ACI患者血清NSE、S100b、HMGB1及FKN水平的變化及與腦水腫程度、NIHSS評(píng)分的關(guān)系

陳派強(qiáng) ，王學(xué)忠 ，董海波 ，周旭 ，武婉君

(河南大學(xué)附屬鄭州頤和醫(yī)院，1、檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)中心；2、神經(jīng)外科，河南 鄭州 450000)

急性腦梗死(acute cerebral infarction，ACI)是臨床常見的腦血管系統(tǒng)疾病，其發(fā)病率約占全部腦血管疾病的70%，由于早期發(fā)病較為隱匿，發(fā)病突然，常發(fā)生在休息或睡眠狀態(tài)下，發(fā)病后病情進(jìn)展迅速，病情兇險(xiǎn)，治療后效果較差，后期生活質(zhì)量較低，對(duì)患者的身心健康造成嚴(yán)重威脅[1]。隨著人口老年化的加劇，ACI的發(fā)病形式、發(fā)病年齡趨于年輕化，因此，早期診斷、治療腦梗死已成為臨床研究的重點(diǎn)。發(fā)病早期因腦組織缺血、缺氧，誘發(fā)機(jī)體炎癥介質(zhì)、趨化因子表達(dá)異常，刺激免疫系統(tǒng)抗原，激活大量炎性細(xì)胞浸潤(rùn)，損傷腦組織。臨床發(fā)現(xiàn)，神經(jīng)特異性烯醇化酶（neuron specific enolase，NSE）水平的變化能夠與測(cè)腦內(nèi)神經(jīng)系統(tǒng)損傷程度；S100b 蛋白（S－100 protein，S－100b）的水平隨腦梗死患者神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞損傷而升高；高遷移率族蛋白 1（high mobility group box－1，HMGB1）會(huì)加重腦梗死患者腦內(nèi)的炎癥反應(yīng)，從而加重患者的病情；不規(guī)則趨化因子（fractalkine/CX3CL1，F(xiàn)KN）水平變化改變神經(jīng)或血管內(nèi)皮細(xì)胞的粘附功能和趨化作用，從而參與到ACI的發(fā)病過程中[2]。本研究對(duì)我院120例ACI患者與60例健康志愿者檢測(cè)血清 NSE、S100b、HMGB1、FKN 水平， 并分析上述指標(biāo)與ACI患者NIHSS評(píng)分、腦水腫程度的關(guān)系。

1 資料與方法

1．1 一般資料 選取我院收集的120例ACI患者（ACI組），收治時(shí)間2014年1月－2017年1月，選取我院體檢中心健康體檢對(duì)象60例作為對(duì)照組。ACI組，男 64例、女 56例，年齡 46～79歲，平均63．1±10．2 歲，起病至入院時(shí)間 4～24h，平均 10．6±7．4h；NIHSS 評(píng)分 12．8±6．9 分，入院時(shí)患者收縮壓/舒張壓 140．2±11．7/81．4±9．2mmHg。 對(duì)照組， 男 33例、女 27 例，年齡 43～79 歲，平均 62．2±9．0 歲。 兩組的年齡、性別比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0．05）；本研究取得醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)的批準(zhǔn)，與研究對(duì)象均簽署知情同意書。

1．2 納入排除標(biāo)準(zhǔn)

1．2．1 納入標(biāo)準(zhǔn) ⑴ACI患者的診斷標(biāo)準(zhǔn)參考1996年全國(guó)第四屆腦血管病學(xué)術(shù)會(huì)議制定的診斷標(biāo)準(zhǔn)[3]；⑵患者年齡≤79歲；⑶患者入院后經(jīng)頭顱CTA、MRI檢測(cè)確診為急性腦梗死；⑷患者起病后24h內(nèi)入院；⑸對(duì)照組來源于本院體檢中心的健康研究對(duì)象。

1．2．2 排除標(biāo)準(zhǔn) ⑴腦出血、顱內(nèi)腫瘤、顱內(nèi)動(dòng)脈瘤破裂；⑵伴有凝血功能疾??；⑶顱腦外傷患者；⑷急慢性感染性疾病、免疫性疾病。

1．3 血清 NSE、S100b、HMGB1、FKN 檢測(cè)方法 所有患者入院后第二天早晨8時(shí)空腹抽取3ml肘靜脈血分別放置在3個(gè)含有肝素的抗凝管中，以3000r/min進(jìn)行15min離心，分離上層血清，保存至－20℃待檢。采用羅氏全自動(dòng)電化學(xué)發(fā)光檢測(cè)NSE、S100水平，試劑盒購(gòu)于上海吉瑪制藥技術(shù)有限公司。采用酶聯(lián)免疫吸附法 （ELISA）檢測(cè)HMGB1、FKN水平，試劑盒由深圳匹基生物工程有限公司提供。所有樣品檢測(cè)3次，取平均值。

