沈素晶,鄧超,李靄文,譚俊青
(廣東省第二中醫(yī)院檢驗(yàn)科,廣東 廣州 510095)
同一醫(yī)院同一項目有多套檢測系統(tǒng)已是相當(dāng)普遍的現(xiàn)象,各個檢測系統(tǒng)對同一份標(biāo)本的同一項目檢測結(jié)果應(yīng)具有可比性,這是檢驗(yàn)人員、所有廠商等共同努力的方向,追求檢驗(yàn)結(jié)果具有可比性是最實(shí)在的質(zhì)量[1]。降鈣素原(PCT)作為炎癥標(biāo)志物,在鑒別細(xì)菌性與非細(xì)菌性感染中相對其他炎癥標(biāo)志物有較高的靈敏度和特異性,具有極大的早期診斷價值[2,3]。PCT的檢測也日漸成為常規(guī)檢測項目,為了能夠使檢測方法更加規(guī)范,檢驗(yàn)結(jié)果更加準(zhǔn)確,我們在本院實(shí)驗(yàn)室2套化學(xué)發(fā)光檢測系統(tǒng)間進(jìn)行了PCT的相關(guān)性分析,現(xiàn)報道如下。
1.1 檢測標(biāo)本 第三方質(zhì)控品由郎道公司提供,批號 23745190 和 23748190,有效期均為 2018.9.30;患者血清163例,空腹采集靜脈血,及時分離血清檢測,經(jīng)羅氏Cobas e 602系統(tǒng)檢測所選血清標(biāo)本的降鈣素原的濃度范圍在0.01~100ng/ml之間。
1.2 檢測系統(tǒng) 新產(chǎn)業(yè)生物的Maglumi 2000 Plus全自動化學(xué)發(fā)光分析儀Snibe系統(tǒng)及其配套校準(zhǔn)品,Snibe 系統(tǒng)檢測 PCT 的范圍是 0.01~100nmol/L。羅氏Cobas 602電化學(xué)發(fā)光分析系統(tǒng)及Elecsys BRAHMS PCT試劑盒及其配套校準(zhǔn)品
1.3 檢測方法 新產(chǎn)業(yè)Maglumi 2000 Plus檢測系統(tǒng)Snibe,采用化學(xué)發(fā)光免疫分析技術(shù),發(fā)光標(biāo)記物異魯米諾及其衍生物直接被激發(fā)發(fā)光,通過測定光強(qiáng)檢測待測物質(zhì)。羅氏Cobas 602采用電化學(xué)發(fā)光法,通過光電倍增器測量發(fā)光強(qiáng)度,Elecsys軟件自動通過校準(zhǔn)曲線計算得到檢測結(jié)果。
以實(shí)驗(yàn)室日常使用的兩個水平的質(zhì)控物來比較兩個系統(tǒng)的精密度,每天檢測1次,連續(xù)檢測20d。另外,以羅氏廠家提供的兩個濃度的定值參考物質(zhì)做回收實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證準(zhǔn)確度。取定值樣本互相配比稀釋兩個濃度連續(xù)檢測取定值樣本互相配比稀釋三個濃度連續(xù)檢測3次去平均值,計算其回收率R。
以羅氏cobas 602系統(tǒng)檢測從門診,體檢和住院患者的血清標(biāo)本,從中選擇低中高值標(biāo)本163例,濃度包含 0.01~100ng/ml。 比較兩個系統(tǒng)的相關(guān)性,及評價新產(chǎn)業(yè)系統(tǒng)的臨床滿足程度。
1.4 判斷標(biāo)準(zhǔn) 以澳大利亞室間質(zhì)量評價標(biāo)準(zhǔn)T±4或T±20%作為日間CV的允許范圍;以%SE小于澳大利亞室間質(zhì)量評價標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定的允許誤差為臨床可接受標(biāo)準(zhǔn),以參考值上限、標(biāo)準(zhǔn)檢測系統(tǒng)本次不同濃度標(biāo)本檢測均值和醫(yī)學(xué)決定水平處的系統(tǒng)誤差來判斷檢測系統(tǒng)間是否可以接受[4,5]。準(zhǔn)確度的評價標(biāo)準(zhǔn)以回收率R在90%~110%為可接受范圍。
