miRNA-30s在肺癌中的研究進(jìn)展

李軍芳，趙國芳，楊明磊，何立峰，董彩軍

基金項(xiàng)目：華美研究基金（2016HMKY05）

肺癌是目前全世界所有惡性腫瘤中發(fā)病率與病死率最高的疾病。由于肺癌早期臨床診斷方法特異性差、敏感度低，治療過程又缺乏有效的分子標(biāo)志物進(jìn)行動(dòng)態(tài)監(jiān)測指導(dǎo)治療，因此肺癌患者的治療效果并不理想。M icroRNAs（miRNAs）是一類內(nèi)源性的、非編碼單鏈小分子RNA，長度約為19～24個(gè)核苷酸，調(diào)控近60%的蛋白編碼基因[1]。m iRNA-30s是miRNAs的重要組成部分，由5個(gè)進(jìn)化保守成員組成，分別為 m iRNA-30a、miRNA-30b、m iRNA-30c、m iRNA-30d和 m iRNA-30e。研究顯示 m iRNA-30s在肺癌的發(fā)生、侵襲和轉(zhuǎn)移，以及抗癌藥物敏感性等方面具有影響作用。因此本文對 miRNA-30s在肺癌發(fā)生發(fā)展中所起的作用及應(yīng)用前景作一綜述。

1 miRNA-30s在肺癌細(xì)胞增殖和轉(zhuǎn)移中的作用研究

多項(xiàng)研究均顯示 m iRNA-30s具有抑制肺癌生長和轉(zhuǎn)移的作用。Kumarswamy等[2]把具有侵襲性的肺癌細(xì)胞系轉(zhuǎn)染m iRNA-30a后，發(fā)現(xiàn)癌細(xì)胞的形態(tài)發(fā)生改變，同時(shí)Snai1的表達(dá)下降，E-cadherin的表達(dá)升高，發(fā)現(xiàn)非小細(xì)胞肺癌中E-cadherin和m iRNA-30a表達(dá)呈正相關(guān)，隨后他們結(jié)合生物信息學(xué)和螢光素酶載體等實(shí)驗(yàn)方法證實(shí) Snai1可能是m iRNA-30a的靶基因。Fan等[3]研究肺癌細(xì)胞 95D上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)換過程發(fā)現(xiàn)，m iRNA-30a通過抑制Snail的表達(dá)，抑制EMT，進(jìn)而抑制肺癌細(xì)胞的入侵，結(jié)果與Kao等[4]研究相同。研究者體外研究發(fā)現(xiàn)，過表達(dá)的m iR-30a-5p通過抑制乳酸脫氨酶 A（LDHA）蛋白的表達(dá)，引起肺癌細(xì)胞的生長周期阻滯，抑制肺癌腫瘤細(xì)胞的體外生長、增殖和遷移[5-6]。其可能機(jī)制是糖酵解產(chǎn)生的乳酸造成局部酸性環(huán)境，促進(jìn)肺癌腫瘤血管生成，進(jìn)而促進(jìn)肺癌侵襲和轉(zhuǎn)移。因此，得出乳酸脫氨酶 A（LDHA）是m iRNA-30a-5p在肺癌中的靶基因。

在A549和H23非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞中miRNA-30b/c直接作用于Rab18，下調(diào)Rab18蛋白的表達(dá)，從而抑制非小細(xì)胞肺癌的增值[7]。miRNA-30d則通過與靶基因的3’-UTR結(jié)合，負(fù)性調(diào)控核心蛋白的表達(dá)，實(shí)現(xiàn)抑制自噬通路的激活，進(jìn)而抑制非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞的增殖和遷移。Kumar等[8]發(fā)現(xiàn)miRNA-30d通過與TP53的3’-UTR結(jié)合，直接負(fù)調(diào)控p53的表達(dá)與活性；研究發(fā)現(xiàn)抑制miRNA-30d表達(dá)可引起p53表達(dá)上調(diào)，同時(shí)通過調(diào)節(jié)p21、Gadd45a及Puma等相關(guān)基因的表達(dá)，促進(jìn)細(xì)胞衰老，誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡。Wu等[9]則發(fā)現(xiàn)，miRNA-30d通過與核因子IB（NFIB）的3’-UTR結(jié)合直接負(fù)調(diào)控NFIB的表達(dá)與活性，抑制癌細(xì)胞的遷移和入侵。另外Wu等[10]利用生物信息學(xué)和螢光素酶載體等方法發(fā)現(xiàn)miRNA-30e是抑制Ubc9的表達(dá)，發(fā)揮類似于抑癌因子的作用。

最近研究發(fā)現(xiàn)[11]，miRNA-30s可直接作用肺癌微環(huán)境中 MMP19的轉(zhuǎn)錄和翻譯，顯著抑制MMP19的表達(dá)，而過表達(dá)的MMP19可刺激上皮細(xì)胞的增殖和轉(zhuǎn)移，同時(shí)也是非小細(xì)胞肺癌不良預(yù)后的因素。

