DPS分析厚樸酚類提取物對(duì)四種植物病原真菌的抑制效果

于洋 李夢(mèng)婷 蘇耀華

摘? 要：為了解厚樸提取物對(duì)4種病原真菌的抑制作用，本研究采用生長(zhǎng)速率法測(cè)定了厚樸提取物對(duì)葡萄座腔菌（Botryosphaeria berengeriana）、細(xì)交鏈孢菌（Alternaria alternate）、污斑擬盤多毛孢菌（Pestalotiopsis foedans）、香蕉褐緣灰病菌（Pseudocercospora musae）的抑制作用并利用數(shù)據(jù)處理軟件DPS分析了相關(guān)數(shù)據(jù)，結(jié)果表明厚樸乙醇提取物對(duì)4種病原真菌都有一定程度的抑制，其中對(duì)污斑擬盤多毛孢菌（Pestalotiopsis foedans）的抑制作用最好，EC50值為0.0000069mg/mL，其次為細(xì)交鏈孢菌（Alternaria alternate）、葡萄座腔菌（Botryosphaeria berengeriana），EC50值分別為0.0009、0.0208，抑制效果最差的為香蕉褐緣灰病菌（Pseudocercospora musae），EC50值為0.1327 mg/mL;另外比較不同真菌毒力方程斜率，發(fā)現(xiàn)香蕉褐緣灰病菌（Pseudocercospora musae）、葡萄座腔菌（Botryosphaeria berengeriana）對(duì)厚樸提取物敏感性較好，污斑擬盤多毛孢菌（Pestalotiopsis foedans）、細(xì)交鏈孢菌（Alternaria alternate）敏感性較差。

關(guān)鍵詞： 厚樸;抑制作用;DPS;敏感性

中圖分類號(hào)：Q939.95? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? DOI：10.11974/nyyjs.20181032016

厚樸屬于木蘭科的一種喬木，主要分布地是在陜西、甘肅、四川、貴州等，生在大山跟路邊的雜草叢中，厚樸全身都是寶，全身每個(gè)部位幾乎都可以入藥[1-3]。厚樸中的活性成分豐富多樣，厚樸中含酚類、生物堿類和揮發(fā)油類等成分，厚樸酚是其主要活性成分[4]?，F(xiàn)在人們對(duì)厚樸的研究不斷深入，發(fā)現(xiàn)了很多有用的成分，厚樸中活性物質(zhì)的提取研究非常之多[5，6]，可以為厚樸活性物質(zhì)的不斷發(fā)掘充分充分利用給予幫助。

DPS數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)是由我國(guó)獨(dú)立開(kāi)發(fā)的集數(shù)據(jù)處理，制表繪圖等多種功能的數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)。常用的數(shù)據(jù)處理軟件有EXCEL、SPSS等，這些處理軟件只具有基礎(chǔ)的分析功能，SPSS進(jìn)行方差分析時(shí)，得出的結(jié)果不夠直觀，另外有好多英文版本，使用時(shí)多有不便，而DPS很好的克服了這些問(wèn)題，既能夠處理基礎(chǔ)數(shù)據(jù)，又能進(jìn)行專業(yè)的分析，得出的結(jié)果讓人一目了然。DPS被很多科研工作者所喜愛(ài)，如孟藝瑋等[7]采用DPS分析玉米秸稈的傳熱系數(shù)，徐偉等[8]利用DPS完美的實(shí)現(xiàn)了對(duì)隔異常值數(shù)據(jù)的檢測(cè)。

目前，植物病害的預(yù)防大部分還得靠化學(xué)藥物[9]。然而，長(zhǎng)期大量施用化學(xué)農(nóng)藥導(dǎo)致農(nóng)藥殘留及環(huán)境污染，危害人類健康并破壞生態(tài)平衡，同時(shí)也使病原菌產(chǎn)生了嚴(yán)重的抗藥性。因此，探尋其他環(huán)保、環(huán)境友好型防治方法已刻不容緩，還有待加大植物性抗菌活性物質(zhì)的基礎(chǔ)研究，以便于能夠研發(fā)更多具有植物性殺菌劑的品種。鑒于此，本試驗(yàn)對(duì)厚樸植物進(jìn)行提取，測(cè)定厚樸活性成分對(duì)不同真菌的抑菌活性，并用DPS分析了相關(guān)數(shù)據(jù)，旨為開(kāi)發(fā)針對(duì)植物有害真菌的植物源農(nóng)藥提供科學(xué)依據(jù)。

1? ? ? 材料與方法

1.1? ? ?材料

供試病原菌：葡萄座腔菌（Botryosphaeria berenger-iana）、細(xì)交鏈孢菌（Alternaria alternate）、污斑擬盤多毛孢菌（Pestalotiopsis foedans）、香蕉褐緣灰病菌（Pseudocercospora musae）。