NCCLS的EP-9A2文件規(guī)定:兩方法的相關(guān)系數(shù)R2≥0.95,則兩方法結(jié)果一致。中國國家食品藥品監(jiān)督管理局醫(yī)療器械審評中心的 《體外診斷試劑分析性能評估(準(zhǔn)確度-方法學(xué)比對)指導(dǎo)原則》規(guī)定:免疫類產(chǎn)品兩方法學(xué)的相關(guān)系數(shù)R2≥0.90,則兩方法測定結(jié)果為一致。本文按照上述兩標(biāo)準(zhǔn)對新產(chǎn)業(yè)系統(tǒng)和羅氏系統(tǒng)檢測結(jié)果一致性進(jìn)行判斷。
3統(tǒng)計學(xué)分析 檢測結(jié)果的相關(guān)性分析采用線性回歸分析,以兩方法相關(guān)系數(shù)R作為判斷2種方法一致性的標(biāo)準(zhǔn)。檢測數(shù)據(jù)采用Excel軟件和SPSS 20.0軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)可比性分析、線性回歸方程及相關(guān)系數(shù)R值。
4.1 兩套檢測系統(tǒng)測定2個水平PCT質(zhì)控物測定結(jié)果見表1,其日間CV及總CV均小于T±20%的日間CV允許范圍。表1可見新產(chǎn)業(yè)Snibe系統(tǒng)在測定PCT質(zhì)控物時均值與羅氏C602相近,且精密度在允許范圍內(nèi)。
表1 不同檢測系統(tǒng)2個水平PCT質(zhì)控物測定結(jié)果
4.2 兩套系統(tǒng)正確度比較 選用的兩個定值校準(zhǔn)品濃度分別為 0.562ng/ml和 42.165ng/ml, 分別以1:4和4:1的比例混合為兩個濃度的配制樣本,以Snibe系統(tǒng)和C602系統(tǒng)測定3次求平均值計算回收率,結(jié)果如下:
表2 Snibe準(zhǔn)確度驗(yàn)證結(jié)果
表3 C602準(zhǔn)確度驗(yàn)證結(jié)果
從表2表3可見兩個系統(tǒng)的回收率均在90%~110%范圍內(nèi),表明兩個系統(tǒng)的準(zhǔn)確度在臨床可接受范圍內(nèi)。
4.3 PCT檢測結(jié)果相關(guān)性分析 用新產(chǎn)業(yè)Snibe系統(tǒng)和羅氏coba 602電化學(xué)發(fā)光法同時對受檢血清標(biāo)本進(jìn)行定量分析見表4。結(jié)果表明,兩種方法檢測結(jié)果的差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。
4.4 新產(chǎn)業(yè)Snibe系統(tǒng)與羅氏602系統(tǒng)比對的敏感度、相對特異性、總體符合率結(jié)果:新產(chǎn)業(yè)Snibe系統(tǒng)的相對敏感度為98.8%,相對特異性為100%,與羅氏C602系統(tǒng)測定結(jié)果的總體符合率為99.3%,兩者一致性很好,結(jié)果見表5。
表4 兩個系統(tǒng)測定不同濃度的新鮮血清PCT結(jié)果(ng/ml)
表5 新產(chǎn)業(yè)Snibe與羅氏C602比對結(jié)果(例數(shù))
4.5 新產(chǎn)業(yè)Maglumi Snibe系統(tǒng)與羅氏C602系統(tǒng)在陰性結(jié)果(PCT<0.05ng/ml)內(nèi)的符合率結(jié)果:新產(chǎn)業(yè)Snibe系統(tǒng)與羅氏602系統(tǒng)測定結(jié)果的符合率為97.1%,相關(guān)系數(shù)R2為0.968兩者一致性較好,見圖1。
圖1 新產(chǎn)業(yè)Snibe系統(tǒng)與羅氏602在PCT<0.05ng/ml檢測區(qū)間內(nèi)的相關(guān)性