1．4 腦梗死病情分級(jí) 根據(jù)美國(guó)國(guó)立衛(wèi)生院卒中量表（NIHSS）評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)[4]，該量表主要包括：意識(shí)水平、凝視、視野、面癱、左右上肢運(yùn)動(dòng)、左右下肢運(yùn)動(dòng)、肢體共濟(jì)失調(diào)、感覺、語言、構(gòu)音障礙、消退和不注意，將患者分為輕度組40例（NIHSS評(píng)分＜4分）、中度組 50 例（NIHSS 評(píng)分 4～15 分）、重度組30例（NIHSS評(píng)分＞15分）。

1．5 腦電阻抗擾電系數(shù) （CEI） 的測(cè)定方法 采用BORN－BE無創(chuàng)腦水腫動(dòng)態(tài)監(jiān)護(hù)儀對(duì)ACI患者患側(cè)的大腦半球腦電阻抗擾動(dòng)系數(shù)（CEI）進(jìn)行監(jiān)測(cè)，均進(jìn)行2次連續(xù)監(jiān)測(cè)，25min/次，選擇兩次腦水腫指數(shù)平均值作為最終結(jié)果。

1．6 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 統(tǒng)計(jì)軟件采用SPSS 16．0，采用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（±s）進(jìn)行統(tǒng)計(jì)描述，兩組間比較采用t檢驗(yàn)法，三組間比較采用單因素方差分析法；相關(guān)性分析采用Pearson線性相關(guān)分析法；P值＜0．05表示差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2．1 ACI組和對(duì)照組的血清 NSE、S100b、HMGB1、FKN及CEI值比較 ACI組患者的血清 NSE、S100b、HMGB1、FKN及CEI值均顯著的高于對(duì)照組，差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0．05）；見表 1。

2．2 不 同病 情程 度的 ACI組患者血 清 NSE、S100b、HMGB1、FKN及 CEI值比較 重度組的ACI患者的血清 NSE、S100b、HMGB1、FKN 及 CEI值均高于輕度組、中度組（P＜0．05），中度組的 ACI患者的血清 NSE、S100b、HMGB1、FKN 及 CEI 值均高于輕度組（P＜0．05）；見表 2。

2．3 ACI組患者的血清 NSE、S100b、HMGB1、FKN水平與CEI值、NIHSS評(píng)分的關(guān)系 ACI患者的血清 NSE、S100b、HMGB1、FKN 與 NIHSS 評(píng)分均呈顯著的正相關(guān)關(guān)系 （P＜0．05）；ACI組患者的血清NSE、S100b與 CEI值呈顯著的正相關(guān)關(guān)系 （P＜0．05）；ACI組患者的血清 HMGB1、FKN 與 CEI值的相關(guān)性不顯著（P＞0．05）；見表 3。

表 1 ACI組和對(duì)照組的血清 NSE、S100b、HMGB1、FKN 及 CEI值比較（±s）

表 1 ACI組和對(duì)照組的血清 NSE、S100b、HMGB1、FKN 及 CEI值比較（±s）

組別 n ACI組對(duì)照組t值P值120 60 NSE（pg/ml） S100b（pg/ml） HMGB1（pg/ml） FKN（pg/ml） CEI 2．89±0．64 1．15±0．16 20．711＜0．001 1．03±0．36 0．19±0．07 17．882＜0．001 33．82±11．70 2．95±0．92 20．376＜0．001 94．10±22．64 8．96±3．13 28．952＜0．001 7．94±0．55 6．50±0．39 18．119＜0．001

表2 不同病情程度的ACI組和對(duì)照組的血清NSE、S100b、HMGB1、FKN及CEI值比較（±s）

表2 不同病情程度的ACI組和對(duì)照組的血清NSE、S100b、HMGB1、FKN及CEI值比較（±s）

注：與輕度組比較 *P＜0．05，與中度組比較 #P＜0．05。

病情程度 n輕度組中度組重度組F值P值40 50 30 NSE（pg/ml） S100b（pg/ml） HMGB1（pg/ml） FKN（pg/ml） CEI 2．20±0．52 2．67±0．61*3．81±0．44*#14．209＜0．001 0．78±0．32 1．00±0．34*1．32±0．30*#22．876＜0．001 17．95±9．63 31．68±9．81*54．20±10．52*#29．173＜0．001 54．92±16．81 100．81±21．33*148．26±19．52*#25．772＜0．001 7．13±0．50 7．86±0．52*8．74±0．54*#17．08＜0．001

表3 相關(guān)性分析結(jié)果

3 討論

ACI作為一種常見腦血管疾病，局部腦組織因各種因素導(dǎo)致血液循環(huán)障礙，腦組織缺血、缺氧而誘發(fā)細(xì)胞軟化、壞死，具有高發(fā)病率、高死亡率、高致殘率的特征，以頭暈、頭痛、言語障礙為主要病癥，對(duì)患者的生命安全造成嚴(yán)重威脅[5]。因此，早期發(fā)現(xiàn)、治療是提高治療效果、改善預(yù)后的重要環(huán)節(jié)[6]。