2 m iRNA-30s在肺癌診斷和預(yù)后判斷中的作用研究

由于肺癌患者早期多無癥狀或癥狀輕微，不易被發(fā)現(xiàn)，等到出現(xiàn)咳嗽、咯血、氣促及胸痛時(shí)，往往已是中晚期。所以肺癌的早期診斷非常重要，Volinia等[12]通過對肺癌及與之對應(yīng)的轉(zhuǎn)移性淋巴結(jié)進(jìn)行 miRNA微陣列分析研究，發(fā)現(xiàn)miRNA-30a/e和其它一些miRNA與腫瘤的進(jìn)展具有良好的表征關(guān)系。提示miRNA可作為轉(zhuǎn)移性癌基因靶標(biāo)鑒定的一種新的診斷方法[13]。

肺癌經(jīng)手術(shù)、放化療等綜合治療后，患者5年生存率仍低于15%[14]，其生存率較低的主要原因是復(fù)發(fā)和轉(zhuǎn)移。因此，成功、準(zhǔn)確地對肺癌進(jìn)行有效地判斷其轉(zhuǎn)移及預(yù)后對醫(yī)生和患者有很大益處。miRNA-30a可直接激活原癌基因（BCL11A），而BCL11A的過度表達(dá)對非小細(xì)胞肺癌患者的預(yù)后具有積極作用[15]。隨后也有研究表明 miRNA-30a-5p的表達(dá)與肺癌的TNM分期、轉(zhuǎn)移及預(yù)后均具有相關(guān)性[5]。對于miRNA-30b和m iRNA-30c，有研究報(bào)道了它們的表達(dá)與酪氨酸激酶抑制劑（KTIs）作為一線藥物治療NSCLC的預(yù)測價(jià)值[16]，結(jié)果表明在非小細(xì)胞肺癌組織中miRNA-30b和miRNA-30c表達(dá)均顯著下調(diào)，且呈正相關(guān)；但miRNA-30c的表達(dá)明顯高于miRNA-30b，提示KTIs作為一線藥物治療非小細(xì)胞肺癌時(shí)，miRNA-30b和miRNA-30c的表達(dá)可以作為肺癌預(yù)后的潛在標(biāo)記物。Hu等[17]研究Ⅰ～Ⅲa期肺癌患者的血清發(fā)現(xiàn)，較長存活組與較短存活組間miRNA的相對表達(dá)量相差5倍，其中miRNA-1、miRNA-30d、miRNA-1、miRNA-486 和miRNA-499與總生存期顯著相關(guān)，可作為總生存的獨(dú)立預(yù)測因素，也可作為一種非侵入性檢測，預(yù)測非小細(xì)胞肺癌患者的轉(zhuǎn)移及總體生存期，判斷患者的預(yù)后。隨后Silva等[18]分析了28例非小細(xì)胞肺癌患者體內(nèi)的miRNA-30e-3p的表達(dá)水平，并分析與患者臨床病理學(xué)特征的相關(guān)性，發(fā)現(xiàn)在非小細(xì)胞肺癌患者的血漿中miRNA-30e-3p表達(dá)下降，miRNA-30e-3p的表達(dá)水平可以判定患者疾病的分期和評估手術(shù)的可能性。這表明血漿中miRNA-30e-3p水平與患者無病生存率和總生存率有關(guān)，與非小細(xì)胞肺癌患者預(yù)后相關(guān)。

3 miRNA-30s對抗癌藥物敏感性作用研究

已有研究證實(shí)miRNA-30s在肺癌的藥物治療機(jī)制中具有重要作用。Kim等[19]和門萬夫等[20]先后均研究了肺癌細(xì)胞對克唑替尼的耐藥性，結(jié)果均表明miRNA-30a可以增強(qiáng)肺癌細(xì)胞對克唑替尼的敏感性，減弱癌細(xì)胞的侵襲力，原因是miRNA-30a對上皮細(xì)胞間質(zhì)轉(zhuǎn)化的抑制作用。另外門萬夫還發(fā)現(xiàn)肺腺癌細(xì)胞對克唑替尼敏感性的增加還與過表達(dá)的miRNA-30a抑制癌細(xì)胞的自噬有關(guān)。無論其抑制機(jī)制是怎樣，兩項(xiàng)研究結(jié)果均表明miRNA-30a可抑制克唑替尼在治療肺癌中的耐藥性，對肺癌的治療具有重要的作用。

Garofalo等[21]和Chen等[22]均研究了吉非替尼治療非小細(xì)胞肺癌的耐藥機(jī)制，均發(fā)現(xiàn)下調(diào)肺癌細(xì)胞中的 miRNA-30b和 miRNA-30c可誘導(dǎo)非小細(xì)胞肺癌對吉非替尼的敏感性增加，促進(jìn)細(xì)胞凋亡。前者結(jié)合生物信息學(xué)和螢光素酶載體等方法證實(shí) BCL2-like11和APAF-1可能是miRNA的靶基因；后者發(fā)現(xiàn)抑制Dicer酶，肺癌細(xì)胞中miRNA-30b/c的表達(dá)下調(diào)，Caspase-3蛋白表達(dá)上升，從而促進(jìn)細(xì)胞凋亡。以上關(guān)于藥物治療肺癌產(chǎn)生的耐藥機(jī)制和尋找增強(qiáng)腫瘤細(xì)胞對藥物的敏感性的方法具有重要臨床意義，可為患者和醫(yī)生帶來巨大受益。

