早孕期血清sFlt-1、PIGF水平及sFlt-1/PIGF比值與子癇前期的相關(guān)性研究

陳益明，盧莎，顧琳媛，何佩，褚雪蓮，吳蘭芬，連結(jié)靜，張敏，謝真

妊娠期高血壓疾?。℉DCP）是指懷孕20周以后出現(xiàn)的高血壓、蛋白尿及水腫的綜合征，是臨床上常見(jiàn)的嚴(yán)重危害母嬰健康的妊娠合并癥，在妊娠中的發(fā)生率近10%。發(fā)病時(shí)，已造成了腎、胎盤(pán)等由功能性發(fā)展為器質(zhì)性損害[1-2]。子癇前期（PE）是妊娠期高血壓疾病最具有代表性的類(lèi)型，病因和發(fā)病機(jī)制至今仍未完全闡明，嚴(yán)重威脅母體及圍生兒健康，是繼栓塞之后孕產(chǎn)婦死亡的第2大原因[1]。有研究表明妊娠早期和早期妊娠合并臨床特征的血管生成標(biāo)志物可溶性血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子受體-1（sFlt-1）和胎盤(pán)生長(zhǎng)因子（PIGF）的變化對(duì)預(yù)測(cè)子癇前期有很強(qiáng)的實(shí)用性[3-5]。為了解早孕期血清sFlt-1、PIGF水平及sFlt-1/PIGF比值與后期發(fā)生子癇前期的相關(guān)性，筆者檢測(cè)了93例妊娠期高血壓、子癇前期和同時(shí)期41例正常孕婦血清sFlt-1、PIGF水平，并比較了其水平及sFlt-1/PIGF比值情況?，F(xiàn)將結(jié)果報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 收集2014年 7月至2016年8月在杭州市余杭區(qū)婦幼保健院和杭州市婦產(chǎn)科醫(yī)院門(mén)診參加常規(guī)產(chǎn)前篩查，并住院分娩的妊娠期高血壓和子癇前期孕婦93例。根據(jù)病情嚴(yán)重程度[6]將其分為為妊娠期高血壓組（n=26）、子癇前期組（n=35）和重度子癇前期組（n=32），隨機(jī)抽取同時(shí)期經(jīng)隨訪確認(rèn)正常分娩孕婦41例作為對(duì)照組。所有研究對(duì)象均為單胎妊娠。在進(jìn)行檢查前，均知情同意并簽字。

1.1.1 納入標(biāo)準(zhǔn) 病例診斷依據(jù)妊娠期高血壓疾病診治指南（2015）的診斷標(biāo)準(zhǔn)[6]進(jìn)行；其中子癇前期：妊娠20周后出現(xiàn)收縮壓≥140 mmHg（1 mmHg≈0.133 kPa）和/或舒張壓≥90mmHg，或伴隨尿蛋白是否＞2.0g/24 h，或是否伴隨嚴(yán)重的肝、腎、腦等器官損傷，子癇前期可被劃分為輕度和重度。

1.1.2 排除標(biāo)準(zhǔn) 雙胎、多胎妊娠；合并慢性高血壓、心臟病、腎病、糖尿病、甲狀腺功能亢進(jìn)、結(jié)締組織病、血液病等慢性病史；吸煙；試管嬰兒；隨訪結(jié)果為21-三體、18-三體、13-三體以及其他出生缺陷；無(wú)免疫治療及輸血史；孕期無(wú)特殊用藥史；資料信息不全者；孕婦信息與血清標(biāo)本不匹配者。

1.2 取材和檢測(cè)指標(biāo) 入選的孕婦均接受B超檢查和必要的產(chǎn)前檢查。妊娠9～13+6周在各定點(diǎn)醫(yī)院抽取空腹靜脈血2～3 m l，靜置30 m in后，離心機(jī)半徑8 cm，以2500 r/min速度離心10 min并分離血清，保存于2～8℃冰箱，于1周內(nèi)送檢。檢測(cè)產(chǎn)前篩查項(xiàng)目后儲(chǔ)存于－80℃冰箱，完成病例積累后統(tǒng)一進(jìn)行檢測(cè)，檢測(cè)指標(biāo)為sFlt-1和PIGF。

1.3 試劑和儀器 sFlt-1由美國(guó)BIM公司生產(chǎn)，批號(hào)為20180111EB；PIGF試劑由美國(guó) BIM 公司生產(chǎn)，批號(hào)20180105EB。sFlt-1和 PIGF水平檢測(cè)應(yīng)用RT-6100酶標(biāo)儀（美國(guó)Rayto公司）和988洗板機(jī)（北京Tianshi公司）。檢測(cè)前將病例組和對(duì)照組的信息資料與儲(chǔ)存的血清標(biāo)本進(jìn)行匹配，并將血清標(biāo)本進(jìn)行低溫離心混勻和批量檢測(cè)，采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）分別檢測(cè)sFlt-1和PIGF濃度。檢測(cè)步驟按說(shuō)明書(shū)進(jìn)行。