4.6 新產(chǎn)業(yè)Snibe系統(tǒng)與羅氏602系統(tǒng)在低、高風(fēng)險膿毒血癥范圍內(nèi)的相關(guān)性比對 德國重癥學(xué)會在膿毒血癥診斷中提出 0.5ng/ml和 2.0ng/ml作為診斷截點(diǎn),PCT<0.5ng/ml表明膿毒癥不可能;PCT>2.0ng/ml表明膿毒癥高風(fēng)險,非常有可能成為嚴(yán)重膿毒癥或膿毒血癥休克。
結(jié)果表明,兩種方法檢測結(jié)果的差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05),當(dāng)在 PCT<0.5 ng/ml范圍內(nèi),相關(guān)系數(shù) R2=0.949 (見圖 2);在 PCT>2.0 ng/ml,相關(guān)系數(shù) R2=0.977(圖 3)。 根據(jù) NCCLS 的 EP-9A 規(guī)定,兩種方法檢測結(jié)果相關(guān)性良好。表明新產(chǎn)業(yè)檢測降鈣素原在預(yù)測臨床疾病效果與羅氏相當(dāng)。
圖2 新產(chǎn)業(yè)Snibe與羅氏602檢測PCT結(jié)果在膿毒癥低風(fēng)險范圍PCT<0.5ng/ml內(nèi)比對結(jié)果
圖3 新產(chǎn)業(yè)Snibe與羅氏602檢測PCT結(jié)果在膿毒癥高風(fēng)險范PCT>2.0ng/ml比對結(jié)果
PCT作為感染性疾病的診斷指標(biāo),具有敏感度高、特異度好、操作簡單、結(jié)果準(zhǔn)確快速等優(yōu)點(diǎn),已經(jīng)逐漸被臨床所接受并廣泛應(yīng)用,在感染性疾病的早期診斷、治療效果監(jiān)測及預(yù)后判斷等方面有重要的臨床意義。隨著臨床研究的不斷進(jìn)展,PCT也得到廣泛應(yīng)用[6]。如在肝衰竭合并感染[7]、人中樞神經(jīng)系統(tǒng)感染診斷[8]、克羅恩病[9]及指導(dǎo)抗生素的使用等[10]。目前檢測PCT的實(shí)驗(yàn)室檢測方法包括:放射免疫法[11]、雙抗夾心免疫熒光法[12]、膠體金標(biāo)法[13,14]、透射免疫濁度法[15]。目前最常用的檢測方法是電化學(xué)發(fā)光法[16],而且這種免疫檢測系統(tǒng)不會受到溶血、脂血和黃疸標(biāo)本的影響。但其中的相關(guān)性仍未有全面的相關(guān)性分析。
新產(chǎn)業(yè)Maglumi系統(tǒng)采用化學(xué)發(fā)光免疫標(biāo)記的方法檢測降鈣素原。近年來,化學(xué)發(fā)光免疫分析發(fā)展速度極快,結(jié)合化學(xué)發(fā)光的高靈敏度和抗體技術(shù)的高特異性,以靈敏度高、分離效果好、測定時間短、批間誤差小、無放射污染等特點(diǎn),已經(jīng)從實(shí)驗(yàn)室進(jìn)入臨床醫(yī)學(xué)的常規(guī)應(yīng)用逐步發(fā)揮主流作用。加之其檢測成本比羅氏系統(tǒng)低,檢測時間僅19min,可大大減少患者的經(jīng)濟(jì)壓力和縮短檢測時間。
本試驗(yàn)中,經(jīng)過驗(yàn)證,新產(chǎn)業(yè)的化學(xué)發(fā)光法與羅氏的電化學(xué)法在檢測PCT時精密度和準(zhǔn)確度均能滿足臨床要求并能達(dá)到比較高的水平。新產(chǎn)業(yè)在檢測病人血清標(biāo)本與羅氏系統(tǒng)相關(guān)性達(dá)99%以上,在預(yù)測膿毒血癥的相關(guān)性也達(dá)95%。表明新產(chǎn)業(yè)系統(tǒng)與標(biāo)準(zhǔn)化的羅氏系統(tǒng)具有良好的等效性,并且能滿足臨床需求。
綜上所述,本實(shí)驗(yàn)新引進(jìn)的新產(chǎn)業(yè)Maglumi 2000 Plus在檢測PCT時敏感度,精密度和相關(guān)性均可滿足臨床需求,可投入臨床使用。但因所選臨床病例不夠大量,日后使用過程中仍需密切觀察其性能,及時做好校準(zhǔn)和維護(hù),以便更好服務(wù)于臨床。