂軟膠囊對高血脂大鼠血清脂蛋白含量的影響（mmol/L，±s）

注：與正常組比較，1）P<0.01，2）P<0.05；與模型組比較，3）P<0.05，4）P<0.01

組別 劑量 LDL-C HDL-C正常組 - 1.05±0.42 1.28±1.20模型組 - 3.53±0.101） 0.99±0.332）軟膠囊低劑量組 40 g/kg 2.92±0.683） 1.07±0.50軟膠囊高劑量組 80 g/kg 1.69±0.104） 1.25±0.643）辛伐他汀組 15 mg/kg 2.48±0.993） 1.30±0.343）

3 討 論

高脂血癥，尤其是血漿總膽固醇水平升高是動脈粥樣硬化（AS）的重要危險因素之一［3］。血漿中TC、TG以及LDL-C的升高能促進(jìn)動脈粥樣硬化的發(fā)生，降低血脂，特別是LDL-C，可延緩或減輕動脈粥樣硬化的發(fā)生和發(fā)展。HDL-C是將肝外組織中的TC運(yùn)送到肝臟的主要運(yùn)載工具，是一種抗動脈粥樣硬化的脂蛋白［4］，HDL-C缺乏和LDLC升高是導(dǎo)致高脂血癥及AS的重要原因之一。HDL-C主要作用是接受肝外組織的膽固醇，將其變?yōu)閂LDL（極低密度脂蛋白），再轉(zhuǎn)運(yùn)到肝臟，其中的TC被肝臟清除，以保持TC代謝平衡。體內(nèi)脂質(zhì)過氧化反應(yīng)干擾了脂類代謝，而脂質(zhì)沉積的增多又加重了過氧化反應(yīng)，F(xiàn)FA、TG的增加為脂質(zhì)過氧化反應(yīng)提供了足夠的反應(yīng)基質(zhì)，抑制FFA活性并使其消耗增多，脂質(zhì)過氧化物終產(chǎn)物MDA（丙二醛）含量相應(yīng)增加，SOD（超氧化物歧化酶）含量相應(yīng)減少，使肝組織抗氧化能力減弱，從而導(dǎo)致動脈粥樣硬化。已有研究表明藥物可能具有抗氧化作用從而發(fā)揮抗動脈粥樣硬化作用［5］。

降血脂軟膠囊的處方為沙棘油1.5 g，紫蘇子油 1.5 g，天然 VE100 mg，魚油適量（100 mg）。沙棘油主要有沙棘籽油和沙棘果油，是分別從沙棘的種子和果肉中提取的油液，皆含有維生素、胡蘿卜素等多種生物活性物質(zhì)，用于臨床防治某些疾病或用于化妝品等［6］。紫蘇（Perillafrutescen）是傳統(tǒng)油料作物，為唇形科1年生草本植物，紫蘇籽含油量達(dá)46%以上，紫蘇油的開發(fā)利用、營養(yǎng)評價和研究已有過相關(guān)報道，對紫蘇油抗血栓、抗結(jié)腸癌、提高學(xué)習(xí)記憶能力等效應(yīng)均有所研究［7］。研究發(fā)現(xiàn)，維生素E在一定程度上有調(diào)節(jié)血脂代謝及抗氧化的作用［8］，維生素E缺乏癥患者不能吸收脂肪，血液和組織中生育酚水平低，增加紅血球脆性，縮短紅血球壽命，并增加尿中肌酸的排泄。早在20世紀(jì)50年代中期，人們就發(fā)現(xiàn)魚油具有降血脂的生理作用，但因其生產(chǎn)加工成本高，推廣和普及尚難惠及眾人?，F(xiàn)代實驗研究明確了深海魚油調(diào)節(jié)血脂的作用主要是通過降低血清 TC、TG和升高血清 HDL-C來實現(xiàn)的［9］。

本研究結(jié)果表明，降血脂軟膠囊40 g/kg、80 g/kg和辛伐他汀15 mg/kg均可以明顯降低高血脂大鼠血清TC、TG和LDL-C的含量，提高HDLC含量，降血脂軟膠囊作用和辛伐他汀相當(dāng)。即降血脂軟膠囊可以明顯調(diào)節(jié)脂質(zhì)代謝紊亂，有利對抗動脈粥樣硬化。降血脂軟膠囊40 g/kg、80 g/kg和辛伐他汀15 mg/kg均能降低血清中FFA含量，表明其可能通過抗氧化作用發(fā)揮降血脂和抗動脈粥樣硬化作用。