臨床研究指出，NSE、S100b、HMGB1、FKN 在ACI發(fā)病過程中出現(xiàn)異常表達(dá)，其發(fā)病機(jī)制尚未明確[7]。NSE是一種酸性可溶性蛋白質(zhì)，屬于烯醇化酶基因超家族成員，主要由中樞神經(jīng)系統(tǒng)神經(jīng)元細(xì)胞與神經(jīng)分泌細(xì)胞所分泌，是神經(jīng)元損傷的敏感性標(biāo)志物[8]。S100b作為一種酸性鈣結(jié)合蛋白，主要由活化的星形膠質(zhì)細(xì)胞分泌，可以有效調(diào)控復(fù)雜神經(jīng)元，保護(hù)神經(jīng)細(xì)胞，其水平變化可以反應(yīng)膠質(zhì)細(xì)胞的正常狀況[9]。HMGB1是一種高度保守的核蛋白，屬于高遷移率族蛋白家族，主要分布在細(xì)胞核中，當(dāng)組織在受到刺激后會(huì)釋放至細(xì)胞外，與受體相結(jié)合，介導(dǎo)多種細(xì)胞合成與炎性介質(zhì)，激發(fā)炎癥反應(yīng)，加重腦組織缺血再灌注損傷[10]。FKN是一種趨化因子，屬于CX3C家族，常表達(dá)于血管內(nèi)皮細(xì)胞與神經(jīng)細(xì)胞表面，具有介導(dǎo)細(xì)胞黏附與趨化的雙重生物學(xué)作用[11]。臨床發(fā)現(xiàn)，NSE、S100b、HMGB1、FKN在血液中的含量較低，由于血腦屏障被破壞，中樞神經(jīng)系統(tǒng)釋放以上物質(zhì)至外周血，其水平變化能夠反映患者腦損傷程度[12，13]。

本研究中 ACI組患者的血清 NSE、S100b、HMGB1、FKN及CEI值均顯著的高于對(duì)照組 （P＜0．05），表明 NSE、S100b、HMGB1、FKN 水平與 ACI患病具有正相關(guān)性，可能由于ACI發(fā)病后，神經(jīng)元細(xì)胞膜完整性被破壞，神經(jīng)細(xì)胞所釋放的NSE、S100b、HMGB1、FKN水平增加，通過破壞的毛細(xì)血管進(jìn)入血液循環(huán)中，使得外周血中蛋白含量高于正常水平，同時(shí)HMGB1促進(jìn)炎癥反應(yīng)的發(fā)生，使患者病情加重。本研究發(fā)現(xiàn)，輕度組、中度組及重度組的 ACI患者的血清 NSE、S100b、HMGB1、FKN及 CEI值組間差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0．05），且隨著病情程度的加重，患者的血清NSE、S100b、HMGB1、FKN及CEI值均呈顯著的上升趨勢(shì)，這提示 NSE、S100b、HMGB1、FKN 及 CEI 值升高會(huì)增加患者機(jī)體炎癥反應(yīng)，加重血管和神經(jīng)細(xì)胞的損傷程度，從而加劇斑塊破裂，促進(jìn)動(dòng)脈粥樣硬化形成，使腦組織的損傷程度加重，因此監(jiān)測(cè)NSE、S100b、HMGB1、FKN 及 CEI值水平的變化，可以有效監(jiān)測(cè)病情的動(dòng)態(tài)變化，對(duì)腦梗死進(jìn)展具有預(yù)測(cè)意義。

CEI作為一種新型無創(chuàng)監(jiān)測(cè)技術(shù)，將低頻安全電流注入患者大腦左右半球，經(jīng)檢測(cè)兩半球電阻抗系數(shù)之差，反應(yīng)腦組織水腫的嚴(yán)重程度，一般而言，CEI數(shù)值越高，腦梗死面積越大，腦水腫越嚴(yán)重[14，15]。

本研究跟蹤觀察以上指標(biāo)與CEI、NIHSS評(píng)分， 結(jié)果顯示，ACI患者的血清 NSE、S100b、HMGB1、FKN與NIHSS評(píng)分均呈顯著的正相關(guān)關(guān)系（P＜0．05）；ACI組患者的血清 NSE、S100b 與 CEI值呈顯著的正相關(guān)關(guān)系 （P＜0．05）， 這說明 NSE、S100b、HMGB1、FKN可作為腦損傷的標(biāo)志物，與NIHSS、CEI具有密切聯(lián)系，可通過檢測(cè)其水平變化評(píng)價(jià)腦損傷的嚴(yán)重程度、治療效果。

綜上所述，本研究在傳統(tǒng)的檢測(cè)ACI血清指標(biāo)的基礎(chǔ)上加入 NSE、S100b、HMGB1、FKN， 同時(shí)分析血清蛋白、因子在ACI不同病情患者的表達(dá)水平變化，及其與NIHSS、CEI的相關(guān)性，以具體的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)證實(shí)了 NSE、S100b、HMGB1、FKN 在 ACI發(fā)生、病情發(fā)展及預(yù)后的顯著價(jià)值。表明ACI組患者的血清 NSE、S100b、HMGB1、FKN 顯著升高，與患者病情程度、腦水腫程度關(guān)系密切。