1.4 統(tǒng)計(jì)方法 采用SPSS 21.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理。計(jì)量資料采用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示，多組比較采用單因素方差分析，兩兩比較采用Dunnett檢驗(yàn)。用受試者工作特征（ROC）曲線確定最佳臨界值、曲線下面積（AUC）和約登指數(shù)，并對(duì)sFlt-1、PIGF水平和sFlt-1/PIGF比值的篩查效能進(jìn)行評(píng)價(jià)。P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 基礎(chǔ)指標(biāo)比較 4組年齡、孕周、體質(zhì)量、收縮壓和舒張壓等差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均P＞0.05）。見(jiàn)表1。

2.2 4 組孕婦血清 sFlt-1、PIGF和sFlt-1/PIGF比值比較 妊娠期高血壓組、子癇前期組、重度子癇前期組sFlt-1水平均高于對(duì)照組（均P＜0.05），妊娠期高血壓組、子癇前期組、重度子癇前期組PIGF水平均低于對(duì)照組差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均P＜0.05），妊娠期高血壓組、子癇前期組、重度子癇前期組 sFlt-1/PIGF比值均高于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均P＜0.05）。見(jiàn)表2。

2.3 妊娠期高血壓組、子癇前期組、重度子癇前期組早孕血清sFlt-1、PIGF和sFlt-1/PIGF比值的效能分析 妊娠期高血壓組早孕血清sFlt-1、PIGF和sFlt-1/PIGF比值的 AUC分別為 0.743、0.804和0.787，三者對(duì)應(yīng)的靈敏度分別為92.30%、70.70%和96.20%。見(jiàn)表3。子癇前期組早孕血清 sFlt-1、PIGF和sFlt-1/PIGF比值的AUC分別為0.696、0.761和0.740，其對(duì)應(yīng)的靈敏度分別為70.60%、65.90%和79.40%。見(jiàn)表4。重度子癇前期組早孕血清sFlt-1、PIGF和sFlt-1/PIGF比值的AUC分別為0.703、0.774和 0.762，對(duì)應(yīng)的靈敏度分別為50%、65.90%和84.40%。見(jiàn)表5。

3 討論

子癇前期是孕20周以后新發(fā)高血壓伴有新發(fā)蛋白尿或者原有蛋白尿加重或者出現(xiàn)其他臟器功能障礙的妊娠期特有疾病[7]。子癇前期在全球范圍內(nèi)的發(fā)病率為5%～10%，在圍產(chǎn)保健不完善的地區(qū)或高寒地區(qū)，其發(fā)生率可高達(dá)15%～ 20%[8]。Anderson 等[2]對(duì) 2011—2015年發(fā)表的子癇前期相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行了評(píng)估，發(fā)現(xiàn)在最近幾年焦點(diǎn)都出現(xiàn)在懷孕前3個(gè)月預(yù)測(cè)子癇前期上，常見(jiàn)的生物標(biāo)志物有：妊娠相關(guān)血漿蛋白A（PAPPA）、PIGF、sFlt-1，這些生物標(biāo)志物對(duì)早發(fā)子癇前期具有很高的預(yù)測(cè)率，在假陽(yáng)性率5%時(shí)檢出率范圍在44%～92%。本研究主要是了解早孕期血清 sFlt-1、PIGF水平及sFlt-1/PIGF比值與妊娠后期是否發(fā)生妊娠期高血壓和子癇前期的相關(guān)性進(jìn)行探討。