綜上所述，m iRNA-30s在肺癌細(xì)胞的增殖、轉(zhuǎn)移及耐藥等方面具有重要作用。但是，目前m iRNA-30s在肺癌中的功能及與多靶點(diǎn)相互作用的關(guān)系研究并不完整，需要系統(tǒng)性地描繪miRNA-30s對肺癌作用的信號傳導(dǎo)的調(diào)控網(wǎng)絡(luò)，這樣能更系統(tǒng)直觀地體現(xiàn)m iRNA-30s的作用機(jī)制，可為肺癌的臨床治療提供新的潛在方法。尤其是在抗癌藥物耐藥方面的研究，需要大規(guī)模的臨床轉(zhuǎn)化研究。

收稿日期：2018-05-10

（本文編輯：陳志翔）

吳元元，毛琦，胡釗.成年人齒狀突影像學(xué)測量及其臨床意義（見正文第1437頁）

圖1 齒狀突基底部平掃，分別測量其冠狀位、矢狀位內(nèi)外徑

圖2 左側(cè)：在中央矢狀面，首先定義四個(gè)點(diǎn)，分別以A、B、C、D標(biāo)識。點(diǎn)A為腹側(cè)與基底交界處。點(diǎn)B為中空螺釘尾端到達(dá)部位，點(diǎn)C為腹側(cè)與基底交界處，點(diǎn)D為腹側(cè)皮質(zhì)中點(diǎn)，AB為中空拉力螺釘長度。角 、角 分別為螺釘與樞椎基底部和樞椎腹側(cè)夾角。右側(cè)：齒狀突高度：齒狀突尖至齒突基底部的垂直距離，為中央冠狀位上通過齒突尖與齒狀突基底部水平線間距離（H1）。樞椎總高度：齒狀突尖至樞椎基底的垂直距離，為中央冠狀位上通過齒突尖與樞椎基底部水平線間距離（H2）

圖3 齒體角（角1）為正中矢狀面上齒狀突與樞椎體正中線夾角。樞椎體后傾角（角2）為正中矢狀面上樞椎體正中線與基地部垂線夾角。KL、IJ為經(jīng)過齒狀突的平行線，EF、AB為通過樞椎體的平行線

諶建萍.甲狀腺乳頭狀癌超聲影像和頸部淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的關(guān)系（見正文第1444頁）

圖4 結(jié)節(jié)直徑和TI-RADS分級相結(jié)合構(gòu)建 曲線

唐夢君，陳美琴，胡望遠(yuǎn).全身炎癥反應(yīng)指標(biāo)與食管鱗癌患者放療后預(yù)后關(guān)系的分析（見正文第1446頁）

圖5 放療前不同 NLR水平食管癌患者的Kaplan-Meier生存曲線

圖6 放療前不同 PLR水平食管癌患者的Kaplan-Meier生存曲線

圖7 放療前不同 LMR水平食管癌患者的Kaplan-Meier生存曲線

陳良，陳振東，趙亦軍，等.早期肝癌3.0T MRI影像表現(xiàn)及診斷價(jià)值分析（見正文第1501頁）

圖1 男，56歲，肝硬化10余年，CT發(fā)現(xiàn)右肝后上段小病灶，無法確定性質(zhì)。a：T2W I呈高信號，周圍見低信號環(huán)包繞；b：DW I呈明顯高信號；c：動(dòng)脈期顯著強(qiáng)化；d：延遲期病灶呈低信號，周圍見高信號假包膜

石俊華，馬晨霞，來蕾.肉芽腫性小葉性乳腺炎患者彩色多普勒超聲的表現(xiàn)及診斷價(jià)值分析（見正文第1506頁）

圖2 肉芽腫小葉性乳腺炎三種分型超聲圖片注：A為片狀回聲型，B為結(jié)節(jié)（或）腫塊型，C為彌散型

余晶晶，楊育生，鄭江江，等.NapsinA、CK7、P504S、CD10及TFE3聯(lián)合應(yīng)用在乳頭狀腎細(xì)胞癌鑒別診斷中的價(jià)值（見正文第1521頁）

圖3 PRCC乳頭狀結(jié)構(gòu)，乳頭軸心可見泡沫細(xì)胞（HE 染色，×100）

圖 4 P504S（Envision 法，×100）

圖 5 CD10（Envision 法，×100）

王敏，虞繼紅，賀吉，等.不同固定液在細(xì)胞蠟塊技術(shù)中的應(yīng)用

（見正文第1523頁）

圖6 12%甲醛固定（HE染色，×400）

圖7 95%的乙醇固定（HE染色，×400）

圖 8 12%甲醛固定 CA125（免疫組化染色，×200）

圖 9 12%甲醛固定 wT-1（免疫組化染色，×200）

圖10 95%乙醇固定CA125（免疫組化染色，×200）

圖 11 95%乙醇固定 w T-1（免疫組化染色，×200）