1.2? ? ?方法

1.2.1? ? ?抑菌活性成分的提取

采用高雯等[10]厚樸酚類的提取方法濃縮后獲得濃度為1g/mL的母液，再將母液稀釋為5種不同濃度梯度，分別為0.05、0.1、0.2、0.4、0.8 g/mL。

1.2.2? ? ?抑菌活性測(cè)定

在這里測(cè)定厚樸乙醇提取物對(duì)4種病原真菌的抑菌活性使用了生長(zhǎng)速率法[11]。

1.2.3? ? ?數(shù)據(jù)處理與分析

通過(guò)DPS 7.05進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析并求得毒力回歸方程及EC50。

以葡萄座腔菌（Botryosphaeria berengeriana）數(shù)據(jù)為例對(duì)軟件進(jìn)行操作，將數(shù)據(jù)按照?qǐng)D1方式輸入DPS中，對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行選定，然后按照流程進(jìn)行操作，選擇專業(yè)統(tǒng)計(jì)→生物測(cè)定→數(shù)量型數(shù)據(jù)機(jī)值分析，即可得到圖2所示結(jié)果，關(guān)閉圖形可得到EC50數(shù)值。

2? ? ?結(jié)果與分析

從圖3和表1可以看出厚樸乙醇提取物對(duì)4種植物病原真菌都有一定的抑制作用，隨著濃度的增加對(duì)4種病原真菌的抑制作用也在增強(qiáng)。其中對(duì)污斑擬盤多毛孢菌（Pestalotiopsis foedans）的抑制作用最好，在5種濃度下其抑菌率都在90%以上，EC50值為0.0000069mg/mL，

其次為細(xì)交鏈孢菌（Alternaria alternate）、葡萄座腔菌（Botryosphaeria berengeriana）、香蕉褐緣灰病菌（Pseudocercospora musae），EC50值分別為0.0009、0.0208、0.1327mg/mL。

在毒力方程中斜率取決于厚樸提取物作用于病原真菌的敏感性的大小，兩者呈正比關(guān)系，按照此原理可判斷病原真菌對(duì)厚樸提取物的敏感性大小?？梢钥闯鱿憬逗志壔也【≒seudocercospora musae）和葡萄座腔菌（Botryosphaeria berengeriana）的斜率較大分別為0.8501、0.7655，表明這2種病原真菌對(duì)厚樸提取物較敏感;其次污斑擬盤多毛孢菌（Pestalotiopsis foedans）、細(xì)交鏈孢菌（Alternaria alternate）其毒力方程斜率較小，表明這2種病原真菌對(duì)厚樸提取物敏感性低。

3? ? 討論

研究表明厚樸乙醇提取液對(duì)葡萄座腔菌（Botryosphaeria berengeriana）、細(xì)交鏈孢菌（Alternaria alternate）、污斑擬盤多毛孢菌（Pestalotiopsis foedans）、香蕉褐緣灰病菌（Pseudocercospora musae）具有不同程度的抑制作用，其中抑制效果最好的是污斑擬盤多毛孢菌（Pestalotiopsis foedans），最差的是香蕉褐緣灰病菌（Pseudocercospora musae），通過(guò)比較不同真菌毒力方程中斜率大小，得出香蕉褐緣灰病菌（Pseudocercospora musae）、葡萄座腔菌（Botryosphaeria berengeriana）對(duì)厚樸提取物敏感性較好，出污斑擬盤多毛孢菌（Pestalotiopsis foedans）、細(xì)交鏈孢菌（Alternaria alternate）敏感性較差。本試驗(yàn)主要是采用藥用植物提取物來(lái)抑制幾種近期以來(lái)發(fā)生的特別嚴(yán)重的植物病害，為生物性藥物的進(jìn)一步研發(fā)和推廣提供基本的理論依據(jù)根本目的是用生物性藥物代替化學(xué)農(nóng)藥。另外有研究表明茶多酚與茶皂素混合可以明顯提高抑菌效果[12]，是否厚樸提取物與另一種抗菌物質(zhì)混用具有更好的抑菌效果有待進(jìn)一步研究。本文實(shí)驗(yàn)結(jié)果也主要是在實(shí)驗(yàn)室當(dāng)中測(cè)定的理論數(shù)據(jù)，厚樸提取物在田間對(duì)真菌性病害的作用還有待進(jìn)一步的研究。

本實(shí)驗(yàn)中利用DPS軟件快速簡(jiǎn)單的分析了相關(guān)的數(shù)據(jù)，形象生動(dòng)的得出實(shí)驗(yàn)結(jié)果。另外DPS在方差分析，水文分析，生物進(jìn)化分質(zhì)分類分析，地理分析方面具有很不錯(cuò)的表現(xiàn)，與國(guó)外其他軟件相比更加符合中國(guó)人的習(xí)慣，是科研工作者進(jìn)行數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)與分析的一款十分強(qiáng)大的軟件。

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