表1 4組一般資料比較

表2 4組早孕期孕婦sFlt-1、PIGF及sFlt-1/PIGF比值比較

表3 早孕期sFlt-1、PIGF和sFlt-1/PIGF比值篩查妊娠期高血壓孕婦效率

表4 早孕期sFlt-1、PIGF和sFlt-1/PIGF比值篩查子癇前期孕婦效率

表5 早孕期sFlt-1、PIGF和sFlt-1/PIGF比值篩查重度子癇前期孕婦效率

本研究結(jié)果顯示，妊娠期高血壓組、子癇前期組、重度子癇前期組sFlt-1水平高于對(duì)照組；隨著子癇前期病情的進(jìn)一步發(fā)展，孕婦血清sFlt-1水平呈上升趨勢(shì)，sFlt-1在子癇前期的發(fā)生、發(fā)展中起促進(jìn)作用。PIGF水平低于對(duì)照組，隨著子癇前期病情的加重，血清PIGF水平呈下降趨勢(shì)，PIGF可能與子癇前期的發(fā)生有關(guān)。sFlt-1/PIGF比值高于對(duì)照組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均P＜0.05）。本文結(jié)果表明低水平的PIGF和高水平的sFlt-1是妊娠期高血壓和子癇前期發(fā)生的重要原因之一，與文獻(xiàn)報(bào)道一致[9]。Lynch等[10]結(jié)果表明妊娠早期婦女中PIGF水平顯著降低（P＜0.05）。PIGF水平降低與妊娠晚期子癇前期的發(fā)展有關(guān)。Foidart等[11]結(jié)果表明妊娠11～13周時(shí)，母體因素可溶內(nèi)皮糖蛋白（sEng）、PlGF和子宮動(dòng)脈最低脈動(dòng)指數(shù)（L-PI）的組合可以有效篩查早期子癇前期。Nevalainen等[4]結(jié)果也表明早發(fā)型子癇前期最好的早孕生物標(biāo)志物是 AFP、PIGF、RBP4和 sTNFR1。但 K leinrouweler等[12]研究表明假陽(yáng)性率為5%時(shí)，PlGF、sFlt-1和sEng發(fā)生子癇前期對(duì)應(yīng)的靈敏度分別為32%、26%和18%，對(duì)于臨床實(shí)踐中準(zhǔn)確預(yù)測(cè)子癇前期，這些標(biāo)記物的測(cè)試準(zhǔn)確性都很差。

本研究結(jié)果還顯示，妊娠期高血壓組早孕血清sFlt-1、PIGF和sFlt-1/PIGF比值的AUC分別為0.743、0.804和0.787，三者對(duì)應(yīng)的靈敏度分別為92.30%、70.70%和96.20%；子癇前期組早孕血清sFlt-1、PIGF和sFlt-1/PIGF比值的AUC分別為0.696、0.761和0.740，其對(duì)應(yīng)的靈敏度分別為70.60%、65.90%和79.40%；重度子癇前期組早孕血清sFlt-1、PIGF和sFlt-1/PIGF比值的AUC分別為0.703、0.774和 0.762，對(duì)應(yīng)的靈敏度分別為50%、65.90%和84.40%。上述這些結(jié)果與何雪儀[9]研究結(jié)果相似。Keikkala等[3]研究表明妊娠早期孕婦血清游離人絨毛膜促性腺激素 亞基（free--hCG）與PlGF、PAPP-A和母親危險(xiǎn)因素結(jié)合后，傾向于改善早產(chǎn)和早發(fā)性子癇前期的預(yù)測(cè)。Myatt等[13]研究表明sEng、PlGF和sFlt-1具有臨床特征的早孕期和中孕期的早期變化的AUC分別為0.88、0.84和0.86，并且對(duì)于具有88%的敏感性的早發(fā)性子癇前期。在妊娠早期和妊娠早期結(jié)合臨床特征的血管生成標(biāo)志物的變化對(duì)預(yù)測(cè)早發(fā)性子癇前期具有很強(qiáng)的實(shí)用性。

在 sFlt-1/PIGF比值篩查子癇前期方面，目前研究主要集中在對(duì)中晚期妊娠孕婦的檢查[14-15]。本研究結(jié)果顯示，妊娠期高血壓組、子癇前期組、重度子癇前期組的早孕期血清 sFlt-1/PIGF比值高于對(duì)照組（均P＜0.05）。3種標(biāo)志物對(duì)3組疾病的篩查靈敏度以sFlt-1/PIGF比值最高，早孕期孕婦血清sFlt-1/PIGF比值篩查子癇前期也同中孕期相似，明顯優(yōu)于單獨(dú)sFlt-1、PIGF篩查。因此，早孕期婦女血清高水平sFlt-1、低水平PIGF和高sFlt-1/PIGF比值的是妊娠期高血壓和子癇前期的危險(xiǎn)因素，采用sFlt-1/PIGF比值篩查妊娠期高血壓和子癇前期的效率優(yōu)于單用sFlt-1、PIGF的篩查效率。志謝 杭州市余杭區(qū)婦幼保健院病案室張萍，杭州市婦產(chǎn)科醫(yī)院病案室陳松鶴，杭州博圣生物技術(shù)有限公司技術(shù)部呂少磊、汪曉瑩等老師對(duì)本項(xiàng)目確診病例收集及數(shù)據(jù)匹配等方面提供幫助，在此表示感謝！